细胞融合技术用.ppt

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1、学案优秀小组: 3组 6组 学案优秀个人: 杜洋洋 柴会祥 郭玉良 李浦 李光上 彭丽莹 卢庆蕊 牛余洋 张彤 张琦 赵昊 于海洋 孙贺 刘福港 李天笑,从同学们的学案批阅情况看出,存在以下问题: (1)书写潦草,字迹模糊不清 (2)专业术语的运用不恰当 (3)存在错别字 (4)试剂名称记忆错误,细胞融合技术,【教 学 目 标】,知识与技能目标: 1.掌握细胞融合的过程和方法 2.单克隆抗体的制备过程 3.植物体细胞杂交过程 能力目标:培养学生归纳、综合的能力; 情感态度价值观目标: 培养学生科学的世界观、价值观和严谨的科学态度。,1.细胞融合的概念,原理,细胞融合技术概念? 2.总结诱导细胞

2、融合的方法? 3.把AB两种细胞诱导融合,思考可以产生哪几种两细胞融合的产物? 4.图解单克隆抗体产生过程? 5.杂交瘤细胞具有什么特点?经过几次筛选得到杂交瘤细胞,每次筛选的目的是什么? 6.单克隆抗体的特点,意义? 7.简述植物体细胞杂交过程,原理? 8.植物体细胞杂交意义?植物和动物细胞融合的诱导方法有何不同?,小组合作讨论(10min),讨论要求:1、全员参与,热烈讨论。 2、首先同层同学之间讨论,然后跨层同组讨论。 3、组长宏观调控,把握好讨论的方向、合理安排时间,展示要求: 1、展示同学在相应区域书写迅速、工整。 2、点评同学纠正错误,强调重难点,条理清晰, 表达连贯,我展示我精彩

3、,单克隆抗体制备过程,课堂小结,下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案,制备单克隆抗体,B细胞,抗体,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞,分泌抗体,无限增殖,原代,传代,50,反馈练习,2下列不是细胞融合常用方法的是( ) A细胞培养 B灭活的仙台病毒诱导 C电刺激 D聚乙二醇作为诱导剂,A,3动物细胞融合的目的中,最重要的是() A克服远缘杂交不亲和的障碍 B制备单克隆抗体 C培育新物种 D生产杂交细胞,B,4. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞, 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细

4、胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D,C,5科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A经过免疫的B淋巴细胞 B不经过免疫的T淋巴细胞 C经过免疫的T淋巴细胞 D不经过免疫的B淋巴细胞,A,6用动物细胞工程获得单克隆抗体,下列实验步骤错误的是( ) A将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞 B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C用聚乙二醇作诱导剂,使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体,

5、B,7单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是 ( ) A特异性强、灵敏度高 B与抗癌药物结合可制成“生物导弹” C体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体 D由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌,C,学科组长总结学习该节课的收获 和各小组的表现情况,天道酬勤,1.概念:,2.结果:,3.原理:,4.诱导方式,指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,形成单核的杂交细胞,细胞膜的流动性,物理法:离心、振动、电激(动植),化学法:聚乙二醇(PEG)(动植),生物法:灭活的病毒(动物),5.过程:,动物细胞A 动物细胞B,诱导

6、,融合,1个完整的杂交细胞AB,注意:动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起,让它们随机融合后,再从中筛选杂交细胞,6.意义: 突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。,7. 应用: 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体,常规抗体的缺陷,动物体内,刺激,浆细胞,抗体,抗原不纯,抗体不纯,筛选单一浆细胞,特异性差、纯度低;,产量低、反应不够灵敏,不能增殖产生大量抗体,抗原,2. 怎样才能获得单克隆抗体?,设计方案: 一个B淋巴细胞 只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞 能无限增殖,杂交细胞,如何大量生产单克隆抗体?,利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞,如何筛选?,融合方式?,单克隆抗体制备过程,细胞融合、筛选,足够数量的、能产生特定抗体的细胞群,单克隆抗体,2、植物体细胞杂交过程示意图:,

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