《HPLC法测定盐酸度洛西汀的含量及有关物质.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《HPLC法测定盐酸度洛西汀的含量及有关物质.doc（4页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、HPLC法测定盐酸度洛西汀的含量及有关物质【关键词】 高效液相色谱法；盐酸度洛西汀；含量；有关物质 摘要 目的：建立 HPLC法测定盐酸度洛西汀的含量和有关物质。方法：采 用 ODS2C1（8 4.6 mm×250 mm，5 m）色谱柱，流动相为 0.025 mol/L 磷酸二 氢钾溶液乙腈甲醇（ 322），流速为 1.0 mL/min ，检测波长为 290 nm。结 果：在 9.0 45.0 g/mL 范围内，色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系， r=0.9999 ；回收率 100.2%（RSD=0.75%，n=9），最低检测限 4 ng/mL 。结论： 该法准确、简便、灵敏，可用于
2、盐酸度洛西汀的含量测定及有关物质检查。 关键词 高效液相色谱法；盐酸度洛西汀；含量；有关物质 Determination of contents of duloxetine hydrochloride and its related substances with HPLC ZHUO Zhi1, WANG Qing2 （1.Chongqing Institute For Drug Control, Chongqing401121, China; 2. ChongqingShenghuaxi Pharmaceupical CO. LTD, Chongqing400061, China） Abst
3、ract Objective:To establish an HPLC method to detemine duloxetine hydrochloride and its related substances. Methods: A Diamonsil ODS2C18 column （4.6 mm × 250 mm, 5 m） was used with the mobile phase of 0.025 mol/L potassium dihydrogen phosphateacetonitrilemethol （322） at the detection wavelength
4、 of290 nm. The flow rate was 1.0 mL/min. Results: The calibration curve was linear in the range of 9.0 45.0 g/mL, r=0.9999. The averagerecovery was 100.2% （RSD=0.75%, n=9）. The minimum detection amount of duloxetine hydrochloride was 4 ng. Conclusions: This method is accurate, simple and sensitive,
5、and it can be used for the assay or related substances control of duloxetine hydrochloride.Keywords HPLC; Duloxetine hydrochloride; Content; Related substances 盐酸度洛西汀 1（ Duloxetine hydrochloride ）为一种口服选择性 5 羟色胺 （ 5HT）和去甲肾上腺素再摄取抑制剂（ SSNIR），主要用于治疗抑郁症和各种 抑郁状态及疼痛性躯体症状，也用于治疗妇女应激性尿失禁症，至今未见其含 量及相关物质测定的报道。本
6、文参考其类似物的测定方法2-5 建立了 HPLC法测定其含量及相关物质，方法准确可靠，操作简便。 1 仪器与试药 岛津 SPD10Avp型高效液相色谱仪， SPDM10Av二p 极管阵列检测器， CLASSVP6.2 色谱工作站；岛津 UV2401PC紫外分光光度仪。盐酸度洛西汀对照品（ HPLC面 积归一化法测定含量为 98.6%）由重庆圣华曦药业公司实验室精制，盐酸度洛 西汀（批号： 030301、030302、 030303）、胶囊（批号： 030414、030415、 030416）及辅料为重庆某公司提供。乙腈、甲醇均为色谱纯，磷酸二氢钾为分 析纯，试验用水为去离子水。 2 方法与结果
7、 2.1 色谱条件与系统 适用性试验色谱柱： Diamonsil ODS2C18柱（ 4.6 mm×250 mm，5 m）；流动 相： 0.025 mol/L 磷酸二氢钾溶液乙腈甲醇（ 322）；流速： 1.0 mL/min ； 检测波长： 290 nm；进样量： 20 L。在此色谱条件下，空白辅料对测定无干 扰，盐酸度洛西汀色谱峰的理论塔板数为 4 534 ，主峰的保留时间约为 8 min， 见图 1。图 1 盐酸度洛西汀色谱图 略 2.2 标准曲线取盐酸度洛西汀对照品 45.0 mg ，精密称定，置 100 mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻 度，摇匀。分别精密量取该溶液 2.0
8、 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mL 置 100 mL量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，制成系列溶液。在上述色谱条件下，精密量 取以上溶液各 20 L 注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积 A对浓度 C进行 线性回归，回归方程为： A=49432.5C+1951.81，r=0.9999 （n=6）。结果表明盐 酸度洛西汀浓度在 9.0 45 g/mL 范围内线性关系良好，在信噪比 S/N=3时， 最低检测限为 4 ng 。百事通2.3 稳定性试验取含量测定项下的同一份供试品溶液，在上述色谱条件下，室温下放置 0、2、4、8、16、24 h 后测定峰 面积，结果显示供试品溶液的峰面积
9、基本一致（ RSD=0.21%），说明溶液在室温 下 24 h 内稳定。2.4 精密度试验取含量测定项下的同一份供试品溶液，在上述色谱条件下自动连续进样 6 次，结果峰面积 RSD=0.32%。 2.5 峰 纯度检测取盐酸度洛西汀胶囊样品测定项下的供试品溶液，用 SPDM10Av二p 极 管阵列检测器对主峰的起点、顶点和终点进行峰纯度检测，结果主峰的纯度因 子为 1.0000 ，表明胶囊中的辅料和杂质对盐酸度洛西汀的含量测定无干扰。 2.6 回收率试验按处方标示量的 80%、 100%和 120%进行回收试验。分别取盐 酸度洛西汀对照品约 24、30、36 mg，精密称定后置 100 mL容量
10、瓶中，按处方 量加入空白辅料，流动相溶解并稀释至刻度，精密量取 10 mL 置 100 mL 容量瓶 中，流动相稀释至刻度，摇匀，照样品测定项下的方法，依法测定，结果平均 回收率 100.2%（ RSD=0.75%，n=9）。2.7 样品测定精密称取盐酸度洛西汀 30 mg，加流动相溶解并定量稀释制成 30 g/mL 的溶液，作为供试品溶液 （1）。取盐酸度洛西汀胶囊 10 粒，精密称定，取出内容物，囊壳拭净后再精 密称定，求出平均装量。精密称取内容物适量（约相当于盐酸度洛西汀 30 mg），置 100 mL 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取 续滤液 10 mL置 100
11、 mL量瓶中，加流动相并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶 液（ 2）。另精密称取在 105 干燥至恒重的盐酸度洛西汀对照品适量，同法 操作。照上述色谱条件，分别吸取供试品溶液（ 1）、（ 2）及对照品溶液各 20 L，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，结果见表1。2.8 有关物质检查按上述色谱条件，取本品适量，加流动相溶解并制成 2 g/mL的溶液，在 200400 nm的波长处扫描，结果显示本品在 230 nm和 290 nm附近均有最大吸收。因 290 nm 附近吸收峰用于有关物质检测的响应值低， 在此波长下杂质基本不出峰，而 230 nm 附近吸收峰的响应值高，且能够灵敏地
12、 检测到杂质的存在情况，故选择 230 nm 作为本品有关物质的检测波长。表1 样品含量测定结果 略 取本品适量，加流动相溶解并稀释成 0.4 mg/mL溶液，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液 1 mL，置 100 mL 量瓶中， 加流动相稀释至刻度，摇匀，作为自身对照溶液。取对照溶液 20 L 注入液相 色谱仪进行预示，调节检测灵敏度，使主峰高约为记录仪满刻度的20%，再取供试品溶液 20 L 注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的 2 倍。 结果显示供试品溶液的色谱图中杂质峰面积之和相当于 1.5%自身对照溶液的峰 面积。 3 讨论 在参考其他西汀类药物测定的 HPLC方法的基础
13、上，综 合考虑有机溶剂的种类、有机相与水相的比例等因素，选择了“ 2.1 ”项下的色 谱条件。在此条件下盐酸度洛西汀与杂质可达到基线分离，保留时间适中，辅 料不干扰测定。峰纯度试验表明，本文所建立色谱系统图 2 有关物质检查 略 能够达到主峰与辅料和杂质峰的完全分离，且检测灵敏度较高，操 作简便，结果准确可靠。本法除可用于盐酸度洛西汀及其胶囊的含量测定外， 也可采用自身对照法或面积归一化法对其杂质进行限度检查。 参考文献： 1 赵 静, 朱 珠 . 治疗重症抑郁和糖尿病周围神经病变的新药 ?D度洛西汀J. 中国药学杂志 , 2006, 41(14): 11181120.2 叶显撑, 王洪泉, 吴 涓, 等. RPHPLC法测定盐酸帕罗西汀片的含量 J. 中国现代应 用药学杂志 , 2001, 18 (3): 233234.3 张孝君, 倪乐平. 盐酸帕罗西汀中 R异构体的 HPLC测定 J. 中国医药工业杂志 , 2005, 36(3): 161162. 4 李美月 , 曾海虹. 高效液相色谱法测定盐酸帕罗西汀片中盐酸帕罗西汀 含量J. 中国药业 , 2006, 15(8): 23.5 何 娟, 周志凌, 李焕德. HPLCMS同时测定 4种新型抗抑郁药物的血药浓度 J. 药物分析杂志 , 2005, 25(12): 14281432. 百事通