《2018年血栓调节蛋白和血栓性疾病-文档资料.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2018年血栓调节蛋白和血栓性疾病-文档资料.ppt（22页珍藏版）》请在三一文库上搜索。
1、抗凝物质 -启动蛋白C(protein C，PC) 抗凝途径的重要辅因子 通过与凝血酶结合形成TM-凝血酶复合物参与机体抗凝和纤溶，与血栓形成有着密切的关系,凝血酶调节蛋白(thrombomodulin，TM),抗凝机制,（TF） a 凝血酶 凝血酶 抑制（激活）纤溶系统,内源,外源,a a,a ,a a,AT-,HC ,P C APC PS,TFPI,TM+凝血酶,TM的概况 1960年，Mammen发现含凝血酶血浆具有抗凝作用 1976年，Stenflo证明这种抗凝物质是蛋白C 如何？ PC APC 1981年，Esmon首先从兔肺中分离出纯化 TM 激活蛋白C 1984年， Salem
2、分离 人胎盘TM 1986年，Jacubowski 分离牛TM 1988年，Kumada分离鼠TM 1987年， Jackman RW将人TM的cDNA分离、测序 重组人TM合成,APC+钙离子+PS 降解 a和a 抗凝作用,PC的抗凝途径 经典试验 纯合子PC缺乏-新生儿爆发性紫癜 杂合子PC缺乏-一部分患有血栓 PC水平减少-DIC有关（DIC指标）,APC+钙离子+PS 降解 a和a 抗凝,TM的结构 由557个氨基酸构成的、不具备内在酶活性的1型跨膜糖蛋白 胞外区-496个氨基酸 1-226个氨基酸组成的第一区域 227-462个氨基酸组成的第二区域，由6个表皮生长因子() 样结构区（
3、16区）组成的重复序列 组成 富含丝氨酸/苏氨酸的第三区域，第6个EGF分子区和跨膜区域之间 跨膜序列-23个氨基酸 含2个半胱氨酸的单链跨膜区域，即第四区域 胞内区-38个氨基酸 为一短的尾部，即胞浆区或第五区域,TM五个区域（功能上） 第一区域-不参与激活活化蛋白C的过程，但为受体介导的胞吞所 必需，参与内皮细胞在肿瘤生长和炎症过程中的调节 第二区域-46区有重要的钙离子结合点，为蛋白C活化所必需 第三区域-附加硫酸软骨素部分对TM与凝血酶的结合起稳固作用 第四区域-人血尿中有活性的TM可能来源于分解的跨膜成分 第五区域-胞浆区，与TM的内吞和降解有关,Transmembrane Cyto
4、plasmic Rich Ser/Thr EGF-Repeats Lectin Like Ca PC Activating Thrombin Binding COOH NH3 Plasma Membrane TM的结构和cDNA克隆示意图,6,5,4,3,2,1,TM的合成和表达 血管、淋巴管的内皮细胞 人胚胎组织中的合体滋养层细胞 中性粒细胞、单核细胞、血小板、间皮细胞 血、尿、关节组织-以维持血液、淋巴液、滑液呈液 体状态，以防凝块,TM凝血酶复合物 如何结合？ 内皮膜上的TM与凝血酶有很强的结合力，以1：1的比例形 成TM凝血酶复合物 TM上的硫酸软骨素部分，提供另一个参与PC活化的凝血
5、酶 结合位点，可增加TM与凝血酶的亲和力10-20倍 TM凝血酶复合物的形成使凝血酶构型发生改变，在钙离子 参与下，特异结合蛋白C，发挥TM的抗凝作用 由于TM凝血酶复合物的形成，抑制了凝血酶与纤维蛋白原 和蛋白酶激活受体-1（PAR-1）的相互结合 由于TM凝血酶复合物的形成，遮盖和抑制了血小板上的 凝血酶受体，抑制血小板与内皮的黏附和聚集,Thrombomodulin protein C,Protein C Receptor (EPCR),Thrombin,+Protein S,Activated Protein C,fibringen receptor? platelet +,1.Phy
6、siological anticoagulation 2.Modulation of pro-inflammatory reponse,蛋白C途径模型,TM的功能 加速蛋白C的激活： 作为强的蛋白C激活物，TM能使依赖凝血酶的蛋白C活化过程加快两个以上的数量级。 降低凝血酶的功能： TM介导调控体内重要的两种抗凝机制 抑制凝血酶的促凝结构-因微血管系统富含TM，这种环境下所产生的凝血酶绝大部分都被TM包围或分隔 减少凝血酶的生成-大量激活蛋白C（APC）的形成使a和a水解加速，抑制凝血酶过多地产生, 对纤溶的作用 TM凝血酶复合物能活化凝血酶激活的纤维蛋白降解抑制物 （TAFI）。 单链尿激酶
7、型纤溶酶原激活物（uPA）也已被证实是TM凝血酶 复合物的附加底物，进一步肯定了TM在纤维蛋白降解过程中具有广泛 的作用。 TAFI与蛋白c竞争性的与TM凝血酶复合物结合，形成了一个分 散的表面。,TM的其它功能 通过生物学、结构学、基因工程分析等研究发现，TM不需要与PC、TAFI或凝血酶结合，也能发挥某些其它的生物功能，但必需通过血凝素样分子和EGF区域来介导。 抗肿瘤、抗炎症、稳定胚胎发育过程等,Platelets,Inflammatory cells,IIa,Va,VIIIa,Fibrinmonomer,X,Xa,Cellular,TNFa IL1,X,X,X,Quiescence,T
8、F-Vlla,X,*Inactivation,Inactivation,AT,GAG,Endothelium,TM-IIa,Protein S,Prot C,APC,Inactivation,X,X,X,Vascular/proteins Fibrinogen,Fibrinolysis,Restoration of Capillary blood flow,PAI-1,X,Protein Z,ZPI,Ischemia/infarction,Site,TPI,TM基因多态性与人类疾病 TM基因多态性与血栓和动脉硬化的关系 133C/A多态性-心肌梗死（MI） 33G/A多态性-MI或颈动脉硬化
9、A25T多态性-使MI的危险性提高 EGF6区Ala455Val多态性-与MI相关 TM基因多态性与TM的功能 Arg385Ser多态性（ EGF 4区）-使TM的表达和TM的辅因子活 性减少 EGF 4区和5区域环间的突变-使TM的抗凝辅因子活性减低甚至完 全丧失 del791-801,Arg246-第一个导致人类TM功能完全丧失的基因 突变，与血浆TM浓度的减少（大约为正常人的50）,TM和血栓疾病 老鼠服用TM 减轻凝血酶诱导的血栓栓塞 （依赖TM） 注射抑制PC活化的抗体 加强凝血酶的效果 三种不同程度的TM功能缺陷的小鼠 完全TM缺陷的小鼠由于胎盘发育缺陷而死于宫内 表达50%TM功
10、能的小鼠不会引起小鼠自发性血栓形成，但会增加肺内纤维蛋白的形成而导致持续性的低氧症,TM功能下降 导致血栓形成,TMPro mice（Glu387Pro 点突变基因小鼠） 尽管TM激活PC的能力丧失，但只是轻度增加血栓形成的危险性 TM与其它附加的危险因素结合才可能参与或导致血栓形成 内皮细胞损伤时，局部TM缺乏触发了凝血和血栓形成 让野生型胚胎和TM完全缺陷的胚胎干细胞进行杂交，生产出的鼠的血管内皮上有一不连续的表面，由TM完全缺陷的区域和邻近的TM正常表达的区域相互交替形成的血管内皮上，纤维蛋白沉积仅仅出现在TM缺陷的地方。 内皮细胞中敲除TM基因 敲除TM基因后不会影响胚胎发育，但活产的
11、动物由于在动脉和静脉自发性血栓形成而导致多脏器损害，出生后短期内死于消耗性凝血病。,TM和动脉硬化 在动脉硬化损害区，内皮上TM的局部缺失导致病变部位PC活化受损 血浆TM的基础水平能够反映内皮细胞TM表达，但它与动脉硬化疾病之间的关系不肯定 局部TM的增加是否对动脉硬化有保护作用不肯定, 在血管再狭窄和静脉移植发生粥样硬化过程中，TM对局部血管壁的病理改变可能起调节作用 将逆转录病毒的TM注入人为扩张的兔股动脉，可减少血栓负荷、血管壁膜再形成、炎症细胞的浸润和基质的退化，说明平滑肌细胞增殖受抑与TM有关 在内皮细胞中发现TM可通过MAP激酶/ERK途径调节依赖凝血酶受体的胞间信号转导,TM和
12、中风 有研究表明脑出血与血浆TM水平呈负相关 与其他血管床比较，TM在脑毛细血管的表达很低，可能是因为脑内某些区域缺乏TM。 体外试验中脑血管TM的表达可被星型细胞释放的TGF（转化生长因子）抑制，提示TM可能影响星型细胞的功能，从而防止凝血酶诱导的神经细胞死亡。 动物研究显示用可溶性TM治疗可极大地改善脊髓损伤的预后,TM目前研究状况 TM作为内皮损伤指标的证据 TM与DIC TM、VWF、TF的关系 TM与炎症和多脏器功能衰竭 TM与肿瘤 重组TM（ART-123） 的临床应用 细胞保护和抗炎作用 DIC 抗血栓治疗 肝素治疗与TM的关系 TM的检测方法：抗原测定（TM片段） 活性测定,谢 谢 ！,