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1、现代生物学实验,实验一、TEM样品包埋块的制备,实验步骤 切取1mm3左右大小的组织块，立即放入PBS（pH7.2)配制的2.5%戊二醛中固定1小时。 用0.1molPBS缓冲液冲洗三次每次510分钟。 1锇酸固定1小时，然后用缓冲液冲洗三次每次510分钟。 丙酮脱水：3050708090100100 每级510分钟 浸透：脱水剂：包埋剂=3：1 1小时 脱水剂：包埋剂=1：3 过 夜,包埋,聚合：45 oC 12h 60 oC 24h,磷酸缓冲液（Phosphate Buffer Saline, PBS） 0.2molL-1 PBS 配制 A液：Na2HPO4 .2H2O 35.61g 加D
2、DW 至 1000ml B液：NaH2PO4 .H2O 27.6g 加DDW 至 1000ml,不同pH磷酸缓冲液的配制 pH 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 A液 18.8 24.5 30.5 36.0 40.5 43.5 (ml) B液 31.2 25.5 19.5 14.0 9.5 6.5 (ml),Epon812包埋液的配制 Epon812树脂 20ml DDSA 4.6ml MNA 15.3ml DMP-30 0.8ml,实验二、支持膜与胶体金的制备,胶体金的制备,柠檬酸三钠法 0.01%氯金酸（HAuCl4)水溶液100ml加热至沸腾，加1.5ml 1%柠檬酸三钠水溶液，出现橙红色。 金颗粒大小与柠檬酸三钠的关系 柠檬酸三钠（ml) 4 1.5 1.0 0.75 金颗粒的直径（nm) 15 30 50 60,胶体金与标记蛋白的配比,胶体金pH的调节：用0.1mol K2CO3调到pH9.0 取7支2ml离心管分别加入1ml胶体金 再向每支管中加入1ml不同浓度的牛血清白蛋白 混合均匀后分别加入0.1ml10%NaCl 混合均匀后按照下图观察颜色的变化 确定出包裹胶体金蛋白的量,胶体金与标记蛋白的比例 40 35 30 25 20 15 10 蛋白含量mg,试验三、TEM、SEM观察,实验四、超速离心、紫外分光光度仪演示,试验五、气相、液相色谱演示,