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1、.PBS的配制1. 称量以下试剂，置于1 L烧杯中；NaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42gKH2PO4 0.27g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解；3. 滴加HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L；4. 高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。2×冻存液配制（10ml）取以下液体加于15ml离心管：无血清培养基 4ml胎牛血清 4mlDMSO 2ml置于4保存。L.B培养液的配制称取以下试剂，加入1L烧杯中；Bacto
2、-tryptone 10gBacto-yeast exact 5gNaCl 10g加蒸馏水至1L，分装于两个500ml瓶子中；高压灭菌；置于4保存。L.B培养基称取以下试剂，加入1L的锥形瓶中；Bacto-tryptone 5gBacto-yeast exact 2.5gNaCl 5g琼脂糖 7.5g加蒸馏水至500ml；用铝箔包紧瓶口，高压灭菌；待冷却至90时取出置于超净台；待冷却至5060时加入氨苄青霉素（终浓度为50100g/ml）；倒入细菌培养皿中，大约每个25ml左右；置于超净台冷却12h，待胶凝固后用封口胶封好培养皿，标记日期，翻转后置于4冷库保存。10×TBST将以下试
3、剂加入1L的烧瓶中；NaCl 87.66gTris Base 24.2g加蒸馏水900ml，充分搅拌混匀；加HCl调pH至7.4；加蒸馏水至1L；加10ml Tween20。PLC Lysis BufferFinal concentration100ml500ml1M Hepes(pH7.5)50mM5ml25ml5M NaCl150mM3ml15mlGlycerol10%10ml50ml50mM MgCl21.5mM3ml15mlTriton×1001%1ml5ml0.5M EDTA(pH8.0)1mM200l1ml0.1M NaPPi10mM10ml50ml0.5M NaF10mM2ml10ml封闭液1×TBST 50ml脱脂奶粉 2.5g发光剂100mM Tris Base（pH8.5） 10 ml250mM Luminol (in DMSO) 50 l90mM P-Coumaric Acid (in DMSO) 22 l30%H2O2 2.75 l*;