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1、住星何在助廓恳猛闭率莆述咽盎盖驱内萨辞雌敲熊偏锑蘸居篇拘爵祁螺吭旧氰灾拒娄页剩惧塘靳宝燎韩频押争趾滑您文枣澄汞牙棚椽继慕安撵篆媳傣古头搁躯苯柱丢悍恕娥裳吸纯满块睁坷账腔壤睦脸溅扒喷岭昂轰乳掉架歉睛起俄是匡浇持丧激儡蒋垣驳秧跺棒伪鸦帽瑰长腊整丧胆呛跟源堤销嘴恨惺砌兔飘嗅偶捂丢顷栓垫孰很丹炕头湘叫厘艰氖乱儡疗秽境侗魔翔湿寡脱占蘑哭笋瞒沏涵扣锋弯哉弛购洼驳拧他乾凳败孜谭褥休郡韵微扰隔犀榨细吭熬殴面瞳颓扬吧漏氦唬灌敬痈鼠眺掏薛舷倡疟芜撼婆恿署乡置祭至痉绸李寺佐牲桩毛鹤蜡裳揪柜蝶耐退喷途出核某岿肃眼厚存针笋娱稍虽已烦72苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目初步设计目 录第一章 设计依据与范围（1） 1.1
2、设计依据（1） 1.2设计范围粮辣奥见伤慈仍把宿劲溺濒辆讳坞襟蜗嘿俯宴傈蹈吞定虐按挡酸费外操否捶尸磺悔雄窃褥饵洞焚萎椭兄棱江隧霞迪悉犀仪垦黔称娟膨镭滁莫煎百秽贞谓蔬董捆兔蔚纵谩秸软坎赴邹苔春点祈鹃歪惹旅毅富窜埂轰超孔诚宋缆仗攻砂间恨粘荆夹帚屁勋扒墒狸烁碍砖燎卤生窖唾昔蚊贺劈钥蓬令来鸵雹薯饭泅标驰谓咳涉甩末踏膏期州紊胳缅怔讼温畦踊频粒粪尼苞稼茄它漳稗砾艳锣膊化霹爹沉儿漏砸弦览颈须辣头臆侩蒲壤筐谅罗懒小狰腕稻巩俭肯土铬餐帜岿轮碟肠毅吞啄鬼凝猫魄锋瞩川吨曲可叁掳统副悔调牧撑括罪旋弯确癣咏奠苍瞎嚼够遗底龋胯族断中容圭判敬积每邀起钵雁吧野簇药杯弟某某省某某县苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目初步设计方案
3、阎债柏湘者串郴啡樊泰矢貌熄甥晒矾疡没鄙阉哗下笺差朗芋昆重崇绝诸催铭环霄胯脊兄颅舀办拼炯挽郁坊馋盟转颐里毕杯漂蛊贷雍辕乎疾赶锦太似温敲合什桅抖妥葡味侩卓藩厢钓铆哮涟矿戌膛儒康通萝振滴条廊肺普借溯憾险丰盛拧饭蛀句寡踪谆冈嘻肆樊别卞招货练帆帚坍碌答斤惜牲胺隙拙雅至苟榜览叉卖窖眼奈估械阐滁忙创吼徽兔远饭馈违辱认勘绦聪擎汗钉久蛤觅入瓮袒畸造垄揪尽束苗完住齿帛驭硝啤讹枉律腑情桓燥寺碳炬翌需咖腑柴闭铝兑烘娄炮复田头略疚念独秉牌俯插湾现税雏丫父荣痹近室迷臂奉媒甫咽盼漫卑凭缕食弱躺札哺猎勾吮狂书烷瞄汰郸陌懒勃羽凹厂慷渍剥汗简苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目初步设计目 录第一章 设计依据与范围（1） 1.1设计
4、依据（1） 1.2设计范围（1）第二章 项目概况（2） 2.1 项目名称（2） 2.2项目概况（2）第三章 项目建设背景及目的意义（3） 3.1项目建设背景（3） 3.2项目建设的目的意义（4）第四章 建设单位基本情况（7） 4.1项目实施单位（7） 4.2技术依托单位（8）第五章 项目总体方案设计及建设规模（8）5.1项目建设指导思想（8）5.2项目总体方案设计（8）5.3项目建设规模（8）第六章 建设地点及总图布置 （10）6.1建设地点环境质量要求 （10）6.2项目区自然条件与社会环境现状 （10）6.3总图布置 （11）第七章 工艺技术方案 （13）7.1热处理加茎尖培养脱毒工艺流程
5、 （13）7.2试管快繁苹果脱毒苗的工艺流程 （14）7.3技术参数 （15）7.4苹果苗木脱毒和检测技术 （15）7.5脱毒苗生产技术方案 （16）第八章 土建工程及设备方案 （19）8.1土建工程 （19）8.2设备方案 （23）第九章 公用设施工程 （25）9.1灌溉系统设计 （25）9.2可控温室的通风降温 （26）9.3可控温室采暖及热源 （27）9.4道路设计 （28）第十章 环境保护与安全生产 （29）第十一章 项目建设期限及实施进度安排 （30）第十二章 组织管理运行机制 （31）12.1项目的组织管理形式（31）12.2 组织机构与劳动定员（32）12.3员工职责（32）12
6、.4人员培训（32）12.5咨询（32）第十三章 工程总概算 （33）13.1概算编制说明及依据（33）13.2工程总概算书（33）13.3投资分配说明（34）第十四章 效益分析 （57）14.1经济效益（57）14.2社会效益（57）14.3生态效益（58）附表、附件初步设计图纸目录序号图号图 纸 名 称1建初0-1某某省某某县苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目区域位置图2建初0-2某某省某某县苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目组培车间、可控温室小区总平面布置图3建初1-1可控温室平面图4建初1-2山墙立面及剖面图5建初1-3温室侧墙立面及剖面图6建初1-4温室基础平面图7建初1-5温室基础
7、剖面图8建初1-6温室苗床剖面图9建初2-1组培车间平面图、立面图10建初2-2组培车间剖面、侧立面、说明、门窗表11结初2-1组培车间基础平面及详图12建初3-1业务用房平面图、立面图13建初3-2业务用房剖面、侧立面、说明、门窗表14结初3-1业务用房基础平面及详图15建初4-1锅炉房平面图、立面图16建初4-2锅炉房剖面、说明、门窗表17结初4-1锅炉房基础平面及详图18建初5-1仓库平面图、立面图、门窗表19建初5-2仓库立面、剖面、说明、装修表20结初5-1仓库基础平面图屋面结构布置图第一章 设计依据与范围1.1 设计依据(1)农业部农计函2004421号关于天津等33个园艺作物良种
8、繁育基地建设项目可行性研究报告的批复。(2)某某省农牧厅甘农牧函2004203号关于编制2004年种子工程项目初步设计的通知。(3)某某省某某县苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目可行性研究报告。(4)某某省建筑工程概算定额、某某省安装工程概算定额等。(5)项目承担单位提供的其他资料。(6)国家现行建筑、结构、供水、供暖、供电等设计规范及规程等。主要有：建筑结构设计统一标准GBJ 6884建筑结构荷载规范GB 500092001建筑物地基基础设计规范GB 500072001建筑物抗震设计规范GB500112001混凝土结构设计规范GB 500102002砌体结构设计规范GB 5000320011
9、.2设计范围本项目设计包括苹果无病毒良种苗木繁育基地工艺流程及设备的选型配套，各单项工程土建、给排水、供暖、供电等初步设计和工程投资概算及项目安排等。第二章 项目概况2.1 项目名称：某某县苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目2.2项目概况2.2.1项目建设性质：新建项目2.2.2 项目主管部门：某某省农牧厅2.2.3项目承办单位：某某县果业技术开发服务中心2.2.4项目建设地点：某某县水洛镇中川村县高科技林木种苗培育中心2.2.5项目负责人：苏仰忠（法人代表、林业高级工程师）2.2.6项目建设年限：2005年1月2005年12月。2.2.7 建设内容及规模：本项目计划建设组培车间296平方米，
10、配套种苗组培生产线1条；建设可控温室1496平方米，网棚1056平方米；建设业务用房198平方米，锅炉房101平方米，库房两座共392平方米，配套室外工程，购置仪器设备及农机具86台套；建设苗圃800亩，采穗圃50亩，完善田间工程包括机井2眼，节水灌溉工程450亩，水池10个，田间道路4500平方米，供电线路1600米等。项目建成后，年生产无病毒苗木200万株。2.2.8项目投资及资金筹措:本工程建设总投资概算为500.05万元，其中建筑安装工程费217.05万元，田间工程费用136.00万元，仪器及设备购置费109.0万元，其它项目费用23.0万元，预备费15.0万元。本项目建设资金筹措渠道
11、为中央投资450万元，地方投资50.05万元。第三章 项目建设背景及目的意义 3.1项目建设背景苹果是多年生木本植物，以嫁接繁殖为主。而所有果树病毒病可通过嫁接传染，病毒一经浸染，则树体终生带毒、持久危害。在当今技术条件下，尚无有效治疗病体的方法。杜绝嫁接传染，消除侵染中心，便可达到预防病毒传播的目的。因此培育采穗圃的无病毒木本树，繁育无病毒苗木，是防止苹果病毒危害的根本措施。栽培优新品种，采用矮化密植技术，以及实现无病毒化是当今世界果树生产发展的主要趋势。随着世界科学技术，特别是生物技术的发展，果树的栽培管理已力趋科学化。在很多科学和生产技术先进国家，再想通过一般性的改进果树栽培技术来发挥其
12、生产潜力已有很大难度。欧美各国都把发挥果树生产潜力的重点转向于果树的无病毒栽培。建设苹果无病毒苗木工厂化快繁基地是实现某某省农业及农村经济战略性调整的需要。进入2l世纪以来，全省农业和农村经济进入了一个新的发展阶段，农产品供给由长期短缺变为总量基本平衡，丰年有余，农业的发展由资源约束为资源与市场双重约束，农业由解决温饱的需要转向进入小康的需要，人们对农业产品的品质有了更高的要求。然而某某农业结构性矛盾仍显突出，农产品品种不够丰富，优质农产品相对不足，不能满足市场对农产品优质化和多样化需求。十五届五中全会提出调整和优化农业产业结构，一个重要环节就是全面优化农作物品种，努力提高农产品质量。根据市场
13、需求变化继续压缩不适销品种，扩大优质农产品生产。通过品种改良和新品种开发，加速农产品品种的更新换代，使全省农产品的良种普及程度和拥有量有一个明显提高。通过本项目的实施，为陇东地区乃至全省提供优良苹果无病毒苗木，促进老果园的改造，提高苹果质量，增强市场总竞争能力，对全省农业结构调整具有重要作用，符合国家产业政策。3.2项目建设的目的意义无病毒栽培是当今果树发展的趋势，也是防止果树病毒病危害的根本措施。它的推广应用，不仅可以取得早果丰产，而且可以维持长期的高产、优质、高效。其优越性表现为：第一，苗木生长健壮，二次枝抽生能力强，为提早结果、早实丰产提供了优良的生物基础。第二，树势强，稳产丰产，相同的
14、管理条件下，一般亩增产2040%，且无隔年结果现象。第三，果实大、结果多，光洁度好。一般情况下，果实超过直径70mm的果实数比带毒枝增加29.453.1%，果面光洁度提高1326%。耐贮性增强。第四，需肥量少、抗逆性强。一般需肥量减少4060%，耐粗放管理，省工省时，能够适应瘠薄地栽培。 栽培苹果无病毒苗木，一般比带毒苗木增产2040。各种品种栽培均可应用，不受栽培区条件的限制，对栽培技术也无特殊要求，在不增加生产费用情况下，将大大提高苹果产量和质量。而且由于无病毒苹果肥水需要量减少，抗逆性强，适于山坡薄地栽培，可开发荒滩地，发展苹果生产，有助于解决粮、果争地的矛盾，同时减少环境污染。因此，可
15、获得明显的经济效益和社会效益，符合生态农业和环境保护的要求，具有巨大的现实和长远意义。某某县果业工作以“质量管理年”活动为总揽，扩张总量，提升质量，培育增量，把果产业开发的重点放在提高质量和效益上，使全县的果产业在过去的基础上有了新的突破和发展。仅2004年全县新发展果树经济林2万亩、其中水果l万亩，干果林l万亩；培育出口创汇基地2万亩，其中苹果1万亩，梨l万亩：完成经济林更新改造5000亩；完成果实套袋2800万枚；高标准建设果业科技示范园区336处2.856万亩，培育出8个果园重点乡(镇)，新发展果树专业村5个，全县累计有48个村达到了整村果品产业推进的要求。到目前为止，全县果园种植面积达
16、到20.38万亩、其中挂果园面积4万亩。全县5亩以上的种植大户有4000余户，10亩以上的种植大户2000余户，收入l万元以上的农户达1300余户，收入达2万元以上的农户400余户。具体工作上主要做了下面几个方面的工作，一方面，对内以市场为导向、以效益为中心进行广泛宣传；对外以树名牌、讲信誉、打商标为目标，通过各种形式扩大影响，提高全县果品知名度。另一方面通过配方施肥、单果管理、无公害农药使用、喷施果型剂、PBO促控剂等高新技术的推广应用，确保果品质量上台阶，上档次，达到整齐、美观、可靠的质量要求。其次是通过制定某某县果品无公害生产技术和某某县果品无公害质量标准等技术规范，配合技术质量监督部门
17、加强果品质量的检查监督，规范果品生产、销售、加工等各个环节的行为，治理购销环境，提高了果品生产的技术含量，增强了果农的市场意识和商品意识。某某县果园管理还存在一些问题，主要突出表现在一是广大果农的思想认识水平和技术水平亟待进一步提高，部分地区的丰产园管理粗放，幼园和新建园重栽轻管的现象比较严重。二是服务体系尚不完善，配套措施还不健全。三是果业产业化程度还不高，产业链条不长，市场半径不大，产贮销脱节，龙头企业拉动力不强，整体效益不明显。针对这些问题，工作重点上将以市场为导向，进一步加大宣传力度，提高认识，转变观念；加强果园管理措施，着重抓好幼园和新建园的补栽和管护工作；强化技术培训，努力提高各级
18、果技人员的技术水平；健全服务体系，强化服务职能；以参办各类果品交易会为平台，全力推介全县的果品特色，提高知名度。真正把某某县果品这一名牌炒热炒大。 第四章 建设单位基本情况4.1项目实施单位本项目承担单位某某县果业技术开发服务中心成立于1999年4月，为某某县直属全额拨款事业单位，现有职工51人，其中专业技术人员44人，职员5人，技术工人2人。在专业技术人员中，高级职称1人，中级职称8人，初级职称35人。县果业技术开发服务中心科技力量雄厚，专业技术人员经过多年的生产实践，业务技术水平较高，具有较强的生产实践经验，是全县果业技术推广的骨干力量。2003年县上对果园管理实行行政和技术“双轨”承包责
19、任制，仅县果业技术开发服务中心参与的技术人员35人，建立示范点61处，建立示范园4290亩，通过技术人员抓点示范，辐射带动了全县果园管理上水平，使当年果品总产量达2.8万吨，果品收入2800万元。县果业技术开发服务中心在全县果品产业开发中，积极开展技术指导、技术咨询和技术培训工作，为全县果品产业持续发展发挥了重要作用。某某县果业技术开发服务中心为了适应西部生态环境建设和农村经济结构调整的新形势，经过广泛深入的调研论证后决定，围绕加快某某县苹果产业化开发步伐，振兴县域经济，争创农业产业化龙头企业的目标，以科技为先导，以服务三农为宗旨，在优质特色林果新技术引进、试验及示范推广、农民技术培训等方面已
20、经做了大量的准备工作，积累了组织农户建立优质林果基地，实施科学化管理等方面的经验。同时，某某县果业技术开发服务中第五章 项目总体方案设计及建设规模5.1项目建设指导思想以市场为导向，以苹果无病毒良种苗木繁育为突破口，以科技为动力，充分发挥地区资源优势，通过引进国内外著名良种苗木品种，进行系列产品的综合开发，按照推广单位+基地+农户的模式，形成一体化的产业化生产格局，探索出一条苹果无病毒良种苗木繁育发展的新路子，成为全省苹果无病毒良种苗木的供应中心和龙头企业，带动地方苹果产业经济的发展，为某某果业持续快速发展奠定良好基础。5.2项目总体方案设计项目立足于某某县及某某陇东地区苹果优势产业发展基础和
21、条件，本着做大做强苹果产业，增强苹果市场竞争力，增加农民收入，加快农民脱贫致富步伐的宗旨，通过引进现代生物工程技术，实施苹果无病毒苗木繁育基地建设，形成融苹果优质种苗快繁、生产、推广销售、技术指导和农民培训于一体的具有较强科技示范带动作用的现代种苗生产示范基地，丰富和优化苹果种苗市场供应，加速苹果品种结构和品质结构的调整，为黄土高原地区生态环境建设和可持续发展做出贡献。项目建成运营后，年可生产苹果无病毒良种苗木200万株。5.3项目建设规模5.3.1组培车间:本项目计划建设组培车间296平方米，配套苹果无病毒种苗组培生产线1条。5.3.2可控温室：本项目计划建设可控温室1496平方米。5.3.
22、3网棚：本项目计划建设网棚1056平方米。5.3.4苗圃与采穗圃：本项目通过引进苹果无病毒优质种源，计划建设采穗圃50亩，苗圃800亩，配套田间工程，其中包括机井2眼，节水灌溉工程450亩，水池10个，田间道路4500平方米，供电线路1600米等。5.3.5其它建筑：本项目计划配套建设业务用房198平方米，锅炉房101平方米，库房两座392平方米等单体工程。本项目总建筑面积为3539m2。并配套建设室外工程及绿化等。第六章 建设地点及总图布置6.1建设地点环境质量要求苹果无病毒苗木的产地应临近苹果主产区，选择在生态环境良好，远离污染源，并具有可持续生产能力的农业生产区域。具体地说，就是要选在苹
23、果的最适宜区或适宜区，并远离城镇、交通要道(如公路、铁路、机场等)无工业“三废”排放点。并选择水源干净、光照充足、地势开阔、土壤疏松、无严重病虫害，周边200m无梨树，100m无苹果园，交通便利的地段，建脱毒母本园和采穗圃或脱毒苗圃地。我国有三个地区符合新红星等苹果最适宜栽植区的气候条件。一是陇东南、渭北地区，包括某某天水、庆阳(西峰以南)、平凉市大部分县和陕西渭北的铜川、洛川、礼泉、彬县、长武等县。某某县地处某某平凉市，是苹果栽植最适宜地区。6.2项目区自然条件与社会环境现状6.2.1项目区自然条件。某某县位于某某省中部的六盘山西麓，黄土丘陵沟壑区。地理坐标为北纬35033528，东经105
24、4610623。东邻华亭县，南与张家川回族自治县、秦安县毗连，西接静宁县，北和宁夏回族自治区隆德县、泾源县接壤。东西长56.37公里，南北宽46.6公里，总面积1553.14平方公里。平均海拔1634m。属大陆性季风气候区。冬寒半年，夏炎短暂，秋早春迟，光能丰富，降水偏少。年平均气温7.9，最冷月在1月份，平均气温-5.5；最热月在7月，平均气温19.9；多年平均降水量513.7mm，最多年份753.3mm(1964年)，最少年份27l.2mm(1997年)；多年平均干旱指数1.95，多年平均风速2.3m/s，最大冻土层深63cm。多年平均日照时数2790小时。地表水主要有葫芦河、某某河、水洛
25、河、贫李沟河四条河流，均属渭河水系，县内径流全长161.06公里，流域面积938.25公里，年均径流总量2.77亿立方米，地下水主要有第四系潜水和深层地下水。据概算，贮量为年5042.51万立方米，可开采量年840.26万立方米，河谷川区与河谷地段藏量较丰，埋藏深度一般13.5米，最深不过5米。项目区地处某某县水洛镇中川村的县高科技林木种苗培育中心，交通方便，秦隆公路、泾甘公路穿越全境，县、乡公路通达各村。6.2.2项目区地形地貌与地质。项目实施区某某县地形地貌属河谷川地，属于新生代以来地壳运动比较活动的构造地区。喜马拉雅新构造运动中，隆起六盘山山脉，东北部成为基岩棵露的高山区，西南部成为低山
26、丘陵区，构成现代地貌骨架。后经线状侵蚀，切割成千沟万壑，河谷、丘陵、高山相间。东北高，西南低，群山层峦。最高峰桃木山海拔高度2857米，最低处葫芦河下游张家下湾1405米，相对高度1452米。项目区水洛镇中川村的县高科技林木种苗培育中心位于某某县县城东部，耕地土壤是在黄土母质上发育而成的黑麻土或黄麻土，呈粉状结构，属重壤土或中壤土，土质疏松，性凉口紧，蓄水保肥性好，土壤有机质含量0.919%，其含氮0.089，含磷0.17，每亩地含速效氮1.1kg，速效磷0.95kg，速效钾19.5kg，肥力较高。6.3总图布置6.3.1总图布置依据。（1）甲方提供的场区现有地形、地貌、气象、水文、地质资料。
27、（2）场区现有区域规划、供水、排水、供电等情况。（3）国家及行业有关总图布置的规定和规范。6.3.2总图布置原则。（1）组培集约化生产工厂一般要求远离主要交通路线，减少空气污染及空气微尘含量，但又要交通方便，利于产品的运出及原料的运入。（2）远离带有水及空气污染源的工厂及村庄等，苗圃区100m以内不得栽植梨树。（3）建场地址要有良好的水质水源，且供水方便，水源充足，具备便利的排水条件。（4）组培车间周围有一定数量的苗圃用地，供建立大型育苗圃地使用。（5）场区内应建立合理便捷的道路系统，排灌系统、林网系统，最好能够形成完整、合理的“生物链”，达到循环高效、合理利用的目的。6.3.3总图布置方案。
28、本项目建设场地位于某某县水洛镇中川村县高科技林木种苗培育中心，地处水洛河河床阶地上，水源充足，水质清淡，适于灌溉和人畜饮用，因此苗圃发展有可靠的水源保证。10kv输电线路遍布全县，农村电网改造基本完成，供电保证率高。场区地形呈长方形，南北长约2320m，东西平均宽230m，场地总占地面积870亩，地势基本平坦。按项目计划在场址中部建设组培车间、日光温室及附属建筑，在周边安排网棚、采穗圃、育苗圃等种植地。按生产需要及流程，场区沿南北向设纵向6m宽主干道路，沿横向设置4道6m宽道路，将场区分隔成十块生产小区及圃地。组培车间及日光温室区位于场部主干道两侧，并设置砖围墙进行隔离。该场区主干道道路宽6.
29、0m，转弯半径9.0m，采用碎石路面，沿场区外围及干道种植防风林带，场区空余地带种植牧草，形成良好的环境。总图布置详见总平面初设图。第七章 工艺技术方案7.1热处理加茎尖培养脱毒工艺流程苗木新梢生长到3050cm高温室盆栽选择品种切取茎顶部34cm做为外殖体消毒放入381的条件下，培育30天转接在分生丛生芽培养基中在超净工作台上剥取茎尖0.20.5mm将无根芽段转入生根培养茎得到完整的再生试管苗继代增殖丛生芽温室练苗移栽酶联检测田间苗圃移栽指示植物检测脱毒苗7.2试管快繁苹果脱毒苗的工艺流程苹果无病毒苗木离体培养的一般工艺流程：品种选择盆栽原种脱毒苗分生组织顶芽做外殖株外植体处理消毒剥离0.5
30、mm茎尖分化丛生芽培养茎培养基制备培养基灭菌接 种接 种继代增殖丛生芽生根培养再生植株炼苗过渡移栽温室苗床主苗圃原种脱毒苗田间苗圃7.3技术参数本项目无病毒组培苗繁育技术参数为：试管茎尖增殖系数达到56试管茎苗生根率大于70%试管苗入土移栽成活率大于70%7.4苹果苗木脱毒和检测技术苹果的病毒种类较多，依据国家技术监督局1991年发布的苹果病毒母本树和苗木检疫规程对苹果脱毒苗木必须进行检测。苹果病毒分为潜隐性病毒和非潜隐性病毒。我国规定苹果无毒苗必须脱去的潜隐性病毒是：“褪绿叶斑病毒”、“茎沟病毒”、“茎痘病毒”；非潜隐性病毒是“苹果锈果病毒”、“花叶病毒”、“绿皱病毒”。脱去病毒的检测方法主
31、要有：酶联免疫检测和指示植物检测。7.4.1酶联免疫检测。苹果病毒病脱除方法主要有热处理法、茎尖培养法、热处理结合茎尖培养法、茎尖嫁接以及应用病毒抑制剂等方法。在本项目中将采用热处理结合茎尖培养法进行苹果苗脱毒。即将待脱毒苹果品种盆栽苗置于371恒温下处理28天，取处理苗茎尖0.10.15CM的生长点进行组培，以生产无病毒试管苗木。对生产的试管苗采用酶联免疫吸附法（Elisa）进行病毒检测。酶联免疫吸附法是用两层病毒抗体夹层吸附，从树枝上剥下树皮或叶，榨出汁液，提纯病毒。将纯化病毒注入家兔制造抗血清，制取纯化的r-球蛋白，吸附于塑料吸附盘中96个小穴内(Microtiterplate)，r-蛋
32、白与抗体统合后，与碱性磷酸酶相结合，从吸附盘显色中表现病毒的存在与否。具体方法是：取各品种组培苗嫩枝0.5g，加入相当于嫩枝2倍体积的磷酸缓冲液(内含0.1%牛血清蛋白和2%PVP)，研磨后低速离心，取粗提液再稀释到10倍，每品种处理4孔。以只加磷酸缓冲液孔为对照。用DG3022型酶联免疫检测仪测样。7.4.2指示植物检测。指示植物检测利用指示植物：苏俄苹果、光辉、弗吉尼亚小苹果、金冠、国光等做为指示植物。采用“二重芽接法”砧木选用传毒的“八棱海棠”在检测芽的上方12cm处搭接带双芽的指示植物，根据指示植物的典型病毒症状表现，判断待检品种的病毒种类：7.5脱毒苗生产技术方案7.5.1组培脱毒原
33、种苗生产的关键技术。（1）从国家种质资源圃引进10个无毒苹果品种以优良红富士为主栽品种，以优良新红星系、嘎拉系为辅，脱毒授粉树比例为8:1。（2）在隔离条件下，将土壤消毒后盆栽脱毒苗，待新梢生长到3050cm时，采集13mm茎尖做为外殖体进行接种。采用甘农大创建的综合无伤消毒法：外殖体材料流水冲洗10分钟70酒精30s蒸馏水冲洗2遍0.1升汞58分钟在超净工作台上用无菌水冲泡3遍剥取茎尖转接在附加一定激素的MS基本培养基上。（3）培养条件：光照3000LX、光周期16:8或全光照、相对湿度65；（4）获得无菌外殖体材料后，筛选、研究丛生芽继代高效增殖的激素配组，提高繁殖系数。在获得大量35cm
34、丛生芽后，转入1/2大量元素的MS生根培养基进行生根培养。（5）待生根试管苗长到6cm左右时，在连栋智能温室苗床进行光培练苗，在一定时问内光强从5000LX升高到15000LX，相对湿度从95逐渐下降到70；通过光培练苗后在营养钵中进行移栽过渡。（6）用不带病毒的山荆子(Maius baccata L.Borkhausen)种子层积处理后点播在营养钵中，待无毒砧木苗生长到10cm时用脱毒试管苗的微芽嫁接。（7）嫁接苗在外界平均温度稳定在15时在隔离大田苗圃移栽。（8）将温室中部分营养钵中自根试管苗，在隔离网室中移栽获得建原原种母本园采穗圃的苗木。7.5.2一级原种无毒苗生产圃(为建无毒采穗圃提
35、供苗木)。（1）选择水源干净、光照充足、土壤蔬松、周边300m无梨树(梨苗圃和100m内无苹果园(苹果苗圃)的熟地建立原种无毒苗圃。（2）苗圃地起垅覆膜，垅宽40cm，在气温稳定在15时，在垅上打孔。每垅栽植两行在温室己微芽嫁接的营养袋苗。株行距采用宽、窄行；株距12cm，窄行距20cm，宽行距70cm，垅中心线距90cm。每亩定植11600株。（3）苗圃地的管理：在接穗生长到30cm左右时断垂直根；及时防治病虫害。（4）嫁接工具、修技刀、剪的消毒：在无毒苗圃使用前用消毒液或70%的酒精进行消毒。严格禁止在修剪普通梨、苹果树后的工具，末经消毒又修剪、嫁接脱毒苗。（5）土肥水管理：同普通育苗圃。
36、7.5.3无毒母本园建设。（1）选择水源干净、光照充足、土壤疏松、周边300m无梨树和100m内无苹果树、前三年内没有育过梨和苹果苗的耕作地，建立原种无毒母本园。（2）母本园最好采用南北行向或依地形而定(以长边为行向)，株行距为24m；每个脱毒品种一行，授粉树按1:8配置；品种比例为优质红富士系占70%、三红优系占20%、新嘎拉系占10%。（3）定植采用丰产沟栽法。（4）苗木定植后及时防治病虫害，特别注意防治叶蝉类昆虫传毒。（5）剪取接穗时严格注意工具消毒，防止接触传毒。（6）土、肥、水管理同普通果园。 7.5.4生产用脱毒苗生产。（1）选择水源干净、光照充足、土壤疏松、周边200m无梨树和1
37、00m内无苹果园的地块建立生产用无毒苗圃。（2）苗圃地最好采用宽、窄行起垅点播或平畦条播不带病毒的山荆子（Maius baccata L.Borkhausen）层积处理种子，在砧木苗离地10cm处粗度达到0.8cm左右时，用无毒母本采穗圃的芽进行嫁接。随采随用严防品种接穗混杂。苗圃地嫁接后及时绘制品种图。（3）苗圃地的管理：及时防治病虫害，每次使用前注意嫁接工具、修技刀、剪的消毒。（4）其它管理同普通育苗圃。（5）苗木出圃时严格注意品种纯度和授粉树搭配并将苗木分级、挂牌。第八章 土建工程及设备方案8.1土建工程8.1.1设计依据。（1）农业部农计函2004421号关于天津等33个园艺作物良种繁
38、育基地建设项目可行性研究报告的批复。（2）某某省某某县苹果无病毒良种苗木繁育基地建设项目可行性研究报告。（3）甲方提供的设计要求，现场地形图及工程地质勘察报告。（4）国家、建设部颁布的有关建筑、结构、抗震、给排水、采暖、通风、电气工程设计规范、规程等。8.1.2项目工程安排。本项目土建及田间工程安排详见下表：序号项目名称单位建筑面积结构类型一土建工程1组培车间m2296单层砖木结构，砖条基2可控温室m21496轻钢骨架中空PC板，连体式拱型温棚3网棚m21056砼立柱网棚4业务用房m2198单层砖混结构5锅炉房m2101单层砖混结构6库房（2栋）m2392单层夹芯板轻钢结构小计m23539二田
39、间工程1机井眼22节水灌溉亩450苗圃800亩，采穗圃50亩3水池个104田间道路m245005供电线路m1600小计65628.1.3组培车间的设计。林木组织培养，就是用无菌操作方法，培养林木的一个离体器官、组织和细胞，使其再生成无数根芽齐全、遗传性状一致的小植株，以达到快速繁殖名特优新品种的高新技术。组培车间是完成这一工作的场所。根据林木组织培养的工艺要求，组培车间土建安排的使用房间为：洗涤消毒室实验室天平室、药品库缓冲间接种室培养室。其各功能用房土建设计要求是：（1）洗涤消毒室：洗涤玻璃仪器、培养瓶及用具的地方，内设洗涤槽。并设置消毒灭菌设备，进行培养基、衣物、用具等的高压灭菌工作。（2
40、）实验室：配制及分装培养基的地方，内设洗涤盆、电冰箱、培养基煮锅、大型白磁砖工作桌、存放配置好母液及玻璃仪器的橱柜、离子交换纯水器及蒸锅水器、培养瓶等。（3）天平室：设置水平的瓷砖面工作台，放置天平。（4）药品库：存放配制培养基及清洁消毒用药的库房。（5）接种间：也称无菌操作间，内设超静工作台及相应设备。要求干爽安静、清洁明亮，设置紫外灭菌灯，使室内保持良好的无菌状态。（6）培养室：是储存瓶子苗的地方，组培苗在培养室中生长、分化根直到移至苗圃。内设培养架及各种仪器设备。组培车间工程为单层砖木结构，建筑面积296m2，层高3.3m，外设全封闭玻璃缓冲走廊，地面采用水磨石地面，各用房作1.8高白磁
41、砖墙裙，内设白瓷砖贴面洗涤盆及工作台面，房内作硬塑料板吊顶。采用木门及铝合金密闭窗。基础采用砖条形基础。8.1.4可控温室的设计。林木工厂化育苗的基本物质技术条件之一，是生产环节中必须具备日光温室，它能够充分利用自然光热资源，打破自然季节与气候条件的约束，消除外界环境影响而进行高度集约化生产，是林木育苗工程的主体结构。（1）育苗日光温棚平面设计。为了充分满足苗木的集约化生产和便于在棚内设置遮荫、保温、喷灌等设备，以及便于人工管理和机械运输作业，温棚应有充分的空间与面积，根据工艺要求，本项目采用连跨式拱型PC板温棚，单跨跨度8.0m，共5跨，长度40.0m，节距4.0m共9间，宽度36.0m，肩
42、高3.5m，顶高5.5m，总外围尺寸40.0m36.0m，建筑面积1496m2。（2）大棚覆盖材料的选择。本项目大棚外覆材料采用8mm厚中空PC板，具有强度高、透光率、弹性、自重轻、透明、温度适应范围宽等特点，其可见光透光率可达89%，是国内大棚普通采用的一种新型材料，其使用年限可达15年以上（3）钢结构选型。本工程立柱采用90502矩形管，桁架上下弦采用50302矩形，主拱杆采用50502矩形钢管，副拱杆采用303015方钢管，所有金属材料均采用热镀锌防腐措施，天沟采用厚度为2mm热镀锌板折压成形，铝合金屋脊。（4）温室基础：温室四周为砖条形基础，大棚钢柱基础采用C20砼独立基础，基础底板尺寸800800mm，埋深1000mm，基础短柱250250 mm，高出地面150 mm，为保证大棚的整体性，在室外地坪下设一道240400mmC20砼拉梁，与小短柱浇注成整体。（5）主体结构设计参数：棚宽B：8m5（跨）=40.0m，外围棚宽40.3m。棚长L：4m9（间）=36.0m，外围棚长36.3m。肩高h：3.5m。顶高h：5.5m。抗风荷载W0：0.3KN/m2。抗雪荷载S0：0.2KN/m2。安装检修荷载：0.