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1、ATG16L1与Gal9在溃疡性结肠炎活动性判定中的价值纳入标准：年龄在2080岁；符合2012年炎症性肠病诊断与治疗的共识意见6中对于UC的诊断标准；各项检查资料完整；患者及患者家属均签署知情同意书。排除标准：过去3个月内使用过水杨酸制剂、糖皮质激素、免疫抑制剂及生物制剂等；合并心血管疾病和肝肾疾病；合并恶性肿瘤；合并其他自身免疫性疾病；哺乳以及妊娠期妇女。 1.3 方法 1.3.1 疾病活动性评估 本次研究中使用改良Mayo评分系统7对UC的活动性进行评估，评估项目包括：排便次数、便血情况、内镜表现以及总体评价，根据患者实际情况与患者健康时自身情况，每项进行03分的评分，总分为12分，分数
2、越高表示越严重。根据评分可分为：临床缓解期2分；轻度活动35分；中度活动610分；重度活动1112分。 1.3.2 ATG16L1、Gal-9相关PCR检测 所有患者在结肠镜检查时分别采集结肠黏膜标本3份，其中1份使用荧光定量PCR方法进行检测，具体操作方法如下7-8：将标本在液氮保护下研磨，使用逆转录反应试剂盒提取总RNA，试剂盒购买于Takara公司（RT-reagent），荧光定量PCR反应试剂盒购买于Takara公司（SYBRPremixExTaq）严格按照说明书方法操作。扩增体系为1 L cDNA加入到10 L去离子水，95预变性1 min；变性：95下15 s，退火：60下30 s
3、，延伸：72，共进行40个循环，比较。ATG16L1上游引物5-GGCTGTACCGTGTTTCCTTAG-3，下游引物5-CTTCATGGCAAGTGG-TTGTAC-3；Gal-9上游引物5-GGCTGTACCGTGTTTCCTTAG-3，下游引物5- GTGAAGGTGACAGCAGTCGGT-T-3均?樽孕猩杓啤? 1.3.3 ATG16L1、Gal-9相关免疫组化检测 将“1.3.2”中另两份样本及逆行免疫组化检测，具体方法如下：将样本及逆行固定、脱蜡处理，3%过氧化氢室温孵育10 min，以消除内源性过氧化物酶的活性，后用PBS冲洗，再放入枸橼酸钠缓冲液高压煮沸2 min，后用PB
4、S冲洗。分别滴加小鼠抗人ATG16L1、Galectin-9单克隆抗体（购买于上海信裕生物科技有限公司），阴性对照用PBS代替，4孵育24 h。复温40 min，PBS冲洗，滴加鼠二抗工作液，室温孵化1 h后PBS冲洗，滴加辣根过氧化物酶标记链酶卵白素工作液，室温15 minPBS冲洗。DAB显色10 min，显微镜下控制反应时间，显色满意后自来水冲洗，后用苏木精复染。清水冲洗后氨水返蓝，封片。每张切片随机选取8个高倍视野，细胞颜色包括无色、浅黄色、黄色、棕黄色和棕褐色，着色比例大于30%并且颜色为黄色、棕黄色、棕褐色的细胞为阳性细胞，表达阳性率用每个视野中阳性细胞比例表示，阳性率=（视野中阳
5、性细胞个数/视野中总细胞数）100%，取8个视野的平均值。 1.4 统计学方法 采用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析，计量资料数据用均数标准差（xs）表示，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验；计数资料用率表示，组间比较采用2检验；采用Spearman相关分析观察组患者ATG16L1、Gal-9表达水平与Mayo评分的相关性，以P 细菌感染也是导致UC的重要原因，肠黏膜受损细菌侵入引会起免疫反应17。既往研究表明，在正常生理条件下Gal-9表达极少，但在一些炎性因子IFN-、IL-1等的刺激下表达增加18。近年来研究表明，弯曲菌侵入可诱发UC，并使单层肠上皮表达
6、Gal-9的水平显著增高，同时ATG16L1表达异常导致炎性也会引起Gal-9的水平升高19。本研究结果提示不同UC活动性的患者中，Gal-9的mRNA相对表达量与表达阳性率存在显著差异，其水平与Mayo评分呈显著正相关。IFN-、IL-1可通过激活细胞及B细胞，促进产生下游细胞因子，从而发挥免疫上调作用，同时也可以促进炎症细胞释放炎性因子，发挥促炎症作用，说明Gal-9可作为一种反应UC活动性的评价指标20。 综上所述，UC患者ATG16L1、Gal-9表达水平存在显著异常，并且不同UC活动性间的ATG16L1、Gal-9表达水平存在显著差异，ATG16L1表达水平与Mayo评分呈现显著的负相关关系，Gal-9表达水平与Mayo评分呈现显著的正相关关系，可作为判定UC活动性的指标。