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1、海洋生物学专业毕业论文 精品论文 久效磷对早期生长发育阶段斑马鱼GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响关键词:斑马鱼 久效磷农药 GHR1基因 GH基因 生长激素 类胰岛素生长因子-I 生长激素受体1摘要:久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生
2、长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产
3、生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/
4、L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外
5、两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久
6、效磷对处于不同发育阶段的斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与其对鱼体内性激素水平的影响有关。正文内容 久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展
7、中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控
8、鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及I
9、GF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久
10、效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的
11、表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久效磷对处于不同发育阶段的斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个
12、暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与其对鱼体内性激素水平的影响有关。久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育
13、的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与
14、此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P&l
15、t;0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.
16、001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各
17、暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久效磷对处于不同发育阶段的斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与
18、其对鱼体内性激素水平的影响有关。久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfa
19、ctor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.
20、100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著
21、下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<
22、;0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久效磷对处于不同发育阶段的斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对
23、GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与其对鱼体内性激素水平的影响有关。久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大
24、量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因
25、素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了G
26、H基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(
27、P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1
28、基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久效磷对处于不同发育阶段的斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该
29、是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与其对鱼体内性激素水平的影响有关。久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor
30、,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半
31、定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出
32、不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表
33、达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久效磷对处于不同发育阶段的斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时
34、期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与其对鱼体内性激素水平的影响有关。久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、
35、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激
36、IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001
37、、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上
38、升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有
39、极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久效磷对处于不同发育阶段的斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然
40、久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与其对鱼体内性激素水平的影响有关。久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthho
41、rmone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发
42、育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有
43、显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR
44、1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,久效磷对处于不同发育阶段的
45、斑马鱼体内GH、GHR1和IGF-I基因表达的影响是不同:久效磷在性腺分化时期促进了GH基因的表达,而当性腺分化完成后又抑制了该基因的表达;久效磷暴露对GHR1表达的影响随着发育阶段的进行而有所不同,表现为非剂量效应关系;在整个暴露过程中久效磷始终抑制了IGF-I基因的表达,并且这一作用在42dph时最为显著。 根据以上结果我们认为虽然久效磷可以扰乱斑马鱼体内GH与GHR1的水平,但是其对鱼类生长的抑制作用应该是通过IGF-I介导的,而其对GH/IGF-I轴中各因子的扰乱作用极有可能与其对鱼体内性激素水平的影响有关。久效磷农药是一种高水溶性的有机磷农药,在发展中国家使用量大、污染重,对水生生物
46、和人类健康具有潜在的威胁。已经有研究证实,久效磷能够造成斑马鱼卵子质量下降、幼鱼死亡率上升、孔雀鱼胚胎发育畸形、生长发育严重抑制。目前,虽然已经开展了大量关于久效磷生殖毒性、遗传毒性和细胞毒性的研究,但是关于久效磷对鱼类生长发育的影响及其作用机制的研究还少有报道。鱼类生长发育主要与GH/IGF-I轴的调控相关,生长激素(Growthhormone,GH)、生长激素受体(Growthhormonereceptor,GHR)以及类胰岛素生长因子-I(Insulin-likegrowthfactor-I,IGF-I)在鱼类生长发育过程中发挥重要的作用。其中GH是调控鱼类生长、能量代谢、繁殖、摄食和免
47、疫等多项生理功能的关键激素;而GH生理功能是通过与膜上的GHR结合,从而刺激IGF-I的合成与分泌来实现的。大量实验表明GH/IGF-I轴的作用受多种因素的影响:GH的释放和合成受到来自脑和旁分泌腺的多种神经内分泌因子的调控;与此同时,性激素也可以通过调控下丘脑和垂体中各调控因子的表达和功能来对GH的合成和分泌产生影响。由于斑马鱼具有发育周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,因此本文选用斑马鱼作为实验动物,分别用半定量PCR和Real-timePCR的方法研究了0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露条件下,斑马鱼早期生长发育过程中GH、GHR1以及IGF-I基因表达的变化,探讨了久效
48、磷对GH/IGF-I轴影响及其机制。 本文的研究结果表明: (1)0.001、0.010和0.100mg/L久效磷暴露斑马鱼至21dph,久效磷刺激了GH基因的表达,其中0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05);相同暴露条件下久效磷抑制了GHR1的表达,0.001,0.010mg/L组GHR1基因表达均有显著下降(P<0.05);久效磷对IGF-I基因的表达也表现出不同程度的抑制,其中0.001,0.010mg/L组IGF-I基因表达有显著下降(P<0.05)。 (2)久效磷暴露斑马鱼至30dph,久效磷促进了GH基因的表达,并且随着
49、暴露浓度的升高GH基因表达逐渐上升,0.010mg/L组GH基因表达有显著上升(P<0.05),0.100mg/L组则表现出极显著的上升(P<0.01);在该时期久效磷对GHR1表达的影响表现为,0.001mg/L久效磷暴露组GHR1表达显著上升(P<0.05),但是另外两个久效磷暴露组的GHR1基因的表达并没有显著变化;久效磷暴露情况下会抑制30dph时IGF-I的表达,其中0.010mg/L组IGF-I基因的表达有显著下降(P<0.05)。 (3)久效磷暴露斑马鱼至42dph,各久效磷暴露组GH基因的表达均受到抑制,并且随着暴露浓度的升高,其抑制的作用越来越明显,0.100mg/L久效磷暴露组GH基因的表达有极显著下降(P<0.01);在相同暴露时间下,久效磷对GHR1基因的表达并没有显著影响;而久效磷对IGF-I基因的表达有明显的抑制作用,各暴露组的IGF-I表达水平均有极显著下降(P<0.01)。 综上所述,