高三生物选修一淀粉酶的固定化课件.ppt

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1、高三生物选修一淀粉酶的固定化,1,淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测,高三生物选修一淀粉酶的固定化,2,固定化酶,分离纯化后固定在非水溶性载体上、可投放到反应溶液中使用又能被收回的酶。,高三生物选修一淀粉酶的固定化,3,水溶性酶,非水溶性载体,非水溶性酶(固定化酶),固定化技术,多糖、蛋白质、玻璃、陶瓷、聚酯、聚胺、尼龙、树脂、淀粉、明胶、胶原、,高三生物选修一淀粉酶的固定化,4,吸附法,包埋法,共价交联法,共价偶联法,载体结合法,高三生物选修一淀粉酶的固定化,5,优点,(1)提高酶稳定性;(2)可反复或连续使用;成本降低(3)易于和反应产物分开;产物溶液无酶残留,简化提纯工艺;提高产物质量(

2、4)酶反应过程可严格控制;,缺点,固定化时酶活性有损失,高三生物选修一淀粉酶的固定化,6,淀粉,糊精,淀粉酶,高三生物选修一淀粉酶的固定化,7,淀粉酶,来源固定产物检测最适pH最适温度,枯草杆菌石英砂碘碘化钾5.57.55075,高三生物选修一淀粉酶的固定化,8,高三生物选修一淀粉酶的固定化,9,实验步骤用50ml小烧杯称取5g石英砂,加入4ml 淀粉酶溶液,缓慢搅拌30分钟,使淀粉酶固定到石英砂上,放入注射器中。,实验6-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测,怎样使石英砂不从注射器中漏出?,夹子、滤纸片,高三生物选修一淀粉酶的固定化,10,用10倍蒸馏水清洗注射器 最后一次清洗时取其上清液2滴

3、加到点样板上,同时滴加1%淀粉溶液混匀,再加入KI-I2溶液,若溶液变为蓝色,说明未固定到石英砂上的淀粉酶已完全除去;,怎样保证注射器中不含游离的酶?怎样确定?,高三生物选修一淀粉酶的固定化,11,将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管加淀粉溶液,使淀粉溶液约以0.3ml/min的流速过柱。,高三生物选修一淀粉酶的固定化,12,高三生物选修一淀粉酶的固定化,13,在流出12mL反应液后接收约0.5mL流出液,加入1-2滴KI-I2溶液,观察颜色。用水稀释淀粉滤液1倍后再观察颜色。实验后,用10倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱,放置在4冰箱中,几天后再重复上述实验,看是否有相同的结果。,高三生物选修一淀粉酶的固定化,14,高三生物选修一淀粉酶的固定化,15,实验结果 1流出5mL后,接收0.5mL流出液,加入12滴KI-I2溶液,溶液呈红色。 2几天后,再重复上述实验,与几天前的相比,结果相同 。实验结论淀粉被-淀粉酶水解成为糊精 。-淀粉酶制成不溶性的固定化酶后,酶的稳定性增加,

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