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1、玉米大斑病菌 ATMT 突变体库的构建及其分析王梅娟;李坡;吴敏;范永山;谷守芹 ;董金皋【期刊名称】中国农业科学 【年(卷),期】2012(045)012 【摘要】 目的利用农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens)介导的遗传转化技术对玉米大斑病菌 (Setosphaeria turcica) 进行转化 ,构建 ATMT 突变体库 ,为从分 子水平上揭示病菌的致病机理奠定基础 .方法 以带有重组双元载体的农杆菌对 玉米大斑病菌进行转化 ,利用潮霉素 B 进行筛选 ,对抗性稳定的转化子进行 PCR 检测 ,构建玉米大斑病菌 ATMT 突变体库；从突变体库中随机选取一定数量的
2、突 变体 ,对其菌落形态、菌丝及分生孢子发育、致病性等进行分析.结果获得了1265 株玉米大斑病菌 T-DNA 插入突变体；从中随机选取 36 株突变菌株 ,对其 进行抗性筛选和 PCR 检测 ,发现潮霉素磷酸转移酶基因已整合进入野生型菌株 的基因组中 ,且能够稳定遗传；与野生型菌株相比 ,在供试的菌株中 ,大部分菌株 菌落形态和生长速率没有发生明显改变. 生长速率明显减慢的菌株占总数的13.8 ,明显加快的菌株占 16.7 ；发现了 2 株分生孢子形态发生明显改变的菌 株,占菌株总数的 5.6；产孢量明显增大的菌株占 5.6 ,产孢量减少的菌株占 13.5 ；分生孢子萌发率发生明显改变的菌株占 16.6 ;发现了 1 株致病性明显 增强的菌株 ,占菌株总数的 2.8 .结论构建了玉米大斑病菌 ATMT 突变体库 ,并 对突变体库进行了初步分析 ,将为克隆玉米大斑病菌生长发育和致病性相关基因 奠 定 基 础 .%Objective The objective of this study is to use Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation (ATMT) to mutate the genes of Setosphaeria tunica and construct ATMT mutant library,