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1、猪瘟疫苗研究进展和防控,猪瘟疫苗的研究进展,OIE标准疫苗研究 目前，尚无适用的预防猪瘟的灭活疫苗，OIE推荐使用活毒疫苗和标记疫苗 。 各国使用较广的活毒疫苗有：中国的兔化弱毒疫苗株，又称中国株或C株、日本的细胞弱毒疫苗株GPE及法国Thiverval株。,猪瘟标记疫苗 目前已有两种标记疫苗获得了欧盟的注册。这两种疫苗均以猪瘟病毒的E2糖蛋白作免疫原。E2亚单位抗原可由经基因修饰的杆状病毒感染昆虫细胞后来生产，这种杆状病毒应整合有猪瘟病毒的E2基因。因而这种疫苗不含任何猪瘟病毒，同时杆状病毒已被灭活。 我国现在也正在进行猪瘟标准疫苗的研究。这是我国“十一五”计划的一个项目部分。这对于我国消灭
2、猪瘟起着重要的作用。,我国基因疫苗的研究 重点在缺失标记疫苗的研究,缺失标记疫苗研究的重要意义：,意义主要在以下3个方面：近年来猪瘟流行和发病特点在世界范围内发生了很大变化,呈现周期性、波浪形的地区性散发流行的温和性猪瘟,其特点是:无名高热、症状不典型,持续性感染,出生仔猪先天性震颤和母猪繁殖障碍。用传统疫苗免疫常常造成免疫失败,甚至免疫次数增加和免疫剂量加大到600个兔体反应(我国规定是150个兔体反应)也不能预防其感染,且有蔓延之势。在妊娠早期接种疫苗常可通过胎盘感染胎儿,造成死胎或弱仔并成为持续性带毒者,造成新疫源。因此,必须研制安全有效的新型疫苗来加强猪瘟的免疫防制。,弱毒疫苗已延用了
3、近40年,在长期的免疫压力下,猪瘟流行毒株已向远离疫苗毒的方向演化,这种流行毒株的变化趋势国内外情况基本一致。所以研制针对当前流行毒株的新型疫苗迫在眉睫。注射普通弱毒疫苗已影响到国际贸易问题,因为在美国等发达国家已消灭了猪瘟,而欧盟国家也停止了弱毒疫苗免疫,他们采取扑杀的办法净化疫区。19961998年,荷兰等8个国家发生猪瘟,扑杀2000余万头猪,造成了巨大的经济损失。由于担心在普通免疫的“保护伞”下隐藏有猪瘟野毒,所以,美国、加拿大、欧盟等发达国家,严密注视其他国家的疫情,不从任何有猪瘟和注射猪瘟弱毒疫苗的国家进口猪类制品,主要原因是因为不能用血清学方法鉴别诊断猪群是感染了野毒还是注射了疫
4、苗。中国已加入WTO,对外贸易迅速发展,不允许影响国际贸易的问题继续存在。因此,研究能鉴别是野毒感染还是疫苗免疫的标记疫苗已势在必行。,A基因工程亚单位标记疫苗,利用基因工程的方法克隆得到编码病毒保护性抗原的基因, 在体外对其进行改造或修饰,并重新转移到异源生物宿主 体内或培养细胞中,使病毒蛋白获得大量表达。利用真核 细胞高效表达系统来表达猪瘟病毒免疫原蛋白,并以此表 达产物为抗原可获得基因工程亚单位疫苗 优点： 1目前所建立的诊断方法多是以猪瘟病毒E0基因表 达蛋白为抗原，E2囊膜糖蛋白的亚单位标记疫苗 接种猪不会产生针对E0的抗体，而自然感染猪则 产生针对E0的抗体，从而达到区别诊断的目的
5、。 2由于该疫苗生产技术具有安全、稳定、可规模化等优点, 同时又根据流行毒的变化,更换合适的E2基因,因此,具有广 阔的应用前景。,B猪瘟C株突变株标记疫苗,构建猪瘟兔化弱毒株的感染性克隆，在DNA水平上缺失某些与病毒复制无关的毒力或毒力相关基因后,其毒力丧失或明显减弱,但病毒复制能力并不丧失,同时保持着良好的免疫原性。因此,通过基因工程技术，致使病毒基因组中负责毒力的基因缺失,可以获得基因缺失型弱毒疫苗株。 优点：1：采用缺失的方法可能会制造出免疫原性好,且在安全性上更有保证的弱毒疫苗株,也可以改造现行的免疫原性还不能令人满意的弱毒株以增强其安全性。2：对猪瘟兔化弱毒进行改造，使其缺失或替换
6、某一段基因，而其免疫原性不改变，缺失或替换的基因所表达的蛋白则可作为诊断抗原，从而达到疫苗接种猪和自然感染猪相区别。,猪瘟基因工程活载体疫苗研究,某些病毒基因组的某一核苷酸序列,将其切除、突变或在该区域内插入外源性基因片段后,均不影响病毒的复制,是病毒的复制非必需区。利用基因工程的方法可以将该复制非必需区克隆出来,体外改造后再将异源性病毒的保护性抗原基因及启动子调控序列等插入其中,通过体内同源重组技术获得重组病毒,利用该重组病毒接种动物,不仅可以诱导机体产生针对异源性病毒的特异性免疫反应,而且在采用宿主特异性载体病毒时,能够使宿主获得针对与载体病毒相应毒株的免疫力。如果在载体病毒中同时插入多个
7、异源性病毒的保护性抗原基因还可以达到一针防多病的目的。目前用于表达猪瘟外源性病毒蛋白的载体包括痘病毒、伪狂犬病病毒、腺病毒、乳多空病毒、口疮病毒、疱疹病毒和小RNA病毒等。 多将猪瘟病毒的E1，E2基因插入到载体病毒上获得活载体重组疫苗。 但是,目前对此类疫苗的安全性和实用价值目前还有争议,因为人类至今还不了解病毒的自然发生及变异机制,也就无法控制这类“人造”病毒和未来走向,一旦将该病毒放入自然界中,将可能衍变出对人、兽有危害的病毒变种。,猪瘟DNA疫苗,用猪瘟病毒E2蛋白基因的构建的DNA疫苗直接免疫动物，是近年来猪瘟病毒免疫研究的热点领域，DNA疫苗可以诱导体液免疫，又可诱导细胞免疫。DN
8、A疫苗免疫猪后能保护强毒攻击。但是现在在核酸疫苗的效力检验中存在争议并不能产生有效的保护力，这与其在体内表达量有一定的关系。,其他研究,猪瘟疫苗保护剂和佐剂的研究,猪瘟防控,猪瘟呈世界性分布，虽然一些发达国家已陆续控制以至消灭了猪瘟，但在发展中国家，此病仍然是危害养猪业发展的重要疾病之一。据中国兽医药品监察所国家猪瘟参考实验室近几年的调查表明：目前我国大型养猪场猪瘟的平均感染率在10%左右，死亡率占养猪量的35%，每年由此引起的经济损失达人民币50亿元以上，是目前危害我国养猪业最为严重的疾病之一，而且近年来在部分地区还有抬头的趋势。,进入上世纪90年代，猪瘟的研究工作逐渐从以研究疫苗为主转向综
9、合防治、诊断技术、病原生态学、基因结构、病毒大分子结构与功能和猪瘟病毒持续感染与免疫失败机理方面，并取得了初步的研究成果。为更深入一步的认识猪瘟以及如何控制猪瘟提供了较好的技术平台和理论依据。 实践经验证明：对猪瘟的控制，我们应该走发达国家从预防控制到净化消灭的道路。,发达国家猪瘟净化的情况,英国从1963年开始，经过3年半的努力，于1966年消灭了猪瘟；美国于1962年开始实施联邦政府猪瘟根除计划，于1978年1月宣布消灭了猪瘟。1982年欧共体成员国开始采取根除猪瘟的共同计划。截止1976年已宣布无猪瘟的国家有阿尔巴尼亚（1973）、保加利亚（1975）、丹麦、芬兰、英国、匈牙利、爱尔兰、
10、冰岛、卢森堡、挪威、瑞典、瑞士。19771992年底，宣布无猪瘟的国家有美国、日本、海地、法国、葡萄牙、巴拿马、比利时、荷兰、奥地利、新西兰、澳大利亚等。,发达国家消灭猪瘟的经验,第一点根除从技术上来说关键是通过增大疫苗免 疫剂量和检测净化实现的：因此我国实行加大疫苗 免疫剂量的方法是完全必要的 第二点作为根除计划的一部分应该研究确实标 记疫苗取代现有的C株疫苗以区别疫苗免疫和野毒 感染。 第三点建立疫病检测监测计划，建立鉴别诊断 方法。,评论,这些国家多数是通过接种疫苗到净化最后消灭猪瘟，虽然在净化扑灭过程中也付出了相当大的代价，但从总体上讲，这种阵痛只是短期的，其收益远大于支出，特别是宣传
11、消灭了猪瘟后，无论是对养殖户、还是从国家对外贸易整体上讲，都具有极其重要的意义。 我国是一个养猪大国，存栏量占居世界的近一半。在目前猪瘟仍是一大主要疾病的情况下，开展猪瘟预防、控制、净化的研究具有特别重要的意义。,我国根除猪瘟的可行性,首先，我国有良好的猪瘟兔化弱毒疫苗，别国用我们的疫苗消灭了猪瘟，为什么我们不能？ 其次，从大多数国家的经验看，消灭猪瘟是完全可能的。 最后，经过多年的研究，我们已初步搞清了我国猪瘟的流行规律、特点、存在的问题及解决的方法，为猪瘟的免疫净化以及消灭猪瘟的更深入打下了良好的基础。,中国消灭猪瘟的防控技术制定,免疫净化根除 这是消灭猪瘟的三大关键步骤，通过强有力的免疫
12、，有效地控制了猪瘟的流行，才能实施净化，走免疫净化到非免疫净化，最后实现根除。,防控的技术保障,一：制定好的免疫程序： 对猪瘟的免疫程序，比较成功的主要有以下两种： 10-35-70日龄三次免疫接种程序； 220-60日龄两次免疫接种 经部分猪场实验证明：这两种免疫程序所获得保护效果基本相同，而仅0日龄1次接种的免疫效果则差一些。,防控技术保障,二：净化措施 猪瘟的净化受多种因素的影响。一方面是猪场管理和环境方面的原因，必须全社会一起参与；二是经济方面的原因，因为淘汰扑杀阳性感染猪将面临一定的经济损失；三是技术方面，必须有切实可行的技术做保障，很好的标记疫苗，好的检测方法。,净化中关键的问题,
13、猪瘟的流行持续感染 淘汰阳性感染种猪净化的关键 仔猪的有效免疫切断持续感染链的关键 最后实行疫苗免疫加净化的措施达到非免疫净化的目的,防控技术保障,三根除计划：我国的猪瘟根除计划应该在国家兽医行政管理部门监控下进行，因为我国地域辽阔，各地情况差异很大，猪场规模、管理水平不小，特别散养猪在我国还占大多数，同时还涉及到经济补偿和广大养殖者配合等问题。因此，猪瘟的根除计划必须依靠政府、依靠科技、依靠群众。 根除计划从种猪场入手大，中型养猪场小型猪场和农户。,我国消灭猪瘟的举措,我国的猪瘟目前还相当普遍所以消灭猪瘟的道路还很长至少还要1015年的时间。 目前国家“十一五”计划中的一个项目是我国猪瘟 综合防控技术集成和示范。旨在在全国建立无猪 瘟的示范基地然后在此基础和技术支持上在全国 实施消灭猪瘟的计划。相信在不久的将来我国会 成功的消灭猪瘟。,