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1、1.生物体的遗传物质是什么？,讨论,2.真核生物的遗传物质存在于哪里？,1.生物体的遗传物质是什么？,讨论,2.真核生物的遗传物质存在于哪里？,1.生物体的遗传物质是什么？,3.怎样才能将真核细胞内的遗传物质 分离来？,讨论,DNA的粗提取与鉴定,用什么材料提取DNA？为什么？,(一)实验材料的选取：,(一)实验材料的选取：,鸡血细胞做实验材料。原因：1. 鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得2. 鸡血细胞极易吸水胀破3. 植物细胞外有细胞壁，其他动物细胞制取DNA有时需匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长。,(二)破碎细胞，获取含DNA的滤液,1. 若是动物细胞，如何获取DNA滤液？
2、,2. 若是植物细胞，如何获取DNA滤液？,(二)破碎细胞，获取含DNA的滤液,1. 若是动物细胞，如何获取DNA滤液？,加入洗涤剂和食盐的作用分别是？如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？,加入洗涤剂和食盐的作用分别是？如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？,洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解,加入洗涤剂和食盐的作用分别是？如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？,洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解,会使细胞核内DNA释放不完全，提取DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显
3、示蓝色等,滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？,(三)去除滤液中的杂质,可能有核蛋白、多糖和RNA等杂质。,(三)去除滤液中的杂质,滤液中的杂质可能有哪些细胞成分？,根据DNA的理化性质，可以用哪些方法来去除滤液中的杂质？,(三)去除滤液中的杂质,为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液的浓度和作用),(三)去除滤液中的杂质,(三)去除滤液中的杂质,为什么反复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液的浓度和作用),用高浓度的盐溶液能除去高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去在低盐溶液中的杂质。因此，反复溶解与析出DNA，就能除去与DNA溶解度不同
4、的多种杂质。,析出：滤液+同体积95%冷却酒精 白色丝状物,(四)DNA的析出,(五)DNA的鉴定,如何鉴定？对比反应是为了证明什么？原理？,DNA二苯胺 蓝色物,沸水浴,(五)DNA的鉴定,如何鉴定？对比反应是为了证明什么？原理？,三、操作提示,1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。,2. 加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。,三、操作提示,1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。,2. 加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮
5、状沉淀。,3. 二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。,三、操作提示,1. 以血液为实验材料，每100ml 加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。,试 验,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加速血细胞破裂,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加速血细胞破裂,溶解DNA,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加速血细胞破裂,溶解DNA,使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地析出,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加速血细胞破裂,溶解DNA,使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地析出,使含DNA
6、的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加速血细胞破裂,溶解DNA,使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地析出,使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中,除去含DNA的滤液中的杂质,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加速血细胞破裂,溶解DNA,使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地析出,使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中,除去含DNA的滤液中的杂质,提取DNA,加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固,加速血细胞破裂,溶解DNA,使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限
7、度地析出,使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中,除去含DNA的滤液中的杂质,提取DNA,A出现蓝色 B无变化,讨论,此实验过程中有几次过滤，几次析出？分别在哪一步？,答: 整个实验共“两次过滤，两次析出”,此实验过程中有几次过滤，几次析出？分别在哪一步？,讨论,两次过滤,两次过滤,第一次： DNA存在于滤液里 第一步第二次： DNA存在于滤液里 第六步,过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为12层,两次过滤,第一次： DNA存在于滤液里 第一步第二次： DNA存在于滤液里 第六步,两次析出,两次析出,第一次：用0.14 molL 的NaCI溶液,两次析出,第一次：用0.14 molL 的NaCI溶液,第三步,两次析出,第一次：用0.14 molL 的NaCI溶液,第三步,第二次：用冷却的95的酒精,