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1、微生物与生化药学专业优秀论文 XBP1过量表达对重组CHO细胞胞内HBsAg积累的影响关键词：CHO细胞 HBsAg XBP1 内质网应激反应 二硫键含量摘要：本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg积累部位以及积累原因。 本文通过RT-PCR的方法，
2、成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定DMSO作
3、用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。正文内容 本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg积累部位以及积累原因。 本文通过RT
4、-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通
5、过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg积累部位以及积累原因。 本文通
6、过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并未发生明显的内质网应激反应；此
7、外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg积累部位以及积累原因。
8、本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并未发生明显的内质网应激反
9、应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg积累部位以及积累原
10、因。 本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并未发生明显的内质网
11、应激反应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg积累部位以及
12、积累原因。 本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并未发生明显的
13、内质网应激反应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg积累部
14、位以及积累原因。 本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并未发生
15、明显的内质网应激反应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HBsAg
16、积累部位以及积累原因。 本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg细胞并
17、未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内HB
18、sAg积累部位以及积累原因。 本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HBsAg
19、细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞
20、内HBsAg积累部位以及积累原因。 本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO-HB
21、sAg细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加1.5DMSO于重组CHO细胞的培养环境中使HBsAg的产量提高了80以上，但同时造成了胞内HBsAg的大量积累，其含量是对照组的9倍以上。本文将XBP1基因转入表达HBsAg的CHO细胞中，希望利用XBP1改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决HBsAg的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分
22、析了胞内HBsAg积累部位以及积累原因。 本文通过RT-PCR的方法，成功获得了CHO细胞中的XBP1序列，然后构建了表达质粒pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至CHO细胞中，通过G418抗药筛选，共获得56株克隆。分别用RT-PCR及real-time PCR进行检测，XBP1在单克隆细胞株中的表达量分别提高了2-9倍不等。但分析这些克隆在1.5DMSO下HBsAg的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1能够促进HBsAg分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现DMSO作用下CHO
23、-HBsAg细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定DMSO作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在DMSO作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。特别提醒：正文内容由PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 。如还不能显示，可以联系我q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。 垐垯櫃换烫梯葺铑?endstreamendobj2x滌甸?*U躆跦?l,墀VGi?o嫅#4K錶c&伣嘰呐q虻U節鉡c姥?B
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