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1、中国药科大学生物制药工艺学期末试卷（B卷）一、填空题（每空 0.5分，共30分）1多糖构效关系研究还不够完善，但目前的研究已表明，多糖的活性与其高级结构、分支度及其侧链、分子量 以及多糖中的取代基 有关。2、利用产氨短杆菌发酵法生产肌甘酸，第一步是用诱变育种的方法筛选缺乏SAMP合成酶的腺喋吟缺陷型菌株,在发酵培养基中提供亚适量的 腺喋吟；另外，改变细胞膜对 5 -IMP的透性，选育 Mn2+不敏感的变异株。3、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散 、涡流扩散、流动相中 传质阻力、固定相中传质阻力。4、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中，当柱中某位点之pH值下降到
2、蛋白质组分 PI（等电点）值以下时，它因带 正电荷而下移，如果柱中有两种蛋白组分，pI值较大（高）者会超过另一组分,移动至柱下部pH较色的位点进行聚焦（交换）。5、亲和层析洗脱方法有 非专一性洗脱，特殊洗脱，专一性洗脱厂6、晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度，其中影响晶体大小的主要因素有过饱和度，温度，搅拌速度，晶种 。7、常用的吸附剂有 活性炭、 硅胶和白陶土等。8、在萃取过程中被提取的溶液称为 娄遮，其中欲提取的物质称 辿，而用以进行萃取的溶 剂称为萃取剂。达到萃取平衡后，大部分溶质转移到萃取剂中，这种含有溶质的萃取剂溶液称为萃取液，而被萃取出溶质以后的料液称为 萃余液。9、从细胞培
3、养液中提取有效组分时 ，往往需要除去细胞及蛋白质 ，常用的除去细胞及蛋白质的 方法有 加入凝聚剂，加入絮凝剂，变性沉淀，等电点沉淀等。10、影响絮凝效果的主要因素有 絮凝剂的分子量，絮凝剂的用量，溶液 pH值，搅拌速度和 时间。11、色谱介质按分离机理分为 反相色谱、正相色谱 、离子交换色谱 、凝胶过滤色谱，亲和 色谱。12、基因治疗中常用的非病毒载体有 裸露DNA、基因缝合线法、 脂质体载体 和 哺乳动物 人工染色体。13、四环类抗生素是一类以 四并苯（蔡并生）为母核的一族抗生素;链霉素是 氨基糖昔类抗 生素；红霉素是分子内含有 14元环大环内酯类抗生素；写出青霉素的化学结构通式 _。14、
4、请列举应用基因药物来治疗肿瘤的几种方案：导入抑癌基因或细胞因子、自杀基因、抑制血管生成、反义药物 、导入 MHCI类抗原基因、 导入 MDRI基因等方法。二、名词解释（每小题 3分，共30分）1、酶促半合成人胰岛素：以猪胰岛素为原料，利用胰蛋白酶的转酰胺作用（1分）将猪胰岛素 B链之30位丙氨酸转化（1分）为苏氨酸即得人胰岛素（1分）。2、亲和膜：结合亲和技术和膜分离技术的优点，利用亲和配基修饰的微滤膜（2分）为亲和吸 附介质,纯化目标蛋白质（1分）。3、全排阻：当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时，较大的分子完全不能进入颗粒内部，只能从颗粒间隙流过， 称“全排阻” （2分）。其流经体
5、积最小，等于外水 体积V0 （1 分）。4、类分离：将分子量极为悬殊的两类物质分开（2分），如蛋白质与盐类（1分），称作类分 离或的分子量小组分离.选择凝胶时，应使样品中大分子组的分子量大于其排阻限，而小分子组于渗入限。大分子的分配系数K =0,小分子的K =1。5、 基因药物：基因药物 genetic medicine, 核酸类药物，以遗传物质 DNA、RNA 为治疗物质基础 的药物（2分），如核酸疫苗、反义药物（1分）。6、容量因子：在色谱过程中，溶质在固定相中的总摩尔数与流动相中总摩尔数之比（2分），容量因子越大该组分的保留能力越强，越难洗脱。（1分）7、等密度离心法：在离心力作用下，不
6、同密度的多组分颗粒在梯度介质中“向上”或“向下”移动，（1分）当移动至其密度与介质密度相等的位置便不再移动，形成静止区带，即“达到”离心平衡，各组分根据密度不同而分离。（2分）8、超滤技术：超过滤（简称超滤）是一项分子级膜分离手段，（1分）以具有一定孔径的膜为分离介质，（1分）以压力差为推动力将不同分子量的物质进行选择性分离的方法。（1分）9、超临界流体萃取：超临界流体（supercritical fluid , 简称 SCF） 萃取技术，又称压力流体萃取、超临界气体萃取、临界溶剂萃取等，是利用处于临界压力和临界温度以上（2分）的一些溶剂流体所具有特异增加物质溶解能力来进行分离纯化的技术。（1
7、分）10、生物制品：生物制品（biological product ） 是应用普通的或以基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等生物技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备（2分），用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品（1分）。三、单项选择题（每小题1分，共20分）（从A、B、C、D四个选项中选择一个正确答案填入空格中）1、下面表达系统为原核表达系统的是（ A ）A. E.coliB.毕赤酵母C.昆虫细胞D.动物细胞2、下列药物哪些是基因药物（B ） A.基因工程药物B.遗传物质 DNA为物质基础制造的药物 C.天然生物药物D.半合成生物药物3、肽合成中，由于顺序合成的
8、需要，必须对暂不参加反应的基团加以保护。在多肽的固相合成中，常用的氨保护基是（ A ） A.Fmoc B.Bz C.Tos D.甲醇4、蛋白质类物质分离纯化往往是多步骤的，其前期处理手段多采用下列哪类的方法。（B ）A.分辨率高B.负载量大C.操作简便D.价廉5、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（C ）A.增大 B.减小 C.先增大，后减小 D.先减小，后增大6、盐析常数 Ks是生物大分子的特征常数，它与下列哪种因素关系密切。（B ）A.盐浓度 B.盐种类 C.溶质浓度D介质pH 7、网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质，一般用下列哪种溶液洗脱。A.水B高盐C低pH D.高pH 8、用
9、钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时，吸附量很低，这是因为A.选错树脂 B.离子竞争C.偶极排斥D.解离低9、凝胶层析中，有时小分子溶质的Kd工匚FH P 10 4洗篷 洗脱树脂吸附物f f E气 填写SOD生产工艺中非空格（岂1-） 分）溶：j:沉淀1洗7附纳施 洗血液c上消水国门阳心溶解上消液L_超述与闻 祖酷液 *浓缩他浓能-一沉淀物S7-T杜层析一位:，脱拄浓缩吸附科_阖丁 erflpRs.2七脱液一厂一诙干嵇粉途干答案：A:去血红蛋白（1分）B: 乙醇（1分）C: 氯仿（1分）D :丙酮（1分E:热变性（1分）F: 60-70 C （1分）G洗脱（1分）3、青霉素为弱酸性抗生素，在水溶液中
10、稳定性较差，且其稳定性随温度上升而下降，请写出将该抗生素从发酵液中分离制备的方法，写出选择依据、主要工艺及操作要点：（7分）答：青霉素游离酸易溶于醇类、醍类和酯类，但在水中溶解度很小；青霉素钾盐则易溶于水和甲醇，难溶于有机溶媒。从滤液中提取青霉素就是利用青霉素这个性质，在不同pH条件下，用不同的溶剂反复进行萃取，从而达到提纯和浓缩的目的（1分）。溶剂萃取法提取青霉素钾成品的一般工艺路线如下（5分）：I板框过婚或靛女越窟I|BA美小发除液拉洗液丁理落取液冷却茎1 口寸F过犍周1魄氏yL,加1,3 BA.in PPE1,pH5.00.1（耻 陛H溶注，冲水量23（1%调逡提草取脱水貌色|饰 miBA海液祖区体 加过三熄七左右.加KAC-CiH&H洛潦港当换葬，结岛后善贵lh以上甩浅分茶漫海，干爆J青尊案GW送成品由于青霉素性质很不稳定，整个提炼过程应在低温、快速，严格控制pH值下进行，注意对设备清洗消毒减少污染，尽量避免或减少青霉素效价的破坏损失（1分）。