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1、脓液伤口标本细菌学检验标准操作规程1. 目的规范脓及伤口标本细菌学检验标准操作规程，确保检验 结果准确可靠。2. 适用范围 脓液培养或涂片检查。3. 标本3.1 标本类型 脓液。3.2 标本采集3.2.1 开放性脓性和脓性分泌物 用无菌盐水或 75% 酒 精擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡处采集 2 支拭子， 1 支 为涂片检查用， 1 支作培养用。3.2.2 大面积烧伤的创面分泌物 用灭菌棉拭取多部位 创面的脓液或分泌物， 置灭菌试管内 （注明采集部位） 送检。3.2.3 封闭性脓肿 消毒局部皮肤或粘膜表面后，用注射 器抽取，将脓液注入多功能培养瓶或无菌试管内送检。疑为 厌氧菌感染时，应作床边
2、接种或置厌氧运送培养基内送检。3.3 标本拒收标准3.3.1 标本标识与化验申请单不符。3.3.2 标本不是无菌留取。3.3.3 送标本的时间在采集标本后超过 2 小时。4. 试剂、仪器4. 1 革兰染液、氧化酶试剂、 3%触酶、血琼脂平板、巧 克力平板、麦克凯平板、相关生化试剂等。4.2 VITEK 鉴定系统；革兰阴性菌鉴定卡（ GNI+ ）、革 兰阴性菌药敏卡（GNS ）、革兰阳性菌鉴定卡（GPI）、革兰 阳性菌药敏卡（GPS）、真菌鉴定卡（YBC）、药敏纸片、TBA 板条等，有效期及储存条件参见试剂说明书。4.3 接种针、接种环、电热灼烧器、显微镜、孵育箱、 CO2 培养箱等。5. 细菌
3、鉴定和药敏质控参见质量管理程序6. 检验步骤 接收标本后，立即对标本进行编号、登记。6.1涂片检查 革兰染色镜检，报告“查见革兰X性菌， 形似XX菌”或报告“未查见细菌”。6.2 培养6.2.1 一般细菌培养 标本接种于接种于血琼脂平板、巧 克力琼脂平板和麦康凯（或 EMB 、中国蓝）琼脂平板，置于 5%-10%CO2 环境中， 35°C 培养 18-24 小时， 根据菌落及染 色形态特点，作出初步判断，作出初步判断，再按各类细菌 的生物学特性进行鉴定。6.2.2 厌氧菌培养 取脓液标本接种于厌氧血琼脂平板 及其他选择平板，置于厌氧菌环境培养，根据生长情况及涂 片染色结果，按厌氧菌生
4、物学特性进行鉴定。6.2.3 嗜血杆菌及奈瑟菌培养 接种于巧克力琼脂平 板，置 5%-10%CO2 环境中培养。6.2.4 结核分枝杆菌培养 参见结核分枝杆菌检验 标准操作规程 。6.2.5 真菌培养 可用沙氏培养基。7. 结果报告查见致病菌，报告菌名和药敏结果。8. 注意事项8.1 对于某些特殊病人 （如气性坏疽病人） ，在菌种鉴定 及药敏试验结果尚未报出之前，根据涂片镜检情况，采取治 疗措施。8.2 厌氧菌培养取得样本后，拭子应立即置于厌氧运送 管，尽可能少让样本暴露于空气中。穿刺时最好以针筒直接 抽取，避免接触环境中氧气。9. 临床意义 从脓液及创伤标本中能检出的病原菌微生物种类很多，
5、最常见的由葡萄球菌和链球菌引起的局部化脓性感染，包括 有毛囊炎、疖、痈、甲沟炎、扁桃体炎、乳腺炎、中耳炎、 外耳道疖肿、外耳道炎、细菌性结膜炎、脓疱疮、外科切口 及创伤感染等。化脓性骨髓炎、化脓性关节炎的主要致病菌 是金黄色葡萄菌。慢性骨髓炎和慢性化脓性关节炎病原菌 中，除上述细菌外，主要为结核分枝杆菌。脓液标本中可检 出铜绿假单胞菌、变形杆菌和类白喉棒状杆菌等，常为继发 感染或污染所致。气性坏疽主要致病菌为产气荚膜梭菌，其 次为水肿梭菌、败毒梭菌和溶组织梭菌等。坏疽常继发葡萄 球菌、链球菌、大肠埃希菌或其他需氧菌感染。器官脓肿和 机体深部组织的脓肿多为厌氧菌感染。危急值报告培养出产气荚膜梭菌
6、及时按传染病报告。参 考 文 献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL32:2008医学实验室质量和能力认可准则在微生物学检验领域的指南.20082 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解第二版.上海： 上海科学技术出版社，20073 叶应妩，王毓三，申子瑜主编全国临床检验操作规程第.三版.南京：东南大学出版社，20064 Murray PR. Manual of Clinical Microbilogy.9th ed.Washington: ASM Press， 20075 ISO15189:2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007编写人:AAA、BBB操作人：本室操作人员批准人：