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1、XXXXXX 医院检验科免疫室分析项目作业指导书Elecsys E 170/E 411总前列腺特异性抗原(TPSA)文件编号：LAB OP- MY020第1页，共5页版本：A/0生效日期：2008-02-011. 分析原理采用双抗体夹心法原理，整个过程18分钟完成。. 第1步：20 J标本、生物素标记抗 PSA单克隆抗体和钉（Ru）标记的抗PSA单克隆抗体混匀，形成夹心复合物。« 第2步：加入链霉亲和素包被的微粒，让上述形成的复合物通过生物素与链霉亲和素间的反应结合到微粒上。*第3步：反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液洗去，电极加电压后产生化学发光
2、，通过光电倍增管进行测定。检测结果由机器自动从标准曲线上查出。此曲线由仪器通过2点定标校正，由从试剂条形码扫描入仪器的原版标准曲线而得。2. 标本要求血清：按标准常规方法采集。00o血浆：肝素、EDTA-K或枸橼酸盐抗凝。其中用枸橼酸盐抗凝的血浆，测定结果需+10%标本在2 C .8C可稳定5天，-20 C可稳定6个月。只能冻融一次。含沉淀的标本使用前需离心。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前的温度应与室温平衡；放入仪器后应在2小时内测定以避免蒸发的影响。3. 试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。试剂：M链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5m
3、l。粒子浓度0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。R 1 :生物素标记的抗PSA单克隆抗体（灰盖），1瓶，10ml。浓度1.5mg/1 ,磷酸缓冲液0.1mol/l ，Ph6.0。含防腐剂。R2： Ru（bpy）32+标记的抗PSA单克隆抗体（黑盖），1瓶，10ml，浓度1.0mg/l，磷酸缓冲液0.1mol/l ，pH6.0。含防腐剂。校准品：Cal 1阴性定标液（白盖），2瓶，1.0ml/瓶,牛血清基质Cal 2阳性定标液（黑盖），2瓶，1.0ml/瓶,牛血清基质质控品：Elecsys PreciC on trol Tumor marker ,货号 11
4、776452PC TM1:2 瓶，2X 3.0ml质控血清PC TM2:2 瓶，2X 3.0ml质控血清其他所需材料：Elecsys通用稀释液货号11732277Elecsys1010 或2010分析仪文件编号：LAB OP- MY020 第2页，共5页版本：A/0生效日期：2008-02-01Elecsys 系统缓冲液（ProCell ）货号 11662988Elecsys 测量池清洗液（CleanCell ）货号 11662970Elecsys 添加剂液（SysWash 货号 11930346Elecsys 系统清洗液（SysClean）货号 112985004. 仪器和校准使用仪器：瑞士
5、罗氏诊断公司生产Elecsys 2010/E 170/E 411 全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准：每批FTPSA试剂盒必须用新鲜试剂和TPSA Cal 1,Cal 2定标一次。另外，以下情况需要再次定标：Elecsys2010 : 一个月（同一批号试剂） 7天（放置仪器上的同一试剂盒）各种分析仪均适用的情况：根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；根据规定进行多次标定。5. 操作步骤（以E 170为例）5.1校准操作步骤：在编缉各项目的参数时，已经在 Application Calib菜单中定义好了定标类型和几点定标。因此在对各项目进行定标时，只需在定标菜单Calibration 中进
6、行即可。3.2进入Calibration Status菜单，用鼠标选择需定标的项目，再根据需要点单点 定标（BLANK建）或两点定标（TWGPOINT键）、跨距定标（SPAN建）、多点定标（FULL键），再选择其它项目进行相应选择，最 后点SAVE将定标物放入在 Calibration Calibrator 中定义好的位置，点 Start，再点Start，仪器开始定标。在Calibration Status菜单中看定标结果，点 Calibration Result键看定标结果，点 Reaction Monitor 键看每个定标物的反应曲线。5.2样本检测程序：单个样本输入，在主菜单下选择Wor
7、kplace- Testslection ，在Sequenee No栏输入标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目点 SAVE建，样本号自动累加。批量常规标本的输入，在主菜单下选择Workplace- Testslection ，在Sequenee No栏输入起始标本号，然后选择该标本所需做的单个项目或组合项目点REPEAT输入该批标本的最后一个标本号，点0K即可。进样分析，将标本按在 Workplace菜单中输入的标本号顺序在样本架上排好，放入进样盘内，按START键，输入该批上机标本的起始标本号，再点 START键，仪器自动开始推架检测标本。6. 质量控制用Elecsys TPSA
8、质控品1和2 （PreciControl Tumor marker）。质控品1和质控品2至少每24小时或每一次定标后测定一次。质控间隔期应适用于各实验室的具体要求。检测值应落在确定的范围内，如出现质控值落在范围以外，应采取校正措施。7. 计算方法对每一个标本，仪器会自动计算 TPSA含量，单位是ng/ml或口 g/l o文件编号：LAB OP- MY020 第3页，共5页版本：A/0生效日期：2008-02-018.参考范围244例各年龄组的健康男性血清tPSA含量见下表：tPSA年龄 n中位数（ng/ml）第95%位数<40450.571.440-50420.592.050-60107
9、0.753.160-70411.654.1>7091.734.4Cutoff 值定为4ng/ml时，阳性预测值是39%（活检证实是恶性病变） 各实验室应对各自地区人群的tPSA正常值波动范围进行调查，如有必要应自己测定一个参考值范围。9. 分析性能10. 干扰因素该方法不受黄疸（胆红素65mg/dl ）、溶血（血红蛋白2.2g/dl ）、脂血（脂质1500mg/dl ）和生物素60ng/ml干扰。接受高剂量生物素（5mg/天）治疗的病人，至少要等最后一次摄入生物素8小时后才能采血。不受类风湿因子干扰（1500U/ml ）。28种常用药物经试验对本测定无干扰。tPSA浓度高达17000ng
10、/ml 也不出现钩状效应。接受过小鼠单抗治疗或体内诊断的病人可能会出现假阳性反应。偶尔可遇到高链霉亲和素抗体的干扰。在文件编号：LAB OP- MY020 第4页，共5页版本：A/0生效日期：2008-02-01少数患者中存在PSA异质体，可引起不同检测方法间的结果差异。Elecsys tPSA测定结果应结合病人病史、临床其他检查结果综合起来进行诊断。11. 临床意义前列腺特异性抗原(PSA)属糖蛋白，结构上与腺体的血管舒缓素有密切关系，具有丝氨酸蛋白酶的作用。在血液中，PSA可与蛋白酶抑制因子，如a-1-抗胰凝乳蛋白酶、a-2-巨球蛋白及其它急性时相反应蛋白，结合形成不可逆性复合物，PSA勺
11、蛋白水解酶活性受到抑制。除了以复合物形式存在外，有30%PS以游离形式存在，但无蛋白水解能力。血清tPSA升高一般提示前列腺存在病变(前列腺炎、良性增生或癌症)。由于PSA也存在于尿道旁和肛门旁腺体，及乳腺组织或乳腺癌，因此，女性血清中也可测出低水平的PSA前列腺切除后仍可测出PSA PSA测定主要用于监测前列腺癌患者或接受激素治疗患者的病情及疗效。放疗、激素治疗或外科手术切除前列腺后，PSA快速下降到可测水平以下，提示疗效好。前列腺炎或前列腺创伤(例如尿潴留、直肠检查后、膀胱镜、结肠镜、经尿路活检、激光处理等)可导致PSA不同程度、持续时间不一的升高。Elecsys tPSA测定法采用一种P
12、SA寺异的单克隆抗体和另一种 PSA-AC特异的抗体。12. 参考文献1. Henttu P, Vihko P. Prostate-specific Antigen and HumarGlandular Kallikrein:TwoKallikreins of the HumarProstate.Ann Med 1994;26:157-164.2. Tewari PC, Bluestein BI. Multiple forms of prostate specific antigen and the influences of immunoassay designon their measur
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19、(TPSA)文件编号：LAB- OP- MY020 第5页，共5页版本：A/0生效日期：2008-02-0113. Cohen RJ, Haffejee Z, Steele GS, Nayler SJ. Advanced Prostate Cancer With Normal Serum Prostate-SpecificAntigenValues. Arch Pathol Lab Med 1994;118:1123-1126.14. Bablok W, et al. A General Regression Procedure for Method Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.编写：审核：批准：批准日期：年月日