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1、钙对甜樱桃贮藏品质、钙形态及细胞超微结构影响-论文网论文摘要：研究了氯化钙（Chlo-Ca）、螯合钙（Che-Ca）和纳米钙（Nano-Ca）对甜樱桃贮藏品质及钙形态的影响，并采用焦锑酸钾沉淀-透射电子显微镜观察了不同钙处理樱桃贮藏后果肉细胞的超微结构特点。结果表明，Che-Ca处理提高了果实硬度，且有效的抑制了樱桃贮藏后硬度的降低和VC的消耗，但对果实采摘时维生素C含量影响差异不显著。3种钙处理增加了樱桃可溶性固形物的含量，对可溶性糖、可滴定酸和糖/酸影响较小。喷钙处理樱桃的全钙、水提取钙（H O-Ca）、乙醇提取钙（ALc-Ca）的含量均有不同程度增加。樱桃果肉中的钙主要以ALc-Ca的形
2、式存在，且Che-Ca处理中的ALc-Ca所占比例要显著高于Chlo-Ca 和Nano-Ca处理。贮藏后NaCl溶液提取钙（NaCl-Ca）、H O-Ca和ALc-Ca含量下降，醋酸提取钙（HAC-Ca）和盐酸溶液提取钙（HCl-Ca）的含量有所上升。贮藏60 d后的樱桃细胞超微结构照片显示喷清水处理的细胞壁有断裂，细胞膜系统部分消失，细胞内较干净，且少部分细胞有收缩现象，3种钙处理，细胞壁结构比较完整，发现较多的黑色物质存在，不均衡的分布于细胞壁、细胞膜、液泡膜和线粒体等系统中。论文关键词：甜樱桃,钙,贮藏,品质,超微结构 甜樱桃为蔷薇科(Rosaceae)樱属(CerasusMi
3、ll.)植物，是落叶果树中果实成熟最早的树种之一，素有“春果第一枝”的美称。其果实色泽鲜艳、香味浓郁、营养丰富并具有一定的医疗保健价值，因此深受国内外消费者的欢迎。但由于甜樱桃果实肉软、皮薄、汁多，属于不耐贮运的易腐烂水果，极易出现枯梗、褐变、果实软化、腐烂变质和风味变淡等现象，极大地限制了甜樱桃的异地销售。因此，甜樱桃的贮运保鲜日益受到人们的重视。国内外对甜樱桃的采后生理与贮藏保鲜技术进行了大量的研究，以适应延长销售期和远途运输的需要。关于樱桃贮存方法和技术的研究，除了常见的冷藏和气调贮存外，还包括了热处理、电离辐射、不同采收成熟度、纳他霉素处理等。钙处理也是果实釆后处理常用的方法之一，资料
4、显示钙（Ca(NO)或CaCl）能延长果实的贮藏时间，减少贮藏期间营养成分的消耗，也有研究证明，采前喷钙可减少成熟期甜樱桃果实裂果，维持和加强甜樱桃果实细胞壁结构、保持果实硬度。这些钙处理的研究多以Ca(NO)和CaCl等离子钙为主，而关于其他形式的钙，比如纳米钙、螯合钙等不同形态的钙对樱桃贮藏效果的研究鲜有报道，喷钙后对贮藏期间樱桃果实中钙组分、细胞超微结构等的研究也未见报道。因此本试验以“红灯”为供试试材，采用离子钙、螯合钙、纳米钙等不同形态的钙，研究了它们对樱桃贮藏品质、钙形态及细胞超微结构的影响，以寻求最适宜樱桃发育期使用的钙制剂，为大樱桃贮藏技术的进一步深化提供理论依据。1材料与方法
5、1.1试验材料试验于2007.5樱桃开花后在烟台市莱山区的樱桃园进行，试验地土壤类型为棕壤，其中有机质含量9.24g·kg，碱解氮含量41.61mg·kg，速效磷含量22.41mg·kg，速效钾含量110.35mg·kg。试材为生长正常长势相近的7年生甜樱桃，品种为“红灯”，平均地径为10.8cm，株高为320350cm，株行距350cm×250cm，平均结果量约17.5kg。1.2试验方法试验采用随机区组设计，每小区5株树，同行排列，重复3次。试验共设4个处理，将3.75gNAA溶解在250mL95%的乙醇中，取其中20mL加入50mL水混匀
6、后作为对照（简称：CK）；另取20mL的NAA乙醇溶液若干份加入50mL水，再分别加入9g氯化钙（简称：Chlo-Ca，钙含量为33.1%，天津市博迪化工有限公司生产）、15g螯合钙（简称：Che-Ca，钙含量为19.7%，中国农业科学院土壤肥料研究所提供）和7.5g纳米钙（简称：Nano-Ca，钙含量为39.7%，山东省农业科学院土壤肥料研究所提供）作为不同的钙处理，各处理钙总量保持一致。喷施时将各处理与25kg水混匀，分别于2007.5.14（花后第10d）、2007.5.21（花后第17d）和2007.5.28（花后第21d）喷施，喷施时均有针对性的喷至果实表面。2007.6.18采摘，
7、挑选成熟度一致、大小适中，无机械伤及无病虫害、发育正常的果实，一部分带回实验室进行可滴定酸度、可溶性糖、可溶性固形物、VC、硬度及钙组分的测定，另一部分立即运至0±1冷库中贮藏，60d后再进行各指标的测定，测定项目及方法同贮藏前，同时进行细胞超微结构的观察。1.2测定项目与方法1.2.1樱桃钙组分及全钙的测定各种化学形态钙的提取参照Ohat等人的试验方法。所用提取剂依次是80乙醇、蒸馏水、1mol·LNaCl、2%HAC，提取的主要组分见表1。具体操作步骤：挑选大小适中，无机械伤，无病虫害的果实若干，去掉果核和果皮，粉碎机粉碎，取一定质量的样品称重（约5g），置于50mL有
8、盖的离心管中，加入80乙醇3040mL，30恒温水浴振荡18h，8000r/min离心，倾出上清液以后继续用30mL80乙醇提取2次，每次振荡2h，再离心，然后用依次用蒸馏水、1mol·LNaCl、2%HAC和0.6mol·LHCl按上述步骤提取。每种提取剂提取的溶液定容到100mL，提取的溶液中的钙用原子吸收测定。全钙含量的测定采用干灰化-稀盐酸溶解法，重复3次。1.2.2超微结构观察观察方法参考周卫和陈见晖等的方法，略有改动。果实表面分别用自来水和重蒸水依次冲洗，晾干。选择近表皮的果肉细胞部分用不锈钢刀片切成适当大小，经钙定位固定液（2%戊二醛，2.5甲醛和2%焦锑酸钾
9、）固定，0.1mol·LpH=7.6磷酸钾盐缓冲液冲洗，1锇酸固定，0.1mol·LPBS液冲洗，梯度乙醇（45、55、70、85、92、100）乙醇溶液脱水，EPON812环氧树脂浸透、包埋、聚合，LKBV型超薄切片机进行超薄切片，捞片，切片用醋酸铀单染色，用日本电子JEOL-1200EX型透射电镜观察细胞的超微结构特点并拍照。表1植物体内钙的各种化学形态的提取步骤及其主要存在形式Table1Procedureofextractingchemicalfractionationsofcalciumanditsmainforms 提取顺序 Extracting sequence 提取剂 Extracting agent 组分缩写 Abbreviation 主要形态 Main forms 1 80%乙醇 ALc-Ca 硝酸盐、以氯化物为主的无机盐以及氨基酸盐等 2 蒸馏水 H O-Ca 水溶性有机盐、磷酸一钙等 3 1 mol·L NaCl NaCl-Ca 果胶酸盐、与蛋白质结合或呈吸附状态等 4 2%HAC HAC-Ca 磷酸二钙、磷酸三钙、碳酸钙等 5 0.6 mol·L HCl HCl-Ca 草酸钙等 1.2.3品质指标测定方法 测定贮藏后的样品时将试验样品从冷库中取出，20±1条件下平衡30min，然后进行各项目的测定。