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1、常见凝血工程的检测及临床意义解读,凝血瀑布学说,D-Dimer,E,纤维蛋白凝块,纤维蛋白原,D,E,D,纤维蛋白单体 + 纤维蛋白肽,可溶性纤维蛋白 聚合体,XIIIa,凝血酶,纤溶酶,凝血和纤溶,纤维蛋白降解产物,纤维蛋白原 降解产物,凝血,我们实验室凝血检测包括PT、APTT、TT、纤维蛋白原含量、 D-Dimer 、AT-和FDP的测定。现主要用于手术前患者、产前孕妇凝血功能筛查，某些凝血因子异常疾病的检测以及口服抗凝药物的监测等。,凝血检测的方法学,目前可开展的血栓/止血成分检测主要包括三种方法：凝固法、底物显色法、免疫比浊法。Stago公司：PT、APTT、FIB、TT：凝固法。D
2、-二聚体/ FDP：免疫比浊法。AT-：发色底物速率法。,摆动磁珠法,摆动磁珠法,检测原理,D-二聚体/ FDP检测原理：免疫比浊法。 用光度计检测含有乳胶颗粒的悬浊液吸光度的变化。含有共价包被特异抗体的乳胶颗粒悬浊液与待检样本进行混合。抗原抗体发生反响，导致乳胶颗粒发生凝集，诱导反响介质浊度增加。浊度的增加反映在吸光度的增加上，用来测试样本中D-二聚体/ FDP的水平。 AT-检测原理:发色底物速率法。 AT在肝素存在时是快速有力的凝血酶抑制物。待测血浆与肝素和过量凝血酶试剂1共同孵育；剩余凝血酶通过对合成产色底物试剂2的酶促反响来定量。由于凝血酶的数量在第一步中被血浆AT成比例地消耗，因此
3、剩余的凝血酶在第二步反响中与血浆AT水平呈反比。此测定不受治疗剂量肝素影响。,PT,PT是检查涉及外源性和共同凝血途径的过筛实验，如因子VII，X，V，II和 I。PT同时用于监测口服抗凝剂的用量，是监测口服抗凝剂的首选指标。PT试剂含肝素拮抗剂。,PT,一、PT延长：1、先天性因子、缺乏症和低无纤 维蛋白原血症；2、获得性凝血因子缺乏：DIC、原发性纤溶亢进、 肝病阻塞性黄疸和维生素K缺乏症；3、血循环中有抗凝物质：口服抗凝剂如肝素和抗凝血因子抗体、抗体。二、PT缩短：先天性因子增多症、口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病。三、口服抗凝剂的检测：据报道，在口服抗凝剂过程中，维持PT在正常对照的1
4、-2倍最为适宜。,APTT,APTT是在体外模拟内源性凝血的全部条件，测定血浆凝固需要的时间，用以反响内源性和共同凝血途径凝血因子因子XII，XI，IX，VIII，X，V，II 和I是否异常。,APTT,一、APTT延长： 见于血友病、凝血因子、和纤维蛋白原缺乏；口服抗凝剂、血循环中有凝血因子抑制物、狼疮抗凝物等。二、缩短： 见于DIC早期，血栓前状态及血栓性疾病。三、监测肝素治疗： 肝素治疗期间，APTT维持在正常对照的倍为宜。 肝素通过AT-发挥抗凝作用， AT-是抑制XII、XI、 IX、 X 等发挥作用，主要是和内源性凝血途径相关。,TT,TT是一评估纤维蛋白形成过程的检测工程，TT同
5、样也是一用于补充PT和APTT的筛选实验。原理：在预定量凝血酶作用下，正常血浆会在有限的和稳定的时间内发生凝固。,TT,TT延长表示FIB异常质量异常纤维蛋白原血症数量： 先天性低或无纤维蛋白原血症；获得性低纤维蛋白原血症肝病，DIC；存在肝素、水蛭素；存在FDP。,FIB,纤维蛋白原在肝脏和巨核细胞内合成，半衰期为3-5d，含量，成人：2-4g/L；新生儿：。在过量凝血酶的作用下，稀释血浆的凝固时间与血浆中的纤维蛋白原水平有直接关系。,FIB临床应用,手术前的筛选试验诊断质量缺陷异常纤维蛋白原血症数量缺陷先天性或获得性 FIB水平升高炎性综合征，糖尿病，肥胖，血栓性相关性疾病。,D-Dime
6、r,交联纤维蛋白的特异性降解产物(FnDPs) 继发性纤溶特有代谢产物，反映凝血与纤溶激活的标志物。 生理性：抗血栓； 降解纤维蛋白/原； 降解凝血因子 FV、FVIII、FX、FVII、FXI、 FXIII； 病理性：纤溶亢进出血。,FDP,FgDPs和FnDPs D-Dimer统称纤维蛋白原降解产物FDPs，具有抗血小板聚集和抗凝作用。FgDPs：Fg降解产物。,AT-检测的临床应用,AT-是一种由肝脏合成的分子量约为58000道尔顿的糖蛋白，是一种凝血酶的抑制剂。一、诊断遗传或获得性AT-缺乏症；二、疑难DIC诊断标准；三、监测肝素是否有效：肝素抗凝作用依赖AT；四、肝病AT合成缺乏：与
7、肝功能受损程度或病情严重程度相关。,影响凝血指标的相关因素,1.放置时间对检测结果的影响与性别和年龄无统计学意义。2.样本量过少2ml, 样本存放时间过长， 采血部位为输液同侧， 标本含有凝块。,样本量,结论：血量减少使凝固时间延长，血量增加使凝固时间缩短。,放置时间长短4,结论：PT在0-8h呈现下降趋势，可能与因子活化有关，PT在24h略有升高；APTT 4h随时间有逐渐上升的趋势，各时间点的均值均高于基线水平，可能与因子活性逐渐降低有关；TT随时间呈逐渐上升的趋势。FIB 值随时间的增加呈现逐渐下降的趋势，但差异并无统计学意义，PT、APTT与TT在屡次测量的时间点上差异均由统计学意义。
8、,输液同侧采血,凝块,凝固反响曲线,整个反响过程包括基线期、加速器、减速期和平台期终点。基线期代表凝血因子被激活，生成凝血酶的过程，也就是凝血的启动阶段，时间相对较长；加速和减速期代表凝血酶发挥作用，纤维蛋白凝块形成的过程；平台期凝固反响完成。 研究说明：在正常情况下，20%-50%的凝原物质就能满足凝血要求。所以体外实验时，一局部凝血因子消耗在一定范围对凝血影响相对较小。 血液有凝块，反响基线期几乎是没有的，反响开始前，凝血因子大局部已经处于活化状态，缩短的基线期时间可能远远大于因为凝血因子减少而延长的时间。,样本采集,另外，样本采集时，长时间扎止血带，静脉穿刺不能一次成功，会造成血管损伤，或组织因子进入血液，使凝血酶形成，加速血液凝固，影响检测结果。 血液有凝块，条件允许就会启动继发性纤溶系统， D-Dimer就会形成，必然会有D-Dimer升高。,谢谢大家！ 欢送指教！,