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1、 高三生物组 教学重点、难点： 教学目标: 直击考纲： 细胞融合和单克隆抗体（A） 1、简述动物细胞融合的方法和过程 2、简述单克隆抗体的制备过程及其应用 3、关注细胞工程研究的发展和应用前景 1、简述动物细胞融合的方法和过程 2、简述单克隆抗体的制备过程 思考 1、什么叫动物细胞融合？植物体杂交技术 与动物细胞融合有什么不同呢？ 2、动物细胞在结构上有何区别？这与它们 杂交或融合过程有什么影响？ 3、动物细胞融合与植物原生质体融合的基 本原理是否相同？两者的融合过程是否也 一样？ 一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动。 两个细胞正在融合 受精作用 1、概念： 两个或多个动物细胞结合形成
2、一个细 胞的过程，融合后形成的具有两个或多个 细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞 。 2、原理 ：细胞膜的流动性 3、方法 ：物理法：离心、振动、电激 化学法：PEG（聚乙二醇） 生物法：灭活的病毒 为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭 活？不灭活行吗？活？不灭活行吗？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白 质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打 开，细胞发生融合，不灭活的话会感染 细胞，而不能诱导细胞融合。 思考 4 4 、 动动 物物 细细 胞胞 融融 合合 的的 过过 程程 5、意义 ： （1）使远缘杂交成为可能。 （2）是研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤、 和
3、生物新品种培育的重要手段。 (2)为单克隆抗体开辟了新途径。 6 6、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合 细胞融合原理细胞膜的流动性细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导 原生质体融合 使细胞分散后诱 导细胞融合 诱导方法物理（离心、振荡 、电刺激） 化学（聚乙二醇） 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 用途获得杂种植株制备单克隆抗体 二、单克隆抗体二、单克隆抗体 （一）、抗体 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原 发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。B淋巴细 胞产生抗体。 B淋巴细胞与抗体的关系： 、
4、B淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。 、动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗 体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用 。 、每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。 传统生产抗体的方法缺陷是产量低、纯度 低、特异性差。 小结 （二）、单克隆抗体（二）、单克隆抗体 1、概念 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆 ），形成基因型相同的细胞群，这一细胞 群所产生的化学性质单一、特异性强的抗 体称为单克隆抗体。 2、特点： 特异性强、灵敏度高 3 3、如何大量生产单克隆抗体？、如何大量生产单克隆抗体？ （1）利用淋巴细胞产生抗体的功能 （2）利用肿瘤细胞无限增殖的特性 （3）利用细胞融合的技术将两种
5、细胞融合 获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂 交瘤细胞 （4）利用动物细胞培养技术大量培养杂交 瘤细胞 4、过程： 注射抗原 B淋巴细胞骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生 特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 思考： (1)、本过程利用了哪些原理？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理 (2)、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的 遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而 且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单 克隆抗体 5、应用： (1)、临床诊断 (2)、作为载体，运载抗
6、癌药物，形成“生物导弹” 治疗肿瘤 资料：目前世界各国已经研制出数以百计的单克 隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾 病、血液病、内分泌疾病和遗传病，用单克隆抗体作 为诊断手段，是一个必然趋势。另外，用单克隆抗体 做体内诊断，借以鉴别和定位体内“病灶”也引起人们 的注意，目前，主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断 。 小结 两个过程 动物细胞培养过程 单克隆抗体制备过程 三个“一” 一个诱导细胞融合的新方法灭活 病毒 一个新细胞杂交瘤细胞 一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤 风杆菌的实验方案 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？
7、 4、图中B为_过程，常用 _作为诱导剂，该细胞继 承_的遗传特性，既能 _,又能_。 1、该实验方案的目的是_ 3、A是从小鼠的脾脏中取得 _,该细胞能够产生_ 5、C过程指细胞培养，该过程包括 _培养和_培养两个阶段，其 中_代以内的的细胞属于细胞株 。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体无限增殖 原代传代 50 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 1.动物细胞工程技术的基础是：（ ） A动物细胞融合 B胚胎移植 C动物细胞培养 D核移植 在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正 确的是（ ） A结果是相同的
8、 B杂种细胞的形成过程基本相同 C操作过程中酶的作用相同 D诱导融合的手段相同 . 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞， 在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D C ； https:/ ； uyd68vau 他的这一番话后却断然摇头，轻轻地说：“我知道，老大哥你是好意，可我，这辈子里不会再青丫头她爹，永远也走不出我的心里了”乔氏说不 下去了，拿出手绢擦拭着不断涌流出来的泪水。船老大一时语塞，不知道如何继续往下说了。停一停，乔氏又说：“
9、不错，耿大哥实在是一个少 见的好男人，可我和他，只能永远做兄妹了。你说得对，我和小青她爹是希望耿大哥的大儿子能够做我们的女婿的。所以啊，我倒是希望，老大 哥你找个合适的机会，给这两个娃娃撮合撮合吧。如果这事情真成了的话，那我和耿大哥就是儿女亲家了。这件事情，是我最挂心的”看乔氏已 经把话说到这个份儿上，船老大也不好再开导劝说她什么了。但犹豫一下，他还是轻轻地对乔氏说：“为两个娃娃撮合婚事的事情，你大可不必 为难，包在我身上了。不过啊，我还是很担心”乔氏着急地问：“你担心什么啊？”“白兄弟如今不在了，耿兄弟如果不愿意被人瓜田李下 的说闲话，非要搬出去住，或者离开武昌镇呢？果真那样的话，这事情就有
10、些不太好办了。”乔氏赶快说：“不会的，还有娃娃们呢。再者说了 ，身正不怕影子歪，没事儿的。”船老大只好说：“那好吧。如果你想让我什么时候给娃娃们撮合婚事了，请随时告诉我！”乔氏点点头， 感激地说：“我一定会的！”这时候，就听到小青大声喊：“姆妈，老大伯伯，你们也来呀！”乔氏和船老大远远望去，耿老爹正被小儿子拉着 满江边追着看鱼群呢！更远的地方，小青、耿正和耿英正在向他们招手。乔氏对船老大说：“咱们也去他们那边吧。像耿大哥说的，不要扫了他 们的兴！”于是，乔氏和船老大也轻快地往他们那边走去了。看看日头正午了，船老大招呼大家说：“走喽，吃饭去！吃完饭再接着玩儿。下午 ，咱们坐小船儿到下游不远处的静
11、水弯钓鱼去！”112第三十回 耿老爹一诺千金完新屋|（船老大亲送抚恤金，照顾遗亲兄弟情；重返汉口探消息 ，一诺千金完新屋。）蔬菜水果的贩卖生意还好。在进入腊月之前，耿家父子们又赚了一些辛苦钱。这期间，耿老爹估摸着新屋的房顶、后墙和 隔间墙已经干得差不多了，还停了几天蔬菜水果的贩卖生意，带领耿正兄妹三人和小青，将五间新屋的第一次屋内大胶泥也做好了。乔氏的情绪 慢慢好转了，还专门做了两次红烧武昌鱼犒劳他们。“七七”是最后做的一个“七”，也称作“尽七”。古人认为，做完“尽七”以后，逝者就 投胎转世去了；所以，还活在世上的亲人们就不应该太多地想念他们了。当然，以后还会做“百日”祭和“周年”祭，但相对来讲，亲人们悲伤 情绪会随着时间的推移越来越少，心情自然也就越来越轻松了。白百大逝去七七四十九天那一日早饭后，船老大照例又早早派马车来