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1、PCR 移液器操作维护规程1目的： 确保移液的精确性，正确使用移液器。2适用范围： 本实验室使用的微量可调式移液器。3负责人： 操作人：4程序：41 移液器的使用4 11 转动旋钮设定移液量，设定的移液量不可超出该移液器规定的 范围。412 装上配套的 Tip 。4 13 前进移液法a) 将按钮压至第一停点位置；b )将移液管管嘴浸入液面下 23mm深处，然后慢慢松开按钮吸入液 体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的所 有液滴。c) 轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。约 1 秒钟后，继 续将操作按钮向下压至第二停点位置。待管嘴液体放干净后，将管 嘴贴在容器瓶壁上防止形
2、成液滴滴入瓶中，撤出管嘴。d) 松开按钮使之回到起点位置。需要时，可更换管嘴继续移液操作。414 倒退移液法：适用于高粘度液体及 / 或易起泡沫液体的移液。a) 将操作按钮向下压至第二停点位置。b) 将移液管管嘴浸入试剂瓶液面下23mm深处，然后慢慢松开钮吸入 液体。待移入管嘴吸满液体后，将管嘴撤出液面，擦掉管嘴外侧的 所有液滴。c ）轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。d）遗留在管嘴时的液体或者随管嘴一起扔掉，或者放回原来的容器中。4 15 重复操作法：重复操作移液法可以快速、简便地重复转移同体 积的同种液体。a）将操作按钮向下压至第二停点位置。b）将移液管管嘴浸入液面下 23mm深处
3、，然后慢慢松开按钮吸入液体。 待移入管嘴吸满液体后，将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入 瓶中。c）轻轻压下操作按钮至第一停点位置，放出液体。待放完所需体积液 体后，把按钮停在第一停点位置，不包括在移液量之内的少量液体 仍留在管嘴内，管嘴外的液滴则需包括在移液量之内。d ）将管嘴浸入试剂液面下不远处，然后慢慢松开按钮使管嘴重新吸 入液体。e）重复步序c）和d ）继续移液操作，就可重复转移相同体积液体。 42 移液器的维护每天对使用过的移液器用 75%酒精进行擦拭。每周 1 次对移液器咀 进行 75%酒精浸泡 15 分钟左右，若使用过程中发生污染应随时浸泡 处理。43 移液器的校准为确保移液器加
4、样的精确性和准确性， 正确使用移液器， 需定期（年）对移液器进行校准4 31 校准环境和用具要求室温：2025C,测定中波动范围不大于土 0.5 C。电子天平：放置于无尘和震动影响的台面上，房间尽可能有空调。称 量时，为保证天平内的湿度（相对湿度60 90%），天平内应放置一装有10mL蒸馏水的小烧杯。小烧杯：510mL体积。测定液体：温度为 2025 C的去气双蒸水。选定校准体积：a）拟校准体积；b）移液器标定体积的中间体积。c） 最小可调体积（不小于拟定体积的10%。如为固定体积移液器，则只有一种校准体积。4 32 校准步骤a）将移液器调至拟校准体积，选择合适的吸头；b）调节好天平；c ）
5、来回吸吹蒸馏水 3次，以使吸头湿润，用纱布拭干吸头；d） 垂直握住移液器，将吸头浸入液面23mm缓慢（13秒）一致地吸取蒸馏水e）将吸头离开液面，靠在管壁，去掉吸头外部的液体；f ）将移液器以30C角放入称量烧杯中，缓慢一致地将移液器压至第 一档，等待 1 3 秒，再压至第二档，使吸头里的液体完全排出；g）记录称量值；h）擦干吸头外面；i ）按上步骤称量10次；j） 取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸馏水重量，按表1 所列蒸馏水Z因子计算体积；k）按校准结果调节移液器。4. 3. 3比较校准法利用经计量局校准并颁发校准报告之同型号移液器，在移液器量程范围 的高低两个档各选择一个校准点，
6、利用电子天平称量结果与已校准移液 器称量结果进行比较，完成校准。备注：连续可调移液器校准由本市标准计量局统一校准。（表1 蒸馏水Z因子hPa（mbar）温度（C）80085390796010131067201.0021.002710.0021.00281.00291.00296720.51.0021.00281.00281.00291.00301.00307211.0021.00291.00301.00301.00311.0031821.51.0031.00301.00311.00311.00321.00320221.00311.00311.00321.00321.00331.003322.5
7、1.00321.00321.00331.00331.00341.0035231.00331.00331.00341.00351.00351.003623. 51.00341.00351.00351.00361.00361.0037241.00351.00361.00361.00371.00381.003824.51.00371.00371.00381.00381.00411.0039251.00381.00381.00391.00391.00401.00415.相关记录仪器使用登记表仪器设备维护和校准记录表仪器设备检定周期表 仪器设备维修申请表 仪器报废（停用）单 仪器设备使用授权表 仪器设备档案卡仪器设备领（借）用登记表仪器设备总表