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1、人胎儿和新生儿小脑皮质分子层和颗粒层细胞发育的体视学分析符皎荣,吴志虹，何忠平,张彦慧,洪灯,郑小桃钟南田，蓝永洪,林 世珍【摘要】目的：探讨人胎儿和新生儿小脑皮质发育的转变规律。 方式:应用体视学方式对30例610月龄胎儿及6例新生儿小脑皮质 分子层细胞、内颗粒层细胞密度、尺寸和散布参数进行观测。结果： 小脑皮质分子层细胞的平均体积、平均自由程均逐龄增大，体密度、 数密度、表面积密度、核体密度那么逐龄减小，但足月胎儿和新生儿 期相对恒定；内颗粒层细胞的体密度、数密度、表面积密度、平均体积 逐龄增大，核体密度和平均自由程均逐龄减小，78月期间转变较明 显。结论：胎儿小脑皮质分子层细胞的迁移、增
2、值和分化在诞生前、 后大体完成，颗粒层细胞诞生后仍持续，小脑皮质的发育在78月期 间是重要时期。【关键词】小脑皮质；发育;体视学;胎儿;婴儿，新生ABSTRACT Objective: To explore the development of cerebellar cortex of human fetal and newborn infants. Methods: The parameters of density, size and distribution of the molecular and granular layer cells of cerebellar cortex of
3、 30 human fetuses (6-10 months old ) and 6 newborn infants were studied with stereological methods. Results: The values of mean volumes and mean free path of the molecular layer cells increased while their volume density (Vv), surface density (Sv) and nucleusvolume density (Vvn, c) decreased as the
4、fetal development, but these indexes were stable for mature fetal and newborn infants. The values of the volume densities, numerical densities, surface densities and mean volumes of the granular layer cells increased while their mean free path and nucleus volume density decreased as the fetal develo
5、pment, especially during the 7-8th month. Conclusion: The transfer, proliferation , differentiation of the cerebellar cortex molecular layer cells were complete before and after the birth; but the transfer, proliferation , differentiation of the cerebellar cortex granular layer cells continued after
6、 birth. The important phase for cerebellar cortex development is the 7-8th month in fetal phase.KEY WORDS Cerebellar cortex; Development; Stereology; Fetus; Infant; Newborn小脑是较高级的躯体运动调解中枢，有关各类动物小脑皮质的发育方面的报导较多13，但关于人胎儿小脑皮质神经细胞发育的研究很少，专门是应用体视学方式研究更是少见，国外GudovicB45等人应用图像分析技术对不同时期小脑皮质蒲肯野细胞和橄榄 核神经细胞的发育进行
7、体视学研究。我国钱雪松6等应用HE染色和 超薄切片技术，对48月人胎儿小脑皮质细胞构筑和神经细胞的发育 进行了定性研究。但未见有关人胎儿小脑皮质分子层细胞、颗粒层细 胞发育的体视学（定量）研究。本研究应用图像分析技术7,即借助显 微摄像和运算机细胞分析系统软件对人胚胎小脑皮质分子层细胞、颗 粒层细胞发育进行定量分析，从中取得不同月份人胎儿小脑皮质分子 层细胞、颗粒层细胞的体密度（Vv）、数密度（Nv）、表面积密度（Sv）、 核体密度（Vv n c）、平均自由程（）等参数，探讨其发育规律，为国 人胚胎学神经系统的发育提供体视学参数和添补新内容，为胚胎脑组 织移植的研究提供形态学资料。1材料与方式
8、材料及标本制备取药物引产新鲜胎儿30例及新生儿6例（诞生413 d,平 均7. 5 d）,胎龄1938 W,按每4 W为一胎龄组，每组47例。6 10月胎龄为第15组，新生儿为第6组。每例随机取小脑组织2小 块，10%甲醛固定后，酒精脱水，石蜡包埋，随机定位方向，持续切 片厚4 urn,每隔20片裱片1张，每块组织裱片3张，HE染色后观 看。每例标本取1块组织测量其固定前、后大小，计算收缩系数。观看与测量应用Motic公司生产的数码显微镜照相系统观看，放大40、 100倍物镜下随机拍以下图像，每张切片摄取小脑皮质图像10张。然 后应用Motic公司研制的2003 版测量软件系统进行测量。别离以
9、 小脑皮质分子层、颗粒层为包容空间，测量分子层细胞、颗粒层细胞 及细胞核的大小和X相内的细胞数。测量前进行图像放大倍数校正。 软件系统自动显示其细胞截面长半径、短半径、周长及截面积等。以 电子表格格式导出并保留。最后依照有关公式5计算各项参数,并进 行切片厚度校正。所得数据均进行统计学处置。2结果计算结果显示，分子层细胞体密度、数密度、核体密度随胎 龄增加而趋于减小，平均体积和平均自由程均逐龄增大，其增加或减 少在78月间均有显著性不同，经t查验P<足月胎儿和新生儿 两组间无显著性不同，经t查验P>。见表1。颗粒层细胞数密度、体密度、表而积密度和体积均随胎龄增 大而增大，核体密度、
10、平均自由程那么随胎龄增大而减小，其中数密 度、体积、核体密度3项参数在78月间均有显著性不同，经t查 验P<,其他月龄间那么转变较小，见表2o表1分子层细胞体密度、 数密度、表面积密度、核体密度、体积、自由程等参数表2颗粒层细 胞体密度、数密度、表面积密度、核体密度、体积、平均自由程等参 数 3讨论小脑皮质发生不同于中枢神经其他部位，小脑板神经上皮细 胞增生并通过中间层迁移到边缘层表而，形成一薄的细胞层称外颗粒 层，部份细胞从室管膜层迁移到外颗粒层下方，形成蒲肯野细胞层。 20周以后，外颗粒层细胞迅速增生，同时一部份细胞又由表面向内迁 移，别离形成份子层的蓝状细胞、星形细胞和内颗粒层细胞
11、。咱们观 看到分子层细胞密度初期增加而晚期细胞密度下降，可能是细胞增殖、 迁移与调亡一起作用的结果，与程相树等1观点一致。分子层细胞 数量在诞生前、后维持恒定，说明分子层细胞的迁移、增殖及分化约 在诞生前、后完成，与刘斌8的观点一致。颗粒层细胞密度自8月至诞生，其数密度、体积不断增加， 诞生后仍然有增加的趋势，说明颗粒层细胞的迁移还在继续。程相树 等1观看小鼠小脑皮质的组织发生以为小鼠颗粒层细胞的迁移和分 化在诞生后70 d完成，钱雪松等6, 8以为，人胚胎颗粒层细胞的迁 移和分化可能持续至诞生后6个月2年，究竟这些细胞的迁移和分 化持续多长时刻，有待于进一步观看。颗粒层细胞的数密度转变较复杂
12、，呈s型生长，先下降后增 加，说明胎儿小脑的发育呈现快慢交替、不均速进展。分子层和颗粒 层细胞体积和数量均在78月间转变较大，说明78月间是神经细 胞发育的重要时期，与钱雪松6等观点一致。分子层和颗粒层细胞 核体密度随着小脑的发育而慢慢减小，这说明细胞质增大的速度大于 细胞核，缘故是细胞质内各类细胞器专门是尼氏体的慢慢增多，意味 着细胞的功能已慢慢成立和完善。【参考文献】1程相树，蒋杞英，胡艳秋,等.小鼠小脑皮质的组织发生J. 解剖学杂志,2007, 30(5) :576581.2徐永平，张涌，郑月茂，等.山羊胚胎小脑皮质的形成和发 育J .西北农林科技大学学报(自然科学版)，2004, 32
13、：8790.3邢洪涛，吕永利，张丽颖.大鼠胚胎小脑的发育学研究. 中国医科大学学报，1997, 26(4) :543.4 Gudovic R, Milutinovic B . Regressional changes ininferior olivary nucleus compared to changes of Purkinje cellsduring developmnt in humans J. Hirnforsch, 1996, 37 (1) : 6772.5 Milutinovic B, Gudovic R, Malesevic J. Regressional changes of human erebellar cortex and hypoglossal nucleus during developmentJ. Hirnforsch, 1992, 23(45):357360.6雪松，李陈莉，仝宇红，等.人胚胎小脑皮质神经细胞的发 育J.解剖学进展，2000,6(3):283285.7申洪，沈忠英.有效生物体视学技术M.广州：中山大学 出版社，143.8刘斌，高英茂.人体胚胎学M.北京：人民卫生出版社,458