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1、T-spot 的临床意义结核病目前仍是全球公共卫生的主要问题。丫干扰素释放试验通 过结核分枝杆菌特异性抗原刺激外周血单个核细胞释放的丫干扰素，明确有无结核分枝杆菌感染， 不会与卡介苗接种和其他环境分枝 杆菌感染产生交叉反应，特异度优于结核菌素皮试。目前有两种商业化的试剂盒用于体外检测丫干扰素，一种是基于酶联免疫吸附试验法，检测全血丫干扰素浓度；另一种是基于酶联 免疫斑点方法检测结核分枝杆菌特异性效应栽细胞斑点数， 如结核感 染栽细胞斑点实验（T-SPOT），其敏感度优于ILISA方法。病原学检查是目前结核病诊断的金标准，但儿童痰标本不易获 得，且常合并肺外结核， 因此儿童痰细菌学检查阳性的肺结
2、核患病率 仅为12. 3/10万。目前PPD试验作为潜伏结核感染诊断的主要工具， 在成人结核病患者的检出率仅为0. 39%。BC（接种后PPD常呈阳性反 应，目前尚无可靠标准区别出自然结核杆菌感染与卡介苗接种后的结 素反应；同时机体对PP啲反应程度受机体免疫系统状态的影响。以 结核分枝杆菌特异性抗原ESAT-砌CFP-10抗原为基础的EL1SPOT 试验方法敏感性高、特异性强。国外的大量研究数据表明， ELISPOT 试验检测结核感染的特异性达95%以上，敏感性达75%97%,尤其 适用于免疫抑制人群、潜伏结核感染者的诊断。 北京儿童医院孙琳、赵顺英报道 ：活动性结核病组中，21例患儿存在活动
3、性结核病症状，其PP试 验阳性，随后行ELISPO试验阳性19例，临床可以确诊结核病；另6 例患儿PP试验阴性，而ELISPO试验阳性5例，其中4例患儿临床诊断 血行播散性重症结核病，CD水平低于正常，推测4例患儿PP试验阴 性可能由于机体免疫功能低下， 机体迟发型免疫应答减弱所致； 这一 实验结果也进一步验证了 ELISPO方法受机体免疫功能状态影响小， 尤其是年幼儿在免疫功能低下或重症患儿使用免疫抑制剂时仍具有 较理想的敏感性。 该结果为临床诊断提供了有力证据， 尤其是可以为免 疫力降低的PP阴性结核病重症患者的临床诊断提供诊断依据。国外研究指出，ELISPO试验受机体免疫状态影响较小，只
4、有当 外周血CIM数小于100细胞/L时，其敏感性才会降低。但同时，在我 们研究结果中也发现，在27例活动性结核病患儿中有3例为ELISPOT 试验阴性，考虑为ELISPOT假阴性结果（取血量少造成细胞数量少、实 验操作误差等 ），此时应该结合临床资料综合分析做出临床诊断。需要指出的是，病原学检测均阴性的 27例活动性结核病患者中88. 9%ELISPOT0性，提示该实验对于肺外结核或者难以获取痰标本 的儿童结核病患者具有较高的诊断价值， 但仍需要进一步扩大样本量 进行验证。非结核性肺疾病组中，8例患儿PPD日性临床考虑结核感染，进一 步应用ELISPO方法检测后，仅有1例患儿为阳性，ELIS
5、PO阴性的7 例患儿均有卡介苗接种史，且为中等强度反应。因此7例PPEJ0性患儿 临床应首先考虑为卡介苗接种后的交叉反应， 并定期随访排除潜伏结 核感染。1例ELISPOT阳性患儿应结合临床考虑结核感染的诊断。该试验结果与国外研究结果一致，证明了 ELISPO试验具有较高的特异性， 是当前健康人群筛查潜伏结核的较有潜力的新方法。但由于ELISPOT试验存在操作技术要求高，费用昂贵等缺点，限制了其在经济发 展水平低的发展中国家的应用。本研究认为，当 l 临床医师不能准确判断结核分枝杆菌自然感染和卡介苗接种的PPD日性结果时，或当患儿PP试验阴性，临床结合病 史、影像学检查等综合分析不能除外结核病
6、存在时，ELISPOT试验可以作为一个重要的辅助诊断工具。 因此，在临床实际应用中将 ELISPOT 和PPD目结合应是我国目前较为合理、经济的诊断流程。其他情况也可以引起T-SPO阳日性：（1）自身免疫疾病引起的机体免疫紊乱，导致 T 淋巴细胞中非特异性IFN- y释放增多；（2）重症脓毒症患者机体 T 淋巴细胞处于高度活化状态，导致 T 淋 巴细胞中非特异性IFN- y释放增多；（3） 胞内病毒或胞内细菌严重感染时，T 淋巴细胞处于活化状态， 也会导致 T 淋巴细胞中的非特异性 INF-y 释放增多。可能影响T-SPOT检测的各项影响因素发现T-SPOT结果与性别、年龄、卡介苗接种史、结核病接触史、 机体免疫状态和感染部位均无关， 与孙琳等的报道符合， 说明 T-SPOT 在儿童结核病及结核分枝杆菌潜伏感染的临床诊断中具有重要价值。 不同结核诊断方法的灵敏度：（临床儿科杂志 2009年第九期报道）T-SPO试验 80.6%PPD试验48.4%结核抗体组 15%（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力就一定可以获得应有的回报）