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1、学习必备欢迎下载选修一：专题二：课题1 微生物的实验室培养学案知识清单一、培养基1概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。可分为培养基和培养基。2 营养构成：各种培养基一般都含有、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。3培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。二、无菌技术：( 一 ) 获得纯净培养物的关键是1对实验操作的、操作者的和2将用于微生物培养的、和3为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与( 二 ) 消毒和灭菌1消毒是指，具体操作如下：进行。
2、等器具进行。附近进行。相接触。常用的方法有、消毒法。2灭菌是指。常用的方法有：、灭菌。分别适用于那些用具？实验操作 -大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：、。2倒平板：待培养基冷却至左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：在火焰旁右手拿，左手；使锥形瓶的瓶口；左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板。二、纯化大肠杆菌微生物接种：最常用的是法和法。1平板划线法是的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是： 将在酒精灯火焰上灼烧直至。在酒精灯火焰旁冷却接
3、种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到的目的。将冷却的接种环伸入到。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环，盖上皿盖，不要划破培养基。灼烧接种环，冷却后从划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。将平板培养。2稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的，然后将进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的。系列稀释操作：取盛有mL水的无菌试管 6 支，编号 101、102、103、 104、105、106。学习必备欢迎下载用灼烧冷却的移液管吸取mL菌液注入编号为101 试管中，并吹打3 次使之混匀。从 101 倍液中吸取mL
4、菌液注入到编号为102 试管内吹打均匀，获得102 倍液。依此类推。结果分析与评价1 培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？二、课堂问题：思考 1从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？思考 2无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？思考 3利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？思考 4物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止。思考 6牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提
5、供什么等营养物质？思考 7锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？思考 8倒平板的目的是什么？思考 9若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？思考 10取菌种前灼烧接种环的目的是什么？为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？ 取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？最后灼烧接种环的目的是？。在第 1 次划线后都从上次划线末端开始的目的是？思考 11在某培养基上出现了3 种特征不同的菌落是什么原因？思考 12频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么？课堂练习：【例 1】下列关于微生物营养的说法，正确的是()A同一种物质不可能既作碳源又作氮源B凡是碳源都
6、能提供能量c除水以外的无机物仅提供无机盐D无机氮源也能提供能量【例 2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌 ( )A接种针、手、培养基 B 高压锅、手、接种针C培养基、手、接种针 D 接种针、手、高压锅【例 3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是()A 操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯学习必备欢迎下载C待培养基冷却至50左右时进行倒平板D待平板冷却凝固约510 min 后将平板倒过来放置【例 4】下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是（）A. 防止杂菌污染B. 消灭杂菌
7、C.培养基和发酵设备都必须灭菌D. 灭菌必须在接种前为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基：成分乳糖蔗糖磷酸氢伊红 Y美蓝蒸馏水PH钾含量5g5g2g0.4g0.065g1000g7.2（1）该培养基所含的碳源是，其功能是（2）该培养基所含的氮源是，其功能是（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是（4）该细菌在同化作用上的代谢类型是（5）该培养基用来鉴别的细菌是（）A 霉菌B大肠杆菌C酵母菌D乳酸菌。课后作业一、选择题、1下列有关培养基的叙述正确的是()A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质B 培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C 固体培养基中加入少量水即
8、可制成液体培养基D 微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌2. 不同培养基的具体配方不同，但一般都含 ( )A碳源、磷酸盐和维生素BC水、碳源、氮源和无机盐D氮源和维生素碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3获得纯净培养物的关键是()A 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌B 接种纯种细菌 C 适宜环境条件下培养 D 防止外来杂菌的入侵4下列常用的无菌操作中错误的是 ( )A用酒精擦拭双手B用氯气消毒水源c 实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D 玻璃器皿 ( 吸管、培养皿 ) 可用酒精擦拭5制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是 ( )A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌B计
9、算、称量、溶化、倒平板、灭菌C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6有关倒平板的操作错误的是 ( )A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上B 使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰c将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上D 等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7有关平板划线操作正确的是()A 使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B 打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 c 将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放人培养箱中培养8有关稀释涂布平板法，叙述错误的是()A 首先将菌液进行一系列的梯度稀释B 然后将不同稀释度的菌液
10、分别涂布到琼脂固体培养基的表面学习必备欢迎下载C再放在适宜条件下培养D结果都可在培养基表面形成单个的菌落9涂布平板操作需要用到()A接种环、滴管、酒精灯B接种环、移液管、酒精灯C涂布器、移液管、酒精灯D涂布器、接种环、酒精灯10将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是()A对比观察培养基有没有被微生物利用B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放人未接种的培养基D为了下次接种时再使用11关微生物营养物质的叙述中，正确的是A. 是碳源的物质不可能同时是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐D.无机氮源也能提供能量12作为自养生物唯一碳源的是（）A 糖类 B石油
11、C二氧化碳D花生粉饼13大肠杆菌的代谢类型是（）A 自养需氧B异氧严格厌氧C异养需氧D异养兼性厌氧14菌种保藏应控制的条件是（）（1）湿度（2） 低温（3） 干燥（ 4） 有光（5）隔绝空气（ 6）适当有氧A （1）（4）（6） B （2）（3）（6） C（1）（5）（6） D（2）（3）（5）15下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）A 含碳有机物B蛋白胨C含碳无机物D 花生粉饼等天然物质16平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（）A 利于大肠杆菌的接种 B 防止杂菌污染 C 利于培养的冷却 D 、防止皿盖冷却水倒流入培养基17含 C、H、O、 N的大分子化合物可以作为（）A 异养微生物的氮源
12、、能源B异养微生物的碳源、氮源C 自养微生物的氮源、能源、碳源D自养微生物的氮源、能源、碳源二、非选择题18鉴定培养基的制作是否合格的方法是： 将制备好的培养基放在中保温 1-2 天看有无，如果没有说明制作合格，反之则不合格。19请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。(1) 培养细菌用的培养基与培养皿 (2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手(1)、 (2)、 (3)2019 世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。(1) 根据你所掌握的知识分析导致生产失败的根源是什么?(2) 由此得出研究和应用微生物的前提是防止。21在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗 ?为什么 ?22在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线?