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1、用牛肉膏和蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌的纯化培养，包括两大阶段：制备牛肉高蛋白胨固体培养基计算：根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制100ml培养基中各种成分的用量。称量：准确称取各种成分。溶化：将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热；当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻璃棒取出称量纸；箱烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠，玻璃棒搅拌，使其溶解；加入琼脂，加热使其熔化。持续搅拌防止糊底导致烧杯破裂；当琼脂完全熔化，补加自来水至100ml。灭菌：将配置好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，用皮筋勒紧，放入高压灭菌锅，压力为100KPa，温度为121，灭菌1530min
2、。将培养皿用几层旧报纸包紧，58套培养皿一包，放入干热灭菌箱，160170灭菌2h。倒平板：待培养基冷却至50左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。倒平板操作步骤： A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞；B右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰；C用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约1020ml）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖；D等待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上。小资料：牛肉膏蛋白胨固体培养基配方成分含量提供的主要营养牛肉膏5.0g碳源、磷酸盐、维生素蛋白胨10.0g氮源、维生素NaCl5.0
3、g无机盐琼脂20.0g承载物纯化大肠杆菌微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布法；还包括斜面接种、穿刺接种等方法。尽管操作方法各有不同，其核心都是防止杂菌污染，保证培养物的纯度。平板划线法就是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。（在数次划线后，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体菌落。）调整分录：平板划线法操作步骤： 2004年1-12月应计折旧额=270+37.83=307.83（万元）A将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红；设X为职工工资，Y为职工应缴税额。B在火焰胖冷却接种环，并打开棉塞；借：以前年度损益调整营业收
4、入 42C将试管口通过火焰；D将已经冷却的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液；11、C12、D13、C14、C15、B16、C17、A18、D19、B20、BE将试管口通过火焰，并塞上棉塞。贷：利润分配未分配利润 50F左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。（注意：不要划破培养基）3、DSS（决策支持系统）解决的是（）G灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线，重复以上操作，在第三、四、五区域内划线。（注意：不要将最后一区的划线与第一区相连）更正分录如下：H将平板倒置，放入培养箱中培养。资本公积股本溢价 1500 什么是稀
5、释涂布法？将菌液经过一系列的梯度稀释，然后将不同浓度的菌液分别涂布到培养基的表面进行培养。（在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落）A固定资产按照市场价格计量稀释涂布法操作步骤： A将分别盛有9ml水的6支试管灭菌，并按10-110-6的顺序进行编号；B用移液管吸取1ml培养的菌液，注入10-1倍稀释液的试管中。用手指轻压移液管的橡皮，吹吸三次使菌液与水充分混合。C从10-1倍稀释液的试管中吸取1ml培养的菌液，注入10-2倍稀释液的试管中。重读进行，以此类推，直到完成最后一支试管的稀释。注意：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管应在离火焰12cm处。涂布平板操作步骤： A将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中；B取少量菌液（不超过0.1ml），滴加到培养基表面；C将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s；D用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。注意：将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中，取出时，要让多于的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。操作中一定要注意防火！不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精。将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱中，培养12h和24h后，分别观察并记录结果。