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1、阶段质量检测（二）微生物的培养与应用（A卷 学业水平达标）（满分：100分时间：40分钟）一、选择题（每小题4分，共48分）1 平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是（）A .接种时再拿起来方便B.在皿底上标记日期等方便C .正着放置容易破碎D .防止皿盖上的冷凝水珠落入培养基造成污染解析：选D 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面湿度也比较高。将平板倒置，可以使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基，造成污染。2. 产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是（）A .一个细菌、液体培养基B.许多细菌、液体培养基C .一个细菌、固体培养基D .许多细菌、固体培养基解析
2、：选C 菌落是一个或几个细菌的子细胞群体，在固体培养基上有一定的形态，肉眼可见，而液体培养基不具备该条件。3. 需要在火焰旁操作的有（） 土壤取样 称取土壤稀释土壤溶液涂布平板 微生物的培养A .B.C .D .解析：选D 为了防止杂菌污染， 称取土壤、稀释土壤和涂布平板均应在酒精灯火焰旁 进行，土壤取样不用在火焰旁进行，但所用器具均应先灭菌再使用；微生物的培养在恒温箱中进行，无需灭菌。4. 下列关于微生物培养的叙述，不正确的是（）A .获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵B.高温灭菌的目的是杀死微生物的细胞、孢子、芽孢C .划线分离可在培养基上获得均匀分布的单菌落D .稀释涂布平板法易获得
3、单菌落和计数活菌数目高温灭菌的目的是杀死微生解析： 选 C 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌入侵； 物的细胞、 孢子、芽孢；稀释涂布平板法易获得单菌落和计数活菌数目； 划线分离可在培养 基上获得单菌落，但不是均匀分布的。5下列有关平板划线接种法的操作错误的是( )A 将接种环放在火焰上灼烧B. 将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液C .在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过酒精灯火焰D .划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连解析： 选 D 划线时最后一区的划线与第一区的划线不能相连。6. 制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，倒平板的具体描述正确的是( ) 待培养基冷却至 40 C左右时
4、，在酒精灯火焰附近倒平板 将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞 右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰 用左手的拇指和食指打开皿盖 右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖 等待平板冷却 510 s,将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上A .D .C. D .解析：选C 待培养基冷却至50 C左右，在酒精灯火焰附近倒平板；将灭过菌的培养 皿放在火焰旁的桌面上, 左手拔出棉塞, 用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙, 等待 平板冷却凝固 510 min 后,将平板倒过来放置。7. 在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养,可将自生固氮菌与其
5、他细菌分开,对培养基的要求是 ()加抗生素 不加抗生素 加氮素 不加氮素 加葡萄糖 不加葡萄糖 37 C恒温箱中培养 2830 C温度下培养A .D .C .D .解析：选 C 自生固氮菌有固氮功能, 因此培养基中不需要加氮素； 细菌对抗生素敏感, 因此, 不能加抗生素； 自生固氮菌是异养型的, 应加葡萄糖； 其生长繁殖的适宜温度是 28 30 C。()8. 若将酵母菌和圆褐固氮菌混合在一起,可采用下列哪组培养基将它们分开A 加食盐的培养基和牛肉膏、蛋白胨培养基B.固体培养基和液体培养基C 加伊红一美蓝的培养基和含硝酸盐的培养基D 加青霉素的培养基和无氮培养基解析： 选 D 青霉素可杀死原核生
6、物如细菌， 酵母菌为真菌， 因而不会被杀死。圆褐固 氮菌是固氮菌，无氮源也能存活，但酵母菌无法存活，借此可分离两种微生物。9. 细菌分离与计数实验操作过程应注意()无菌操作 做好标记 规划时间 土样灭菌A .D .C .D .解析：选 C 由于本实验操作复杂， 目的是对细菌进行分离和计数， 整个过程需要无菌 操作， 如取土样时用到的小铁铲和盛土样的信封及容器等均需灭菌， 土样称量、 样品稀释及 涂布平板等操作均在火焰旁进行； 本实验用到的平板和试管比较多， 为避免混淆， 最好在使 用前就做好标记；本实验耗时较长， 需事先规划好时间， 以便提高工作效率，在操作时更加 有条不紊。10. 下列有关纤
7、维素酶作用的验证实验的叙述，不正确的是()A .可用报纸、复印纸来代替滤纸条B.两支试管中所加缓冲液的量相等C .在一定范围内，滤纸条的分解速度会随着纤维素酶量的增加而加快D .振荡会加快滤纸条的分解解析：选 B 在验证纤维素酶作用的实验中， 两支试管中所加缓冲液的量分别为 10 mL 和11 mL ,加入10 mL的试管中还需滴加1 mL的纤维素酶，而另一支试管则不加。11. 下列关于微生物的分离与计数的叙述，错误的是()A. 因为土壤中各类微生物的数量不同，所以为获得不同类型的微生物要按不同的稀释 倍数进行分离B. 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不
8、同C .只有得到了 3个或3个以上菌落数目在 30300的平板才说明稀释操作比较成功， 并能够进行菌落的计数D .牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基解析：选C 如果涂布三个平板能够得到2个菌落数目在30300的平板，就说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数。 计数的方法是舍弃相差很大的一个，然后取平均值。12若将某种细菌置于含有营养物质的物体上，它会繁殖并形成细胞群。下列哪种实解析：选C 要检验抗生素的杀菌作用需要设置对照实验。检验抗生素甲的杀菌作用,可设置不加抗生素甲培养基培养细菌为空白对照，加抗生素甲的作为实验组， 适宜条件下培 养；同理也可检验抗生素乙的杀菌效果。、非选择题
9、（共52分）13. （16分）在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物），该除草剂在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育 能降解该除草剂的细菌，已知该除草齐恠水中溶解度低且含一定量该除草剂的培养基不透明。國琳申涧的上壤t壤浸出潦B,箱养黑髯面r.如2抚風其后划皱竹U.堀界華聊养（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行 处理。（2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：（填“固体”或“液体”）培养基且 。若需要调节培养基 pH，应 该在各种成分都溶化后且分装 （填“前”或“后”）进行。对培养基
10、进行灭菌， 常采用的方法是。（3）在划线前，接种环应该在酒精灯火焰上 。培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是 或有氧条件抑制了这些细菌的生长。（4）在固体培养基上形成的菌落中，无透明带菌落利用的氮源主要是，有透明带菌落利用的氮源主要是 ，据此可筛选出目的菌。（5）A细菌和B细菌都能降解该除草剂，研究发现以每克菌体计算，A细菌降解该除草剂的能力比B细菌要强，对此现象合理的假设是或从解析：（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。物理性质方面来看， 题图培养皿中培养基属于固体培养基， 且以该除草剂为唯一氮源。 若需要调节培养基 pH ，
11、应该在各种成分都溶化后且分装前进行。对培养基进行灭菌常采用高压 蒸汽灭菌法。 (3) 在以该除草剂为唯一氮源的培养基上，不能降解该除草剂的细菌(除具有固氮能力的细菌外 )是不能生长的。 (4) 在固体培养基中， 无透明带菌落利用的氮源主要是氮气； 有透明带菌落利用的氮源主要是除草剂，据此可筛选出目的菌。 (5)A 细菌降解该除草剂的 能力比B细菌强，可能的原因是 A细菌产生的酶活性更高或酶量更多。答案： (1) 稀释 (2)固体 以除草剂作唯一氮源 前 高压蒸汽灭菌 (3) 灼烧灭菌 培 养基中缺少这些细菌可利用的氮源(4)氮气 该除草剂 (5)A 细菌酶活性更强 A 细菌酶量更多14. (1
12、6分)(2013新课标H )临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗 生素的敏感性。回答下列问题：(1) 为了从样本中获取致病菌单菌落，可用 法或法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。(2) 取该单菌落适当稀释，用法接种于固体培养基表面，在37 C培养箱中培养24 h,使其均匀生长，布满平板。(3) 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板的不同位置上,培养一段时间后,含A 的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素 A ；含
13、B 的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该致病菌对抗生 素 B ； 含 C 的 滤 纸 片 周 围 的 透 明 圈 比 含 A 的 小 , 说 明;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明 圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D 的 。(4) 根据上述实验结果,为达到抗菌目的,最好选用抗生素 。解析：(1)微生物的常用分离方法为划线法和稀释涂布平板法。(2)能够使菌落均匀生长、布满平板的接种方法为涂布法。(3)(4)含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A敏感；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B不敏感；含C的滤纸片周围的透明圈比含 A的
14、小，说明该致病菌对 C的敏感性比对 A的弱；含D的滤纸片周围的透明圈比含 A的小，且透明圈中出现了一个菌落(排除杂菌污染)，说明该致病菌可能对抗生素 D 产生了抗药性。答案： (1)划线 稀释涂布平板 (或涂布 ) (2)涂布(3)敏感不敏感 该致病菌对 C 的敏感性比对A弱耐药菌 （4）A15. （20分）某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题：污水池中按鶉塀霁腐干犬际"测定接科1莉昵样品鲁和中化金物A的倉能厂、匝起弱
15、枕.直ii荻得廿的繭（1）培养基中加入化合物 A的目的是筛选 ，这种培养基属于 培养基。（2）目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ，实验需要振荡培养，由此推测目的菌的代谢类型是异养 （填“需氧”或“厌氧”）型。（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量的培养液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量 O （填“增加”或“减少”）（4）转为固体培养基时，常采用 和稀释涂布平板法进行接种，在前一种方法接种过程中所用的接种工具是 ，这种工具在操作时采用的灭菌方法是 O（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行 处理才能倒掉，这样做的目的是防止造成 O（6）某同学计划统计污水池中目的菌的总
16、数，他选用104、105、106稀释液进行涂布平板，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是。此对照实验的目的是证明 是否被杂菌污染。解析：（1）研究人员用化合物 A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物 A的细菌（目的菌）。培养基中加入化合物 A的目的是筛选目的菌，这 种培养基属于选择培养基。（2）目的菌生长所需的氮源和碳源都来自培养基中的化合物A,因为除了化合物 A,没有其他的氮源和碳源。实验需要振荡培养，振荡可以增加培养液中的溶氧量，由此推测目的菌的代谢类型是异养需氧型。（3）培养若干天后，应选择培养瓶中化合物A含量减少的培养
17、液，接入新的培养液中连续培养，使目的菌的数量增加。接种用到的方法一般有平板划线法和稀释涂布平板法，在前一种方法接种过程中所用的接种工具是接种针或接种环，这种工具在操作时采用的灭菌方法是灼烧灭菌。（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是防止造成环境污染。（6）从设计实验的角度看，还应设置一组空白对照实验来证明培养基是否被杂菌污染。答案：（1）目的菌 选择（2）化合物A 需氧 减少增加 平板划线法接种针(环 ) 灼烧灭菌 (5)灭菌 环境污染 (6)不接种的空白培养基培养基沁园春雪 < 毛泽东>北国风光，千里冰封，万里雪飘。望长城内外，惟余莽莽；大河上下，顿失滔滔。山舞银蛇，原驰蜡象，欲与天公试比高。须晴日，看红装素裹，分外妖娆。 江山如此多娇，引无数英雄竞折腰。惜秦皇汉武，略输文采；唐宗宋祖，稍逊风骚。一代天骄，成吉思汗， 只识弯弓射大雕。俱往矣，数风流人物，还看今朝。希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。一一普列姆昌德薄雾浓云愁永昼， 瑞脑消金兽。 佳节又重阳， 玉枕纱厨， 半夜凉初透。东篱把酒黄昏后，有暗香盈袖。 莫道不消魂，帘卷西风， 人比黄花瘦。