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1、PCR室 SLAN型核酸扩增实时荧光定量仪操作和维护程序1. 目的 保证SLAN型核酸扩增荧光定量检测仪的正确和正常 使用。2. 适用范围 本规程适用于SLAN型荧光定量PCR仪分析的所 有实验过程。3. 制定依据SLAN型核酸扩增荧光定量检测仪器操作使用说 明书4. 职责 由经培训合格的临床基因扩增实验室技术人员操作 仪器。5操作程序51 开机前的准备511 确认电源线插头已可靠插入电源插座中；5 12 电源线接地可靠。5 13 接口线两端插头已分别可靠插入。514 打开稳压器电源，打开电脑主机、显视器、打印机、SLA N电源开关。52“核酸扩增检测系统”的启动可以在【开始】/【程序】菜单中
2、点击“ SLANPCR检测系 统”启动。 也可直接在桌面上双击快捷键启动。计算机系统启动SLAN PCR检测系统程序，进入荧光定量PCR检测系统界面53 样品容器的放置531 如何正确打开机盖：用手向后推开机子顶端机盖。5 32 样品容器的放入：正确打开机盖后，将0.2ml 管放入模块中。注意：为保证样本升温和降温的均一性，样本管必须与模 块完全接触，将0.2ml管放入模块前应先检查（样本中有 气泡或粘在管盖、管壁上都会严重影响实验结果）5 33 如何正确关闭机盖：用手向前拉动机盖5 4实验设计：5. 4. 1温度参数设置：设置一个由三个程序组合的DNA荧光检测程序如下： 进入 温度参数 界面
3、，鼠标左键单击扩增程序中的程序名处，输入程序名A,循环数1。 设置此程序的温度点，按添加键增加温度点，输入目标 温度930C,恒温时间120秒，“读取荧光”选择“否”，其它 参数按默认值不变。这样第一个程序设置完成。设置第二 程序，在扩增程序逻辑界面中，按 添加输入程序名B,循 环数 10。设置第二程序的温度点，按 添加增加温度点，输入目标 温度930C,恒温时间45秒，“读取荧光”选择“否”，再按添 加增加温度点，输入目标 温度550C，恒温时间60秒，“读 取荧光”选择为“否” 。设置第三个扩增程序 C循环数30;按添加增加温度点， 输入目标温度930C,恒温时间30秒，“读取荧光”选择“
4、否”， 再按添加增加温度点，输入目标 温度550C,恒温时间45 秒，“读取荧光”选择为“是” 。542 样本参数设置：鼠标单击 新建 ，进入 样本 界面。 在实验盘上，用鼠标左键单击编号A1后按住拖动至 A5，这样就选择了样本管 A1A5 然后按样本类型中 标准品 按 钮，这样A1A5就定认为标准品。 此时表格中同步显示 A1A5为标准品，进一步输入样本管 的详细信息， 在表格中输入样本名称， 样本浓度的相关信息。 按同样方法设置后面的未知品，同时于表格中输入样本名 等相关参数。这样样本参数设置完成。5 5 启动程序： 再次检查设置的程序，样本参数，热盖温度准确无误后，可 以启动程序： 单击
5、菜单中的 扩增程序 命令;单击【打开】命令， 选择所需扩增程序。5 6 数据分析：实验结束后，鼠标左键单击 完成后，进入实验结果分析 界面。若只要查看部分样本管的曲线显示，用鼠标左键单击相应 样本管，则右边只显示选中的样本管曲线。 接着单击 阈值设置 ，进入阈值设置界面，鼠标左键拖动 红色的阈值线，调整阈值，同时在阈值的右侧显示调整阈值 后的截距、斜率、相关系数。当截距、斜率、相关系数达到 本次实验最好的数据时，停止阈值调整。 阈值设置合理后，单击分析结果，界面显示当前的分析 结果。度和CT值。 如何打开检测结果文件单击文件菜单中的 打开命令。 或单击工具栏中的 打开 按钮。 若要打开保存在其
6、它文件夹下的文件，首先找到该 文件夹后进行。 如何进行标准曲线的应用： 打开标准曲线： 只要打开需作为标准品的文件即可。在 结果分析 界面，单击菜单 文件 中 打开标准曲线 后，作为标准曲线的文件将导入到本实验中， 导 入的标准曲线的颜色与本实验的曲线有明显区别。标准品曲线应用：单击 文件菜单中的 打开，把即将分析的文件打开，然后再单击 文件菜单中的标准曲线，在弹出的对话框中选择需在导入标准 品曲线的文件打开该文件如何保存实验结果：单击【保存】，保存到目标文件夹 DATE 如何导出实验数据：单击【文件】菜单。在单击【导出】5. 7打印报表：打开LIS检验系统，输入检验申请单样本资料内容在打印报
7、告时将会打印（编号、姓名、性别、年龄、病历号、住院号、门诊号、临床医生、送检科室、采 样时间、送检日期），样本信息内容未输入，打印报告缺省 项打印。5. 7. 2打印模板预览及打印：单击菜单中的打印预览命 令或单击工具栏中的打印按钮。打印模板预览经确认后即 可进行报告打印。6. 维护程序：6.1 主机为了避免触电事故，仪器的输入电源线必须可靠 接地。6.2操作人员不得擅自打开仪器。更换元件或进行机内调节 必须由持证的专业维护人员完成。不要在连接上电源线的情 况下更换元件；6.3在连接交流电源之前，要确保电源的电压与仪器所要求 的电压一致（允许-10%的偏差）。并确保电源插座的额定负载不小于仪器的要求；64 停止工作时应关闭电源，长时间不使用本仪器时，应拨 下电源插头，并用软布或塑料纸覆盖仪器以防止灰尘进入。 6 5 定期用干净的软布沾少量无水酒精清洗模块上的锥孔 （每月一次） ，保证试管与锥孔壁接触充分、导热良好、避 免污染。66 清洗仪器时，必须切断电源；清洗模块上锥孔时严禁将 清洗剂滴入孔内；仪器表面可用软布沾清洁液清洗。67 定期检查仪器的电源线，数据连接线，发现有老化及破 损现象，请及时更换同一规格的电源线或数据连接线。