11-04-08:细胞电泳-精选文档.ppt

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1、,实验原理 在电场作用下,液体介质中的质点与介质间的相对运动称为电泳。细胞表面具有一定的电荷(通常为负电),将细胞制备成悬浮液,使其单个游离的细胞分散于等浸的介质中,在外加电场作用下,细胞在电泳室内发生运动,这种现象称为细胞电泳。,实验目的 初步掌握细胞电泳的原理和观察方法 细胞表面电荷 电泳速度,电位,细胞生理状态,细胞表面电荷是影响红细胞和血管内皮细胞粘附的极为重要的因素。正常情况下,因红细胞膜表面带负电菏,使红细胞间相互排斥,彼此分散悬浮于血浆中;病理情况下,血浆性质发生改变,如球蛋白、纤维蛋白原增加,白蛋白减少等,可致红细胞表面负电荷减少,红细胞相互聚集而沉降加速。 已知红细胞表面所带

2、负电荷主要是由细胞表面的搪蛋白或糖脂上面的N一乙酰神经氨酸决定的(唾液酸的一种) 。,实验用品 一、器材:1、显微细胞电泳系统 2、吸水纸 3、2 ml注射器 二、材料:蛙血红细胞 1%蛙全血用85%NaCl-肝素钠(4-5IU/ml)湿润的注射器从蛙心脏抽取蛙血,用85%NaCl-肝素钠(4-5IU/ml)溶液稀释蛙血,即作为细胞介质,主机 极向转换开关 电泳槽 显微镜(摄像头),显微细胞电泳系统,显微观察电泳槽,玻璃小室,显微观察电泳槽固定架,观察窗 (易碎),安放玻璃小室,加样,电泳,电泳结束,取出玻璃小室,实验方法与步骤 一)样品准备和仪器开启 二)固定玻璃小室和加样 三)观察电泳,二)固定玻璃小室,1、取出电泳槽中的玻璃小室,注意保护观察窗。 2、先将玻璃小室的一端对准电泳槽架一侧的胶块中间,用适当的力推压,将另一端的4/5留在胶块里,1/5露出在外。 3、用注射器针头吸取样品插入玻璃小室的内部加样。,三)观察电泳,1、把显微观察电泳槽平放于显微镜的载物台,观察窗对准镜头中心。 2、调节镜头的位置,找到细胞。 3、用鼠标控制电的连接,观察细胞的运动。,

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