《2018年免疫学检原理及临床应用课件-文档资料.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2018年免疫学检原理及临床应用课件-文档资料.ppt（32页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、一、基于抗原抗体反应的检测方法 抗原抗体结合反应的特点 1.高度特异性 2.抗原抗体结合的带现象与可见性 3.可逆性 影响抗原抗体反应的因素 1.电解质 2.酸碱度 3.温度 4.抗原和抗体的性质,前带现象,后带现象,抗原抗体反应的基本检测方法 1凝集反应 颗粒性抗原（如细菌、细胞）与相应抗体，在适当电解质存在的条件下，经过一定时间后出现肉眼可见凝集块，称为凝集反应,凝集反应种类 直接凝集反应 间接凝集反应 是将可溶性抗原或抗体吸附于与免疫无关的 载体上，使之成为致敏载体颗粒，然后与相 应抗体或抗原作用，在电解质参与下出现的 凝集反应 间接凝集抑制反应 将可溶性抗原与相应抗体预先作用，然后再
2、加入致敏载体悬液，由于抗体已被可溶性抗原 结合，因而致敏颗粒不发生凝集现象，称为 间接凝集抑制试验,2 沉淀反应 可溶性抗原（如细菌浸出液，组织浸出 液和 动物血清等）与相应抗体结合后， 在电解质存在条件下，经过一定时间作 用后，可出现肉眼可见的沉淀物，称为 沉淀反应, 单向扩散试验 是一种定量试验，使抗原在含有抗体的琼脂 介质中扩散，经一定时间后即可见抗原孔周 围出现由抗原抗体复合物形成的沉淀环。沉 淀环的直径与抗原浓度成正比。故试验前应 用已知不同浓度标准抗原制成标准曲线（纵 座标为沉淀环直径，横座标为抗原浓度）， 可根据沉淀环直径的大小从标准曲线中查出 待检样品中抗原的含量。临床上常用于
3、测定 IgG、IgM、IgA的含量,双向扩散试验 抗原与抗体在琼脂介质中相互扩散，如抗原 抗体相应且浓度比例适当，则在抗原抗体之 间可出现白色沉淀线。一对相应的抗原抗体 只能形成一条沉淀线；多种抗原抗体系统， 测可形成多条沉淀线,免疫电泳 免疫比浊,3 补体参与的反应 补体结合试验、溶血空斑试验 4 免疫标记技术 免疫标记技术是指用荧光素、酶、同位素或电 子致密物质等标记抗体或抗原所进行的抗原抗 体反应 优点：特异、敏感、快速、能定性、定量甚 至定位，且易于观察,免疫荧光法, 酶免疫测定 酶免疫技术是通过适当的酶促化学反应和免 疫反应，使抗体（或抗原）与酶蛋白分子结 合，形成酶标抗体（或抗原）
4、，该结合物保 留免疫学活性和酶活性，因而既有抗原抗体 反应特异性，又有酶促反应的特异性。酶分 解底物后的显色深浅可反映标本中抗原或抗 体的含量 常用酶 辣根过氧物酶、碱性磷酸酶,*酶联免疫吸附试验（ELISA） 间接法 用于测抗体 包被抗原加待测标本加酶标抗体加底物 终止反应测OD值 双抗体夹心法 用于测抗原 包被抗体加待测标本加酶标抗体加底物 终止反应测OD值,*酶联免疫斑点试验 *BSA-ELISA 免疫组化技术 放射免疫测定法 化学发光免疫分析 免疫印迹法,二免疫细胞检测 免疫细胞及其亚类计数 淋巴细胞功能测定 1 体外试验 淋巴细胞增殖试验 细胞毒试验 分泌功能测定 2 体内试验,三免疫分子检测 免疫球蛋白测定 补体测定 细胞因子检测 CD分子、表面受体和黏附分子的检测 HLA分型,