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1、荧光分析仪的原理及常见故障处理作者：史现 武、荧光分析法的基本原理处于基态的被测物质的分子在吸收适当能量，如光、化学、物理能后，其共价电子从成键分子轨 道或非键分子轨道跃迁到反键分子轨道上去， 形成分子激发态。分子 激发态不稳定，将很快衰变到基态C 在分子激发态返回到基态的同时常伴随着光子的辐射。这种现象就是发光现象。荧光则届于分子的光致发 光现象。二、荧光分光光度计的特点用荧光分析法分析的仪器，称荧光分光光度计。荧光分析法具有灵敏度高（比紫外、可见分光光度法高23个数量级），能提供激发光谱、发射光谱、发射强度、特征峰值等信息，在生物、环保、医学、药物、石油勘探等诸多领域都有广泛的应用。本仪器
2、不仅能直接、间接地分析众多的有机化合物；另外，还可利用有机试剂间的反应，进行近 70种无 机元素的荧光分析。荧光的光谱特征是荧光光谱总是滞后于激发光谱即斯托克斯位移.三、荧光强度与物质浓度的关系1 .对于某种荧光物质的稀溶液，在一定强度的激发光照射下，荧光物质的发射强度与入射光的强 度以及检测器的放大倍数成正比，可以用以下公式表示：F=KIFCK-与仪器系统有关的常数I- 入射光的强度F-荧光物质的荧光效率C-荧光物质的浓度2.当样品浓度增大到一定值时，荧光强度与浓度就不成线性关系。原因一：样品浓度较高时，液池前部的溶液强吸收则发生强的荧光，液池后半部的溶液不易受到 入射光照，不发生荧光，所以
3、荧光强度反而降低。原因二：在浓度较高的溶液中，可能发生溶液溶质与溶质间的相互作用，形成一种不致荧光的复 合物，从而造成荧光强度反而降低的现象。比如，硫酸奎宁的荧光分析曲线如下：IOC四、石油荧光分析仪的基本工作原理及结构由光源发出的光经滤光片后成为单色光，样品在此单色光的照射下，产生荧光，荧光由大孔径非 球面镜的聚光及光栅的分光后，照射丁光电倍增管上，光电倍增管把光信号转换为电信号，经放大处理， 最后由计算机输出显示或进行图谱打印。显示或打印信号放大接收器仪器主机主要由以下几部分组成:1.光遍2 .光门3 .负高压开美4.碱片5 .洋品池 也.单色使 L接收裾信号放大板9 .计算机危藐相10.
4、电源顿11.负高压滤1L慎流器13 .触发器14 .并关保险丝安装槟15 .威扇%口。4 5我器后面顿图1 .灯电涯开关 2.主机电我井关3,电胡插匿4 . 3A主机保险丝5 . 5A保隘丝也打印并行口L串行数据传输口 8 ,员高压自动启动转挽升关9手动伐高屋调节电位器五、仪器使用注意事项1 ）仪器使用交流220V± 10%频率为50Hz电源2）务必使用接地良好的三芯电源插座3）仪器应放置在平稳牢固的工作台面上4）应避开阳光直射5）仪器周围无强磁场、电场干扰6）各连接线需连接可靠7）打开仪器罩盖后，避免在负高压工作状态下有强光照射到接收器上8）注意开机顺序，一定待汞灯点亮后，才可开主
5、机电源开关以免击坏电路板六、部件的调换和维护进行仪器外壳拆卸和部件调换之前，务必关断仪器电源，拔离电源线。在调换某些部件时，需先把仪器外壳拆卸后，才可进行。仪器外壳两侧各有2个固定螺钉（见仪器 侧面图），后面板有5个固定螺钉（见仪器后面板图），旋下这些 螺钉后，打开样品室门，往上抬起仪 器外壳到其高度超过机身高度时， 才可往旁边放好外壳，在拆卸外壳的整个过程中，注意观察样品室门右边的负高压工作开关不 被碰撞而变形损坏。OOO外壳固定用螺钉> C役器后面板国1.光门的调换光门在仪器的中间部位，光门部件支架脚上有两个固定孔，用螺丝固定在仪器底板上。掉换光门 后，在原来的电线连接处重新接线，需
6、注意电线接头处的绝缘保护。光门都件图2 .电路板的调换仪器三块电路板位丁仪器左边后半部分，每块电路板分别有两个固定脚，拧开固定螺丝，换上新板即可.电瑕粒部件阕3 .负高压源的调换负高压源位丁仪器中后部的两个支架上，卸下之前请先拔下电源进线，旋下负压输出线员言压遍固定孔员高压源部件闵4 .汞灯的调换在进行汞灯调换时，请务必关断所有电源；调换汞灯时，注意不要用手触摸灯管表面。调换步骤 如下：1 ）打开仪器外壳灯室上方圆形塑料盖，即可看活灯室上方状况2）卸下固定滑板，即可看活灯室内部状况3）旋松汞灯上方电极的滚花螺帽，拿出连接线，注意不要将连接线滑入仪器内部4 ）通过固定灯用螺丝刀插孔旋松灯下端固定
7、螺钉5）拿出旧灯，换上新灯灯室上方示图灯底座图1.水平方向调节螺丝刀孔2 .固定灯用螺丝刀插孔3.水平方向调节螺丝刀孔光斑与狭缝七、仪器故障及判断检验仪器是否正常工作的简单方法开机稳定后，作一个纯净水的全波段扫描（200-600nm）,与正常仪器水的谱图相比较， 看谱图形状是否相近。观察水的散射峰是否在 254土 2nm左 右，观察水的拉曼峰是否在 279土 2nm左右, 看出峰位置是否正确。如果满足上述条件，说明仪器是正常的。-仪器开机自检不通过计算机系统出错（关机在开）驱动电路出错电机故障-显示结果不稳定光门开启不正常（时开时关，外界电压不正常）负高压不稳定光源不稳定样品本身不稳定-显示结
8、果异常偏低汞灯寿命到。或汞灯的光不能聚焦在其狭逢上，调节汞灯光源位置（见操作说明书）。灵敏度设置60和99,量其电压是否在550V和900V左右。不在则调之（在仪器面板 后面的负高压电位器）。-无结果显示无激发光源（汞灯不亮）无负高压（负高压坏或负高压微动开关没有彻底压下）光门没有开启（线断或坏）信号传输线断开-无负高压负高压开关没有被压下或坏（样品池盖子旁的微动开关）负高压转换开关在手动状态（在仪器后面板，扳到自动状态）检查负高压是否正常，检查方法如下：将仪器灵敏度设置为60,万用表在直流档1000V以上，把负高压的输出头拔下，万用表 的一头放在负高压的输出端，另一端接地（负高压的外壳或负高
9、压的接 地端），压下样品池下的微动开 关，测量电压值在550V左右。同样方法，将灵敏度设置为 99,测量其电压值在900V左右，如偏低，调 节仪器面板后放大板 上的电位器，将其调到900V左右。说明负高压正常。如果灵敏度设置从60到99变化，测量其电压不是以上范围或变化小，或不变，调节电 位器后仍不变，则负高压有问题。换之。-光源突然灭交流输入电源偏低汞灯坏镇流器或触发器坏-出峰位置不正确怀疑出峰位置有问题最好的方法是检测水的散射峰和拉曼峰，观察水的散射峰是否在 254土 2nm左右，观察水的拉曼峰是否在 279土 2nm左右，如在则没问题。如偏离，调节方法如下：打开仪器，打开光路部分的盖子，
10、调节光栅后面左下方的螺钉，先松开里面的螺钉，调 节外面的螺钉，幅度不要太大,大概 15度左右为1nm如波长偏大，贝U顺时针调节，反之，逆时针调节。 调一点，测一次，幅度不要太大，正确后固定里面的螺钉。七、结束语OFA石油定量荧光仪中除汞灯外大多数电路为小功率电路，一般情况下不容易损坏，很多故障经 过调节机内的可调部件便可解决。由于该定量荧光仪的汞灯的开关和主机开关分离，在使用过程中，如果开机顺序错误，很容易导致放大电路损坏。所以，建议厂家进行改进，可以先给微电脑和汞灯加电，在 检测汞灯的状态正常后 再给放大电路加电。只需对电路和微电脑的程序少做改动即可解决。这样便可避 免由于开机顺序的缘故导致
11、仪器的损坏。nbsp;负高压不稳定光源不稳定样品本身不稳定-显示结果异常偏低汞灯寿命到。或汞灯的光不能聚焦在其狭逢上，调节汞灯光源位置（见操作说明书）。灵敏度设置60和99,量其电压是否在550V和900V左右。不在则调之（在仪器面板 后面的负高压电位器）。-无结果显示无激发光源（汞灯不亮）无负高压（负高压坏或负高压微动开关没有彻底压下）光门没有开启（线断或坏）信号传输线断开-无负高压负高压开关没有被压下或坏（样品池盖子旁的微动开关）负高压转换开关在手动状态（在仪器后面板，扳到自动状态）检查负高压是否正常，检查方法如下：将仪器灵敏度设置为60,万用表在直流档1000V以上，把负高压的输出头拔下，万用表 的一头放在负高压的输出端，另一端接地（负高压的外壳或负高压的接 地端），压下样品池下的微动开 关，测量电压值在550V左右。同样方法，将灵敏度设置为 99,测量其电压值在900V左右，如偏低，调 节仪器面板后放大板 上的电位器，将其调到900V左右。说明负高压正常。如果灵敏度设置从60到99变化，测量其电压不是以上范围或变化小，或不变，调节电 位器后仍不变，则负高压有问题。换之