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1、·抗氧化活性· 诺丽的保健功效国际最新研究进展论文集食品科技.2012,35(10):92-94.诺丽鲜果与诺丽发酵汁的抗氧化及抑菌活性的对比研究诺丽鲜果与诺丽发酵汁的抗氧化及抑菌活性的对比研究龚敏 1,2，苏奎 1，邓世明1（1海南大学热带生物资源教育部重点实验室，2海口 570228；2.海南科技职业技术学院，海口 570228)摘要 采用DPPH·自由基法对诺丽鲜果和诺丽发酵汁的抗氧化活性进行了对比研究，研究发现诺丽鲜果的抗氧化活性大于诺丽发酵汁。还采用了滤纸片法对诺丽鲜果及诺丽发酵汁的抑菌活性进行对比研究，研究发现诺丽发酵汁的抑菌活性高于诺丽鲜果的抑菌活性
2、。关键词：诺丽鲜果，诺丽发酵汁，抗氧化活性，抑菌活性前言诺丽(Morinda citrifolia L.,Noni)系茜草科巴戟天属植物，产于南太平洋热带诸岛，我国海南、西沙和台湾有分布，为玻利尼西亚土著居民重要传统药用植物，其叶、根、皮和未成熟果实均能治疗疾病1。诺丽植株为灌木或小乔木，其果富含多种营养成分，还可用来治疗多种疾病，如糖尿病、高血压、心脏不适、疼痛、精神压抑及消化不良等2。目前诺丽产品主要有诺丽果汁、诺丽果粉胶囊，以及诺丽护肤品和其他丸剂。而诺丽发酵汁在市场上尤为畅销。另据美国长青国际集团对诺丽产品介绍，经3个月发酵后的诺丽汁能增加有益微生物体(酶、酵母和菌类等)的数量并提高质
3、量，从而增强有效成分的生物活性。发酵后的诺丽汁比未发酵的功效更强。据大量的文献报道诺丽具有很好的抗氧化活性、抗菌活性，但未见有关于诺丽鲜果与诺丽发酵汁的活性对比研究报道。为此，本文选用诺丽鲜果及诺丽发酵汁各萃取段作为研究对象，对其抗氧化活性、抑菌活性进行对比研究，拟为诺丽相关产品的开发与利用提供理论基础。1材料与方法1.1实验材料1.1.1实验原料诺丽鲜果、诺丽发酵汁均由海南大学农学院符文英老师提供。1.1.2实验菌种大肠杆菌（E.coli）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、普通变形杆菌（P.Vulgaris）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）：
4、海南大学公共实验中心微生物实验室。推荐精选1.2仪器与试剂1.2.1仪器 DZF-真空干燥箱，电热鼓风干燥箱，UV 2450 紫外可见分光光度计，HH-2 数显恒温水浴锅，旋转蒸发仪，KQ2200DE型数控超声波清洗器，精密天平1712 型，DNP 9082型电热恒温培养箱，SW-CJ-2FD超净台。1.2.2试剂 氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、无水乙醇有机试剂：分析纯，2.0×10-4mol/LDPPH(二苯代苦味酰基自由基)；牛肉膏；蛋白胨；氯化钠；琼脂；滤纸；培养皿。1.3实验方法1.3.1诺丽鲜果与诺丽发酵汁抗氧化、抑菌活性物质的制备 诺丽鲜果抗氧化、抑菌活性物质的制备：称取新鲜采
5、摘的诺丽鲜果约300g，加入5倍量95%的乙醇超声提取20min，过滤，弃滤渣。浓缩滤液，得浸膏。并将浸膏依次经氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩，回收溶剂分别得氯仿、乙酸乙酯、正丁醇段浸膏以备抗氧化、抑菌活性实验。诺丽发酵汁抗氧化、抑菌活性物质的制备：取诺丽发酵汁约2000mL，旋转蒸发仪浓缩(60)，得浸膏。并将浸膏依次经氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，浓缩，回收溶剂分别得氯仿、乙酸乙酯、正丁醇段浸膏以备抗氧化、抑菌活性实验。1.3.2 DPPH法抗氧化实验方法 取不同浓度测定液2mL及2.0×10-4 mol/L DPPH 2mL加入同一具塞试管中，摇匀，30min后用无水乙醇作参比
6、测定其吸光度Ai，同时测定2mL 2.0×10-4mol/L DPPH溶液与2mL无水乙醇混合液的吸光度A0，以及2mL不同浓度的测定液与2mL无水乙醇混合液的吸光度Aj，根据下列公式计算不同浓度测定液对DPPH 的抑制率3：抑制率（%）=1-（Ai-A）/A0×100 式中：A0 为未加测定液时DPPH 的吸光度； Aj 为测定液在测定波长吸光度； Ai 为加测定液后DPPH 的吸光度。1.3.3 滤纸片法抑菌活性实验方法 滤纸直径0.50cm，培养皿直径11cm，每片滤纸载样量2.0mg；金黄色葡萄球菌、大肠杆菌阳性对照为阿莫西林，载药量0.2mg；枯草杆菌、变形杆菌阳
7、性对照为硫酸庆大霉素，载药量0.2mg。30培养箱中培养24h后观察并测量抑菌圈的直径。每组做3次重复，实验结果取平均值。2结果与分析2.1 抗氧化活性研究推荐精选图1 诺丽鲜果与诺丽发酵汁清除DPPH自由基能力由图1可见，诺丽鲜果、诺丽发酵汁对DPPH自由基都有很强的抑制能力，诺丽鲜果和诺丽发酵汁随着浓度的增加，其对DPPH 自由基的抑制率增加。诺丽鲜果和诺丽发酵汁清除自由基的能力与诺丽鲜果、诺丽发酵汁的浓度呈明显的量效关系。但诺丽鲜果清除自由基的能力略高于诺丽发酵汁清除自由基的能力。图2 诺丽鲜果提取物各萃取段清除 DPPH 自由基能力由图2可见，随着溶液浓度的增加，诺丽鲜果各萃取段对DP
8、PH自由基的抑制率随之增加。诺丽果各萃取段清除DPPH自由基的能力与其溶液浓度呈明显的量效关系。且当乙酸乙酯段溶液浓度为0.3mg/mL时，其对DPPH自由基的清除率均已达到90%以上，氯仿、正丁醇段溶液浓度为0.5mg/mL时，其对DPPH自由基的清除率分别为73.9%、69.3%。由此可知，在低浓度范围(0.5mg/mL)，诺丽鲜果乙酸乙酯萃取段对DPPH自由基的清除率最高，各萃取段清除DPPH自由基的能力强弱顺序为乙酸乙酯段>氯仿段>正丁醇段。由图3可见，随着各段溶液浓度的增加，其对DPPH自由基的抑制率也会有所增加。诺丽发酵汁各段清除自由基的能力与其溶液的浓度呈明显的量效关
9、系。通过图3还发现在诺丽发酵汁各段中，乙酸乙酯段对DPPH自由基的清除率最高，其次为氯仿段。氯仿、乙酸乙酯、正丁醇段清除DPPH 自由基的能力强弱顺序为：乙酸乙酯段>氯仿段>正丁醇段。推荐精选图3 诺丽发酵汁各段清除 DPPH 自由基能力2.2 抑菌活性研究从表1 可以看出，诺丽鲜果和诺丽发酵汁及各萃取段对大肠杆菌都有一定的抑制作用，但诺丽鲜果及各萃取段以及发酵汁对金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌和枯草芽孢杆菌3个菌种均无明显的抑制作用。而经萃取的发酵汁各段对4种菌表现出明显的抑制作用，且发酵汁乙酸乙酯及正丁醇段对这4种菌的抑制效果明显，尤其是发酵汁乙酸乙酯萃取段对金黄色葡萄球菌和大肠
10、杆菌尤为敏感。表1 滤纸片法抑菌测定结果受试菌阿莫西林硫酸庆大霉素鲜果发酵汁鲜果提取物氯仿段乙酸乙酯段正丁醇段发酵汁氯仿段乙酸乙酯段正丁醇段金黄色葡萄球菌 20/6.56138.5大肠杆菌 21/8887.577139普通变形杆菌 / 2171110枯草芽孢杆菌 / 1971111注： “”表示样品对受试菌无抑制作用；“”表示样品对受试菌有抑制作用，括号内为形成抑菌圈的直径，单位mm。“/”表示未作对照。3 讨论自由基普遍存在于生物体内，是生命活动过程中的正常产物，但高浓度的自由基对人体和其他有机体有显著的损伤作用。自由基对人体的攻击首先从细胞膜开始，破坏细胞膜的弹性，从而使细胞膜丧失一切功能
11、，更为严重的是自由基对基因的攻击，引起基因分子结构的破坏，导致基因突变和累积，从而使整个生命发生系统性的混乱4。抗氧化活性实验结果表明：诺丽鲜果和诺丽发酵汁都有较强的清除DPPH自由基的能力，而诺丽鲜果清除DPPH自由基的能力略高于诺丽发酵汁，但就其诺丽鲜果和诺丽发酵汁提取推荐精选物各萃取段来说，两者的乙酸乙酯萃取段的清除DPPH自由基的能力最强。但诺丽鲜果和诺丽果发酵汁对人体是否具有清除自由基的能力，还需要进一步做动物体内实验。抑菌实验结果表明：诺丽鲜果提取物和诺丽发酵汁对金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌均无抑制作用，对大肠杆菌均有一定的抑制作用，且鲜果对大肠杆菌的抑制作用略优于发酵汁，但诺丽发酵汁乙酸乙酯和正丁醇萃取段对金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌的抑制作用明显。笔者认为，在诺丽发酵汁中，抑菌成分含量低，而萃取物各段富集了其抑菌有效成分，从而表现出较强的抑菌作用。综上所述，从体外实验结果看，诺丽鲜果和诺丽发酵汁都有较强的清除DPPH自由基的能力，鲜果的抗氧化活性略优于诺丽发酵汁，二者对金黄色葡萄球菌、普通变形杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌无明显的抑制作用。 （注：可编辑下载，若有不当之处，请指正，谢谢!） 推荐精选