《各种大肠杆菌菌株特点.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《各种大肠杆菌菌株特点.doc（2页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、各种大肠杆菌菌株特点1: DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转化时，可与载体编码的半乳糖苷酶氨基端实现a-互补。可用于蓝白斑筛选鉴别重组菌株。基因型：F-, $ 80dlacZ M临(lacZYAargF)U169 , deoR , recAI , endAI , hsdR17(rk-, mk+) , phoA , supE44 , k, thi-1 , gyrA96 , relA12: BL21(DE3)菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。 T7噬菌体RNA聚合酶位于 入噬菌体DE3区
2、，该区整合于BL21的染色体上。该菌适合表达 非毒性蛋白。基因型：F-, ompT , hsdS (rBB-mB ), gal, dcm (DE3) 3: BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基因，能 够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的 蛋白的表达。该菌适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。基因型：F-, ompT hsdS (rBB-mB ), gal , dcm ( DE3, pLysS , Camr 4: JM109 菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行 DNA转化或用M13 phage载体进行转染时，由 于载
3、体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZA M15进行a-互补，从而显示半乳 糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株TOP10菌株基因型：recA1 , endA1 , gyrA96 , thi 1 , hsdR17 , supE44 , relA1 , A (lac proAB ) /F 5:该菌株适用于高效的 DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型：F- , mcrA A (mrrhsd RMS-mcrBC) ,$ 80 , lacZ A M1強 lac X 74, recA1 ,ara A 139 A (aea)7697 , galU , galK , rps
4、,(Strr) endA1 , n upG6: HB101 菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型：supE44 , hsdS20 (rB-mB ),recA13 , ara 14, proA2 , lacY1 , galK2 ,rpsL20 , xyl-5 , mtl-1 , leuB6 , thi-17: M110 或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有 Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在 GATC序列 中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在 CCA/TGC序列的第一个 胞嘧啶C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生 dam,dcm，从而受到甲基化的影响.部
5、分限制性内切酶对甲基化的DNA不能切割，如FbaI和Mbol等，一般生物公司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响，如XbaI, BclI等。而且甲基化只发生在特定序列，以 XbaI为例，只有在位点序列旁出现 GA或TC,该XbaI位才会被甲 基化。而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法：(1) 选用上述酶的同功酶，如Sau3AI , DNA识别切割位点与 Mbol相同；但不受甲 基化影响；(2) 利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA的制备，如E.coli JM110和链霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶，从这些细胞中抽提的DNA就能被上述酶8: E.coli JM110每切割。要排除dam,dcm 甲基化的影响，需要用特定的dam-,dcm-的菌株，如 JM110如果由JM110或SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化