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1、Chemical Engineering专业毕业论文 精品论文 Expression of -1，3-Glucanase gene in Escherichia coli关键词：酿酒酵母 重组质粒 -1，3-葡聚糖基因 大肠杆菌 基因序列摘要：在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒命名为pET22b/GLU。质粒pET
2、22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因序列有98的序列同
3、源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。正文内容 在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒命名为pET22b/GL
4、U。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因序列
5、有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒命名为pET22b/
6、GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因
7、序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒命名为pET22
8、b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖
9、基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒命名为pET
10、22b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中-1，3-葡
11、聚糖基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒命名为p
12、ET22b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中-1，3
13、-葡聚糖基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒命名
14、为pET22b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中-1
15、，3-葡聚糖基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组质粒
16、命名为pET22b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵母中
17、-1，3-葡聚糖基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此重组
18、质粒命名为pET22b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿酒酵
19、母中-1，3-葡聚糖基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点。此
20、重组质粒命名为pET22b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与与酿
21、酒酵母中-1，3-葡聚糖基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。在本实验中，来自酿酒酵母HS1185的胞外-1，3-葡聚糖基因被插入TA克隆载体pMD-18中，并被转入大肠杆菌JM109中。重组质粒命名为pMDT-18-GLU。通过Xho I和Nco I双酶切质粒pMDT-18-GLU获得的-1，3-葡聚糖基因片段插入pET22b(+)的Xho I和Nco I酶切位点
22、。此重组质粒命名为pET22b/GLU。质粒pET22b-GLU被转入大肠杆菌BL21(DE3)，通过菌落PCR筛选出阳性克隆。 提取出来已经插入-1，3-葡聚糖基因的pET22b-GLU质粒和pET22b(+)通过PCR扩增和限制性内切酶验证分析。PCR质粒pET22b-GLU扩增出1337 bp的条带，与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因大小一致。在酶切验证中，重组质粒pET22b/GLU被Xho I和Nco I双酶切，得到了5431 bp和1337 bp的两条带，分别为pET22b(+)和-1，3-葡聚糖基因。最后通过测序来进一步验证正确的基因序列被插入质粒中。测序结果显示，插入的基因序列与
23、与酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因序列有98的序列同源性。 培养携带pET22b-GLU质粒的重组大肠杆菌BL21(DE3)，并通过IPTG诱导蛋白质表达。通过DNS测定残糖结果显示并没有酶活。但是酿酒酵母中-1，3-葡聚糖基因已经成功插入pET22b(+)质粒，并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。特别提醒：正文内容由PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 。如还不能显示，可以联系我q q 1627550258 ，提供原格式文档。 垐垯櫃换烫梯葺铑?endstreamendobj2x滌?U閩AZ箾FTP鈦X飼?狛P?燚?琯嫼b?袍*甒?颙嫯?
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