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1、“慢呼宁”口服液对鸡安全性的试验研究随着鸡群养殖集约化程度越来越高，鸡的呼吸道疾病成为当前养鸡业中具有严重危害的一类疾病，由此造成了巨大的经济损失，而且还影响了相关产品的品质。目前，鸡的呼吸道疾病在治疗上多采用疫苗紧急免疫或西药治疗，而疫苗免疫具有免疫失败的潜在危险性，西药治疗又极易产生细菌耐药性，中药防治为此提供了必要的补充，又符合当前人们对畜产品安全性的需求。“慢呼宁”口服液是由中国农业科学院兰州畜牧与?F药研究所研发，针对鸡慢性呼吸道病而开发的新型中兽药制剂，具有调节鸡体免疫力和抗菌消炎等功效。为对“慢呼宁”口服液的安全性进行评价，作为临床用药的安全依据，开展此项研究。 1材料与方法 1
2、.1材料 1.1.1试验用药“慢呼宁”口服液（批号：2011062402），由中国农业科学院中兽医研究所药厂生产，主要由金银花、连翘等中药组成，具有辛凉透邪、清热解毒的功效，可用于治疗鸡的慢性呼吸道病。 1.1.2仪器及试剂迈瑞BS-420型全自动生化分析仪，由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产；AUW120D电子天平，由日本岛津公司生产；LEICA RM2025型组织切片机、LEICA TP1020型组织脱水机，由德国Leica公司生产；CK-2型倒置显微镜，由日本Olympus公司生产；CELL-DYN3200HJ1.4mm血细胞分析仪，由美国雅培公司生产；天门冬氨酸氨基转移酶试剂盒（批
3、号：140212018）、丙氨酸氨基转移酶试剂盒（批号：140112022）、白蛋白试剂盒（批号：140912017）、肌酐试剂盒（批号：141012017）和尿素试剂盒（批号：141212020），均由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司生产。 1.1.3试验动物120羽JP214日龄三黄肉鸡，购于兰州市西固区联合养鸡公司，由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所标准化实验动物房饲养，适应性饲喂1周。将鸡随机分为4组（每组30羽）：1倍剂量组、3倍剂量组、5倍剂量组和对照组。JPHJLM 1.2试验方法 1.2.1给药方案1倍剂量组、3倍剂量组和5倍剂量组分别按照推荐剂量（按原药材计0.50 g/k
4、g体质量）的1、3、5倍量，将药物进行饮水饲喂，连续饲喂1周。对照组不给予任何药物，进行正常饲喂。 1.2.2相关指标的观察测定观察试验期间每天各组鸡的健康状况，包括活动、采食、饮水、发病和死亡等。在试验鸡21日龄时，随机选取10羽，进行称质量，然后心脏采血和剖检。试验结束时各组剩余鸡再随机选取10羽重复上述操作。观察剖检鸡的实质性脏器有无眼观病理变化，对心、肝、脾、肺、肾称质量并计算脏器指数（脏器湿质量/体质量100%）并进行病理取材，于4%甲醛固定48 h后，做病理组织切片，经HE染色后，进行显微镜观察。 1.2.3血常规及血清生化指标的测定用血细胞分析仪进行血常规分析，主要测定白细胞（W
5、BC）数、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比、中性粒细胞百分比、红细胞（RBC）数、血红蛋白（HGB）含量、血小板（PLT）数。用迈瑞BS-420型全自动生化分析仪测定血清中肌酐含量、尿素含量、白蛋白（albumin，ALB）含量、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransterase，AST）和丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase，ALT）活性。 1.2.4数据统计数据用SPSS 14.0软件进行方差分析，P0.05）。 2.5鸡脏器病理剖检结果 JP+1在用药前及用药7 d后，除对照组1羽鸡在试验过程中因应激发生死亡外，其余各组鸡的心、肺、脾和
6、肾脏均未表现差异。心脏均为圆锥体，颜色粉红，心包膜及心包液透明；有结构完整闰盘，心肌纤维致密和肌纤维束分布均匀；细胞核和胞浆均匀；眼观无明显异常。肺脏均扁平呈长四边形海绵状，颜色粉红，有结构完整、分布均匀、大小不等的肺泡；眼观无明显异常。脾脏如球体，颜色棕红，脾束、脾血窦和小静脉结构明显，淋巴细胞均匀分布，皮质、髓质结构完整；眼观无明显异常。肾脏为红褐色，呈长条状，质软，肾小体、近曲小管和远曲小管结构完整，肾小管密集，细胞核大小一致，分布均匀；眼观无明显异常。肝脏呈红褐色，肝组织以肝细胞及中央静脉为中心，呈放射状排列，肝细胞呈梁索状；眼观无明显异常。JP 3小结与讨论 3.1“慢呼宁”口服液的
7、毒副作用 “慢呼宁”口服液以金银花和连翘为主要有效成分。与连翘相关的药理作用研究和报道中，涉及的化学成分以连翘酯苷、连翘苷、连翘酚和挥发油类居多，这些成分临床应用广泛且疗效确切，毒副作用低1，3。 方中金银花具有抗病原微生物、抗炎、免疫调节和中枢兴奋等作用。研究表明，金银花的水浸液灌服对家兔、犬等无明显的毒性，对呼吸、血压和尿量均无影响，小鼠皮下注射金银花浸膏的LD50为53 g/kg体质量。报道表明，溶血作用均为其生晒品，其致敏作用也可在口服过程中被消化道的酶类所破坏4。 3.2“慢呼宁”口服液对鸡生理生化指标的影响 将“慢呼宁”口服液对试验组鸡进行饮水饲喂后，对鸡的体质量增长无明显影响，且
8、与对照组鸡相比有体质量增长加快的趋势。同时，该药对鸡的脏器指数亦无显著影响。各组鸡在用药前，单核粒细胞数和中性粒细胞数虽然组间出现了差异；但用药7 d后，组间的差异性反而消除了；而其他血常规指标则在试验前后组间差异不显著；从一定意义上说明了此方对机体的免疫调节作用5-6。在血清生化指标方面，ALT活性、AST活性和白蛋白作为综合衡量肝功能的重要指标，在用药7 d后，仅3倍剂量组鸡的AST活性显著低于对照组（P0.05）及3倍剂量组肝脏病理剖检的结果，不能说明药物对鸡的肝功能造成了影响；在试验前后，各组间鸡的血清尿素含量和肌酐含量差异不显著，说明药物对肾功能未造成影响7。试验前后，根据兽医组织学相关资料8-9，各组鸡经病理剖检未见明显的眼观病变，而显微镜检也未发现异常。 综上所述，“慢呼宁”口服液是一种低毒安全的中兽药制剂。