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1、常用大肠杆菌感受态 JM109， DH5a ，BL21 的区别1: DH5a菌株DH5a是一种常用于质粒克隆的菌株。E.coli DH5a在使用pUC系列质粒载体转 化时，可与载体编码的3-半乳糖苷酶氨基端实现 a-互补。可用于蓝白斑筛选 鉴别重组菌株。基因型：F-, © 80dlacZ M, (lacZYAargF)U169, deoR, recAI, endA1, hsdR17(rk-, mk+), phoA, supE44,入，thi-1 , gyrA96, relA1 2：BL21(DE3) 菌株该菌株用于高效表达克隆于含有噬菌体 T7 启动子的表达载体(如 pET 系列)
2、的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于 入噬菌体DE3区，该区整合于BL21的染 色体上。该菌适合表达非毒性蛋白。基因型： F-，ompT， hsdS(rBB-mB-)，gal， dcm(DE3)3：BL21(DE3) pLysS 菌株该菌株含有质粒pLysS，因此具有氯霉素抗性。PLysS含有表达T7溶菌酶的基 因，能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰目的蛋白的表达。该菌适合 表达毒性蛋白和非毒性蛋白。基因型： F-，ompT hsdS(rBB-mB-)，gal， dcm(DE3，pLysS ，Camr 4: JM109菌株该菌株在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载
3、体进行转染 时，由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM09编码的LacZA M15进行a互 补，从而显示3-半乳糖苷酶活性，由此很容易鉴别重组体菌株基因型： recA1,endA1,gyrA96,thi-1,hsdR17,supE44,relA1,A(lac- proAB)/F'traD3,6proAB+,lacIq,lacZ AM155: TOP10菌株 该菌株适用于高效的 DNA 克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。基因型：F-, mcrAA (mrr-hsd RMS-mcrBC),© 80, lacZ A M15 AlacX 74,recA1 ，araA139
4、A(a-lreau)7697， galU ，galK ，rps， (Strr) endA1， nupG 6: HB101 菌株该菌株遗传性能稳定，使用方便，适用于各种基因重组实验基因型: supE44，hsdS20(rB-mB-)，recA13，ara-14，proA2，lacY1， galK2，rpsL20，xyl-5，mtl-1，leuB6，thi-17: M110 或 SCS110大多数大肠杆菌菌株中含有 Dam甲基化酶和Dcm甲基化酶，前者可以在GATC序列中腺嘌呤N-6位上引入甲基，后者在 CCA/TGC序列的第一个胞嘧 啶C-5位置上引入甲基。 常用的菌株都会产生dam,dcm,从
5、而受到甲基化的影 响.部分限制性内切酶对甲基化的 DNA不能切割，如Fbal和Mbol等，一般生物公 司提供的内切酶说明中均有说明。大多数酶切位点的甲基化不影响切割，而有些会影响，如 Xbal, Bcll 等。而且 甲基化只发生在特定序列，以 Xbal 为例，只有在位点序列旁出现 GA 或 TC， 该 Xbal 位才会被甲基化。而要解除这种限制修饰作用通常有两种方法： (1)选用上述酶的同功酶，如 Sau3Al， DNA 识别切割位点与 Mbol 相同；但 不受甲基化影响；( 2)利用甲基化酶缺失的受体细胞进行DNA 的制备，如 E.coli JM110 和链霉菌等，前者Dam和Dcm甲基化酶
6、已敲出，而后者细胞内本就没有甲基化酶， 从这些细胞中抽提的 DNA 就能被上述酶切割。8：E.coli JM110要排除dam,dcm甲基化的影响，需要用特定的 dam-,dcm-的菌株，女口 JM110 如果由JM110或SCS110等甲基化缺失的菌株产生的质粒，则不会被甲基化 .各种感受态细胞的区别 用途 特征Xl1-Blue 菌株基因型： endA1 gyrA96(nalR) thi-1 recA1 relA1 lac glnV44 FTn10 proAB+ laclq (lacZ)M15 hsdR17(rK mK+)。 特点：具有卡那抗性、四环素抗性和氯霉素抗性。用途：分子克隆和质粒提
7、取。BL21(DE3)菌株基因型：F-ompT gal dcm Ion hsdSB(rB- mB-)入(DE3 lacI lacUV5T7 gene 1 ind1 sam7 nin5)。特点：该菌株用于以 T7 RNA 聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿 主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于 入噬菌体DE3区的lacUV5启动 子，该区整合于 BL21 的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。 用途：蛋白质表达。BL21(DE3)ply 菌株基因型：F- ompT gal dcm Ion hsdSB(rB- mB-) 2D(3) pLysS(cmR)。特点：该菌株带有pLysS，
8、具有氯霉素抗性。此质粒还有表达 T7溶菌酶的基 因， T7 溶菌酶能够降低目的基因的背景表达水平，但不干扰 IPTG 诱导的表达。 适合于毒性蛋白和非毒性蛋 白的表达。用途：蛋白质表达DH5a菌株基因型：F- endAI glnV44 thi-1 recAI relAI gyrA96 deoR nupG 80dlacZ M15 (lacZYAargF)U169, hsdR17(rK-,入-特点：一种常用于质粒克隆的菌株。其80dlacZ M1基因的表达产物与pUC 载体编码的3半乳糖苷酶氨基端实现 a互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和 endA1 的突变有利于克隆 DNA 的稳定和高纯度质粒
9、 DNA 的提取。 用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。JM109菌株基因型： endA1 glnV44 thi-1 relA1 gyrA96 recA1 mcrB+ (-lparcoAB) e14-F traD36 proAB+ lacIq lacZ M15hsdRK+)rK特点：部分抗性缺陷，适合重复基因表达 , 可用于 M13 克隆序列测定和蓝白斑 筛选。用途：分子克隆、质粒提取和蛋白质表达。DH10B 菌株基因型：F- mcrA (mr-rhsdRMS-mcrBC) 80dlacZ M15 lacX74 endA1 recA1 deoR (ara,leu)7697 araD139 g
10、alU galK n upG rpsL-入The most widely used E. coli strain for BAC cloning is DH10B 。host for pUC and other -compalementation vectors; pBR322useful for generating genomic libraries containing methylated cytosine or adenine residues useful for plasmid rescue proceduresELECTROMAX DH10B T1 CELLS说明：DH10B细
11、胞是高转化效率的E. coli，可以完美应用于大多数实验应用。DH10B 基因型具有以下特点：? lacZ M1 用于重组克隆的蓝/白斑筛选?消除了 mcrA、mcrBC、mrr和hsdRMS限制系统，允许构建更多具有代表性 的基因组文库 (1,2)? endA1 突变，可以增加质粒产量和数量?高效率转化大小为150 kb的质粒，用于产生cDNA或基因组文库DH10B?可以表达tonA的基因型，tonA能够提供对T1和T5噬菌体感染的抗性 (DH10B? T1R)。DH10B?的基因型：F mcrA (hsdRMS-mcrBC) © 80lacZ M15 lacX74 recAI en dA1 araD139 (ara, leu)7697 galU galK入 rpsL (StrR) n upGDH10B? T1R 的基因型：F mcrA (hsdRMS-mcrBC) © 80lacZ M15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara, leu)7697 galU galK入 rpsL (StrR) n upG tonA