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1、2019/2/27,1,实训三 细菌染色法,2019/2/27,2,1.细菌染色法,革兰染色法,复染色法,单染色法,负染色：,正染色,死菌,活菌：,抗酸染色法,芽孢染色法,姬姆萨染色法,荚膜染色法,用美蓝或TTC等作活菌染色,2019/2/27,3,常用染料,碱性染料：带正电荷，如美蓝、结 晶紫、碱性复红等 酸性染料：带负电荷，如伊红、酸 性复红或刚果红等酸性染料染色 中性染料：又称复合染料，如伊红 美兰、伊红天青等,2.染色原理：小、色差 染色法：简单、革兰染色,2019/2/27,4,3.染色方法 （1）单染色法： 菌种枯草芽孢杆菌（观察芽孢） （2）革兰染色法： 菌种金黄色葡萄球菌或大肠
2、埃希菌（观察革兰染色性）,2019/2/27,5,涂片,干燥,固定,（1）单染色步骤：枯草芽孢杆菌,无菌操作 两环菌液 直径约1cm,晾干 烘干 等全干,过外焰3次 目的,不烫 染液不干,全干再看 用油镜,2019/2/27,6,（2）经典染色法 革兰染色法,由丹麦医生革兰于 1884年创立。,2019/2/27,7,结晶紫 1min,革兰染色步骤:金黄色葡萄球菌或大肠埃希菌,2019/2/27,8,革兰染色原理： 壁结构、成分差异。（主） G菌壁厚、密,脂类少,乙醇不易渗入脱色 G菌壁薄、疏,脂类多,乙醇易渗入脱色 等电点不同。 G菌的低，结合阳性染料多 G菌的高，结合阳性染料少 细胞内核糖核酸镁盐含量不同。 G菌的多，染料结合牢固，难脱色 G菌的少，易脱色,2019/2/27,9,革兰染色意义:鉴别；致病性；药物选择,2019/2/27,10,革兰染色影响因素：,菌 龄培养18-24小时的幼龄菌 涂片厚度宜薄不宜厚 各试剂作用时间 脱色时间关键步骤，一般30秒 过长 假阴性 过短 假阳性,2019/2/27,11,4.实训结果:2片/人,单染色30分;革兰染色50分,评分标准： 染色结果是否正确 找到目标 是否最佳目标 目标是否清晰 光线是否适宜,2019/2/27,12,5.思考题：1和2 6.实训总结：（实训结束后完成） 分析实训过程的收获、存在的问题和 解决的方法,