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1、外周血细胞形态检验,赣州市妇幼保健院 丁克文, 外周血细胞检验程序 涂片、染色与镜检；外周血细胞形态检验报告方式 外周血红细胞异常形态检验 大小、形态、染色与结构异常；点彩红细胞 外周血白细胞异常形态检验 中性粒细胞异常变化；异常淋巴细胞 血小板形态与寄生虫检验 血小板大小、形态、数量变化；寄生虫,讲 授 内 容,外周血细胞检验程序,血涂片的制备, 器材 清洁、干燥、无尘、无油脂的载玻片。 操作 在玻片近一端1/3处，加一滴血液，握住另一张边缘光滑的推片，以3045角使血滴沿推片迅速散开，快速、平稳地推动推片至载玻片的另一端。, 注意事项 血膜呈舌状，头、体、尾分明 空气中晃动，尽快干燥；37
2、恒温箱中促干 涂片的厚薄、长度与血滴大小（1020l）与血片质量 1h内染色或在1h内甲醇固定 正确清洁玻片 抗凝血或毛细血管血涂片；EDTA能阻止PLT聚集 抗凝血液4h内涂片,血涂片染色, 原理 瑞氏（Wright）染色法（经典染色法） 瑞氏染色法使细胞着色既有化学亲和反应，又有物理 吸附作用。 试剂 瑞氏染液 瑞氏染料 0.1 g 甲醇 （AR） 60ml,pH6.8磷酸盐缓冲液（pH6.46.8） 磷酸二氢钾（KH2PO4） 0.3g 磷酸氢二钠（Na2HPO4） 0.2g 加少量蒸馏水溶解，再加至1000ml。, 操作 加瑞氏染液数滴，固定血膜约1min。 滴加约等量的缓冲液与染液混
3、合， 室温下染色510min。 用流水冲去染液,待干燥后镜检。, 注意事项 PH对细胞染色有影响。 未干透的血膜不能染色。 染色时间与染液浓度、染色时温度成反比。 不能先倒掉染液，用流水冲去。 血膜上有染料颗粒沉积，可加少许甲醇。,先在低倍镜下浏览全片，了解染色好坏和 细胞分布情况，观察有无异常细胞。 选择涂片体尾交界处染色良好的区域，在 油镜下计数100个白细胞，按其形态特征 进行分类计数。求出各类细胞所占百分数。,血 涂 片 镜 检, 注意事项 分类时应从血膜体尾交界处边缘向中央依次上下呈城垛状迂回移动，计数使不能重复和遗漏。 白细胞数明显减少的血片，应检查多张血片。 分类见有核红细胞，不
4、计入100个白细胞内，以分类100个白细胞过程中见到多少有核红细胞报告，并注明所属阶段。,除慢淋外，破碎细胞或不能识别细胞不超过白细胞总数的2%。若破碎细胞仍能明确鉴别，如破碎的嗜酸性粒细胞，应包括在分类计数中。在结果报告中应对破碎细胞或不能识别细胞作适当描述。 分类中应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及分布情况，注意有无寄生虫和其他异常所见。 白细胞形态变化较大，遇有疑问应请示上级主管或主任进行核实，以减少错误。,异常红细胞形态检查,大小异常,正常红细胞大小较为一致，直径69um 在各种贫血时，红细胞可出现大、小不 一。直径10um为大红细胞，15um为 巨红细胞，常见于巨幼贫、肝脏疾
5、病等， 直径6um为小红细胞，多见于缺铁性贫 血等。 直径相差1倍以上为大小不均 右图：大红细胞（上） 小红细胞（下） (中央苍白区扩大）,形 态 异 常,RBC直径通常2.6 um，呈小圆形，细胞中心区蛋白含量较正常多。见于遗传性球形红细胞增多症（25%以上）、自身免疫性溶贫和异常Hb病（HBS、HBC病等）。,球形红细胞,红细胞呈椭圆形，横短，长大，有时呈畸形。正常人可见到， 15%。 见于以下疾病: 1、遗传性椭圆性RBC增多症，高 于 2550%才有诊断价值。 2、大细胞性贫血时可达25%。 3、其他各类贫血有不同程度的 增多。,椭圆形红细胞,比正常红细胞扁薄，中心有少许血红蛋白，部分
6、可与周围的血红蛋白连接，边缘部染色较中央深，故呈靶状。主要见于以下疾病: 1、珠蛋白生成障碍性贫血 2、严重缺铁性贫血 3、一些血红蛋白病（血红蛋白C、D、E、S病） 4、肝病、脾切除后及阻塞性黄疸等。,靶形红细胞,细胞狭长似镰刀，也可呈麦粒状或冬青叶样，主要见于遗传性镰形红细胞增多症,镰形红细胞,红细胞淡染区呈裂口状狭孔，正常4%。增多见于以下疾病 : 1、口形红细胞增多症 2、急性乙醇中毒,口形红细胞,棘形红细胞是一种带刺状的红细胞，刺呈针刺状或尖刺状，见于以下疾病： 1、棘细胞增多症：遗传性血浆脂蛋白缺乏症时，棘形红细胞可高达70%80% 2、 严重肝病或制片不当,棘形红细胞,锯齿细胞也
7、称短棘形细胞。细胞突出较棘细胞短，但分布均匀。主要见于尿毒症、微血管病性溶血性贫血、丙铜酸激酶缺乏症、阵发性睡眠性血红蛋白尿症等。,锯齿细胞,裂红细胞指红细胞碎片，包括盔形红细胞等，多见于DIC和心源性溶血性贫血等。其他也多见于化学中毒、肾功能不全、血栓性血小板减少性紫癜等。,裂红细胞,红细胞中心淡染区扩大，多见于缺铁性贫血、地中海贫血及其他血红蛋白病,着色过浅,染 色 异 常,中心淡染区不见，着色较深，多见于溶血性贫血及大细胞性贫血,着色过深,红细胞经瑞氏染色染成灰蓝色、灰红色、淡灰色，包体较正常红细胞稍大，这是一种尚未完全成熟的网织红细胞，多染性物质是核糖体，随着细胞的成熟而逐渐消失，主要
8、见于各种增生性贫血,嗜多色性红细胞,结 构 异 常,用亚甲蓝染色，成熟红细胞内有散在的深蓝色嗜碱性颗粒，外周血中点彩红细胞增多，表示贫血时骨髓再生旺盛或有紊乱现象，某些重金属中毒时可大量出现,嗜碱性点彩红细胞,成熟红细胞内有染成紫红色的细线状环，呈圆形或 8 字形，可能是残留核膜 所致，见于恶性贫血、溶血性贫血、铅中毒等。,卡波环,成熟红细胞中含有紫红色圆形小体，大小不等（12m），数量不一，可能是残留的核染色质微粒。见于增生性贫血、脾切除后、巨幼红细胞性贫血、恶性贫血等。（注意与血小板区别）,豪乔氏小体（染色质小体）,有核红细胞,正常成人血片中不会出现，新生儿出生1周内可能有少量有核红细胞出
9、现。溶贫、急、慢性白血病、红白血病、髓外造血及严重缺氧等常见有核红细胞（主要是晚幼红）。 右图：中幼红（上） 晚幼红（下）,异常白细胞形态检验,中性粒细胞的异常变化,核象变化 包括核左移和核右移，反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约为1:13。,核左移,外周血液中出现不分叶粒细胞（指杆状核粒细胞，正常：15%、幼稚粒细胞，正常：不出现） 5%。常见于感染（特别是急性化脓性感染）、急性中毒、急性失血及急性溶血等。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为极度左移，多见于类白血病反应或白血病。,具体表现为： 伴白细胞总数增高的核左移称再生性移，常见于急 性化脓性感
10、染，如大叶性肺炎等。 白细胞总数不增加或减低的核左移称退行性左移， 常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、感 染中毒性休克的败血症等。,中性粒细胞核出现4、5叶（正常时多为3叶，占5070%）或更多，其百分数 3%。这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，提示预后不良。,核右移,毒性变化,严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等，中性粒细胞可出现形态变化。具体表现为： 细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。 中毒颗粒：细胞质中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小等，可能为中性
11、颗粒成熟过程中发生变性所致,可在细胞质或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。,空 泡,细胞质内出现嗜碱性多呈斑块、梨形或云雾状，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现,杜勒小体,胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重的放射损伤等有关。,核棘突,退行性变,表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行性变是细胞衰老死亡的表现。,淋巴细胞的异常变化,异形淋巴细胞：细胞大小为1025l，形态各异，呈圆形，卵圆形或不规则形。细胞核形各异，呈圆形、卵圆形、凹陷形、折叠形、裂隙形或分叶形，核染色质可为细致、中度致密或粗颗粒；副染色质无或少量，核仁无或偶见，大小和染色性各异。细胞质中等至大量；染灰色、淡蓝色或深蓝色；可见细胞边缘染色深，核周淡染；浆细胞样淋巴细胞常有核周淡染区和核窝；有时可见细小嗜天青颗粒；偶见空泡。,异形淋巴细胞可见于各种病毒感染，如传染性单核细胞增多症时最为常见。此外，可见于疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等。 按形态学特征分为型： I型：空泡型或浆细胞型 II型：不规则型或单核细胞型 III型：幼稚型,欢迎批评指正 谢 谢！,