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1、自身抗体的检测及其临床意义,自身抗体是诊断自身免疫性疾病的重要依据,自身免疫泛指机体免疫系统受某些内因、外因或遗传等因素作用产生针对自身正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类等自身抗原发生的免疫应答反应，出现自身抗体或自身致敏淋巴细胞的现象。 因自身免疫招致组织器官损伤或功能障碍所致疾病称自身免疫性疾病。自身免疫性疾病患者血循环中针对自身组织器官、细胞及细胞内成分的抗体，称自身抗体。自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志。,自身免疫性疾病的共同特征,1.可以有诱因，也可以无诱因，但多数病因不清。无诱因者多称为“自发”性或“特发”性。2.患者以女性居多，并随年龄增加发病率有所增加。3.有遗传趋向
2、。4.血清中有自身抗体或体内有针对自身组织细胞的致敏淋巴细胞。自身抗体在不同的自身免疫病中有交叉和重叠现象。即在不同的自身免疫病患者中查到相同的自身抗体;在同一自身免疫病患者体内可查到多种自身免疫抗体。5.疾病的重叠现象,即一个病人可同时患一种以上自身免疫病。6.自身免疫病一般病程较长,病情发展和缓解呈反复交替现象,易成为终生痼疾。免疫抑制剂治疗可取得一定疗效。,自身免疫性疾病患者大多数体内均可查出较高滴度的自身抗体，因此自身抗体的检测可帮助临床诊断，评价疗效，估计预后。自身免疫性疾病以血清中出现大量自身抗体为特征，其中与某种疾病密切相关的自身抗体称为该疾病的标志抗体，标志抗体的检出有助于临床
3、医生确诊疾病，具有重要的价值。通过大量的研究及临床资料统计，目前比较公认的部分标志抗体：,欧蒙印迹法试剂盒用于体外定性检测血清或血浆中的人抗nRNP、Sm、SS-A（天然SS-A和Ro-52）、SS-B、Scl-70、Jo-1、CENP B、dsDNA、核小体、组蛋白和核糖体P蛋白等14种不同抗原lgG类抗体。,免疫印迹技术（IBT）,免疫印迹技术属于膜载体酶免疫技术，其固相载体为吸附有抗原的硝酸纤维膜。 基本原理是将从小牛或兔胸腔提取的抗原,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,按分子量大小分离成区带,经参照对应分子量标准物质确定每一抗原区带的分子量。然后将各抗原区带转印至硝酸纤维膜上制成抗原吸附载
4、体膜。,将待测血清加在已切成细条的硝酸纤维膜上,待测血清中存在的抗体分别与硝酸纤维膜上的相应抗原区带结合,当再加入酶标记抗人IgG抗体后形成抗原-抗体-酶标记抗体复合物,再加入酶的底物,出现显色反应。凡有抗体与膜上抗原结合的位置,均会因酶促反应而显色。 参照此时抗原区带的分子量及各区带的相应位置,可辨读出各特异性抗体.,抗dsDNA抗体是SLE患者的特征性标志抗该抗体阳性为SLE的重要诊断标准之一。抗dsDNA抗体在SLE的发病机制中起重要作用，SLE并发的狼疮性肾炎是由该抗体介导的免疫复合物病，抗dsDNA抗体可形成多种冷沉淀而致血管炎，SLE肾炎及典型的蝶形红斑均与该抗体有关。 抗dsDN
5、A抗体诊断SLE的特异性可达95%100%，但其敏感性仅为30%50%，因此抗dsDNA抗体阴性不能排除SLE的诊断。,抗RNP抗体 高滴度是混合性结缔组织病(MCTD,夏普综合征)的特异性标志（阳性率为95-100%），抗体滴度与疾病活动性相关；低滴度可见于SLE（15-40%，常伴Sm抗体阳性）。抗Sm抗体 SLE的标志性抗体（5-30%），与dsDNA一起是SLE的诊断指标，与疾病活动性无关，一般伴有U1-RNP抗体阳性。抗核小体抗体 SLE标志性抗体（85%），可用于SLE的早期诊断，与狼疮肾炎相关,抗SS-A抗体 与各类自身免疫性疾病相关，最常见于干燥综合征（40-80%）。SLE（
6、20-60%）；新生儿红斑狼疮（100%），可引起先天性新生儿心脏传导阻滞。与狼疮肾病的发生相关。抗天然SS-A（60kDa）抗体对SS和SLE的特异性高。该抗体的产生与HLA有关。抗Ro-52抗体不具有疾病特异性，而且还可与抗Jo-1和RNP抗体发生交叉反应。抗SS-B抗体 干燥综合征（40-95%）；SLE（10-20%）；亚急性皮肤狼疮（25-35%）。,抗Scl-70抗体 进行性系统性硬化症（25-75%），与皮肤硬化、肺部受累及肿瘤有关；抗体滴度与疾病活动性无关。抗PM- Scl抗体多肌炎/皮肌炎（8%），弥散性硬皮病（3%）；50% PM- Scl抗体阳性见于皮肌炎与硬化症的重叠综
7、合征。抗Jo-1抗体 多肌炎特异性抗体（25-35%），伴肺间质纤维化时可高达75%。高度提示抗合成酶综合征。,抗PCNA 是增殖性细胞核抗原，是SLE的标志性抗体（2-10%），与SLE弥散性肾小球肾炎相关，对激素治疗敏感。抗组蛋白抗体多种结缔组织病中均可出现，在药物诱导的SLE中较常见（阳性率为95%）不具有疾病特异性。仅有此抗体阳性，而不伴有其他ANA，则强烈支持DIL的诊断。与SLE活动性及狼疮肾病相关。,抗着丝点抗体 局限型弥散性硬皮病（30%）；CREST综合征（50-80%）；原发性雷诺现象（25%）；原发性胆汁性肝硬化（10-20%）。抗M2抗体 原发性胆汁性肝硬化特异性抗体（
8、96%）；其它慢性肝病（30%）；进行性系统性硬化症（7-25%）。抗核糖体P蛋白是SLE的特异性抗体（5-20%）。,系统性红斑狼疮(SLE)靶抗原阳性率(%)dsDNA标志性抗体 30-90Sm标志性抗体 5-30核糖体P蛋白标志性抗体 5-15核小体标志性抗体 50-95PCNA标志性抗体 3组蛋白 40-80RNP 15-40SS-A 20-60SS-B 10-20,新生儿红斑狼疮（NEL）靶抗原阳性率(%)SS-A 100药物诱导的红斑狼疮（DIL）靶抗原阳性率(%)组蛋白 95,原发性干燥综合征（SS）靶抗原阳性率(%)SS-A 40-95SS-B 40-95混合性结缔组织病（MCDT）靶抗原阳性率(%)RNP 95-100,弥漫型进行性系统性硬化症靶抗原阳性率(%)PM- Scl 3Scl-70标志性抗体 25-75局限型进行性系统性硬化症靶抗原阳性率(%)着丝点 80-95,多肌炎和皮肌炎（PM/DM）靶抗原阳性率(%)PM- Scl 8Jo-1 25-35,谢谢大家,