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1、药 理 实 验,同济大学医学生,2,基 本 操 作 训 练,（一）实验要求 1、实验课重要性及要求： 掌握基本技能，验证药理学中重要的基本理论、基本知识。 培养严谨的态度、严密的工作方法和实事求是的工作作风； 培养对事物观察、比较、分析的能力和综合解决实际问题的能力； 培养创新意识。,3,2、实验过程具体要求： 包括实验前、实验中、实验后。 3、实验报告要求： 要求：科学性真实记录，不可涂改； 严密性层次分明 艺术性字法，句法，章法 内容：实验题目、实验目的、实验方法、 实验结果、讨论、结论,4,（二）基本操作 小白鼠捉持法、灌胃法、皮下注射法、 肌肉注射法、腹腔注射法、处死法。,5,药物剂型
2、介绍,分为四大类 1、液体剂型 2、软膏剂型 3、固体剂型 4、气 雾 剂,6,戊巴比妥钠半数有效量的测定 操作步骤： 1 取鼠10、分5组、称重 2 分别给药，戊巴比妥钠 3 49、39、31、25、20mg/kg 4 记录15分钟内入睡鼠数 5 实验室同剂量组合并求P，计算ED50 6 ED50=lg-1Xm-i(P-0.5),7,有关知识： 测定LD50、ED50的意义 粗略估计药物安全性的重要常数 TI=LD50/ED50 安全范围，一般指ED95LD5之间的距离， 更精确点，指ED99LD1之间的距离,8,药物血浆半衰期（t1/2）的测定 一 有关知识 血浆半衰期（t1/2），血药浓
3、度下降一半所需要的时间 二 操作步骤 1 取兔称重麻醉 20%乌拉坦5ml/kg（或 戊巴比妥钠1.5ml/kg） 2 血液抗凝处理 0.3%肝素ml/kg 3 仰位固定，分离颈动脉，扎夹远近心端 4 颈动脉插管，取空白动脉血ml 5 注射SD（1.5ml/kg），取，分钟 血ml 6 严格按P6表格操作，计算t1/2,9,注意事项： 勿忘抗凝步骤； 给药后均补入0.3毫升生理盐水； 给药后取血时，先放血约0.3毫升； 三氯乙酸加入血样后应立即震荡！ SD给药液与SD标准液勿混淆； 6 加样顺序、加样量要正确！,10,乙酰胆碱的量效曲线及药物pD2、pA2测定 一 有关知识 pD2（亲和力指数
4、）： 引起50最大效应时， 药物摩尔浓度的负对数值。 pA2（拮抗参数）： 使加倍浓度的激动剂仅引起原浓度的效应水平时，拮抗剂摩尔浓度的负对数值。,11,操作步骤： 1 取豚鼠处死、剖腹取回肠 2 清洗分离、剪成1.5cm左右长数段 3 进行计算机Medlab系统参数设置 4 取肠段对角结扎，一端挂钩、一端连换能器 5 平衡10分钟后，预刺激（Ach 3x10-3M,0.1ml), 换液3次，每次平衡5分钟 6 记录正常回肠收缩曲线 7 按表依次加入不同浓度乙酰胆碱液 迅速！ 8 洗肠3次、平衡10分钟，加入阿托品液0.3毫升 9 平衡5分钟后按表P9重复加入不同浓度乙酰胆碱液 10 绘制乙酰
5、胆碱量效曲线图 PD2=q-lgA; pA2=pAx+lg(x-1),12,注意事项： 1 悬挂肠段不要过度牵拉 （控制在1克左右）； 2 实验开始后不能再改变肠管的负荷！ 3 加药时勿碰连线及管壁； 4 药物剂量加入要注意连续累积性； 5 浴管内温度要恒温（低于38度）！,13,强心苷对离体蟾蜍心脏的作用 有关知识: 强心苷可 1 加强心肌收缩性; 2 减慢窦性频率 强心机理 抑制钠钾ATP酶, 钠钾交换受抑 钠钙交换增加,14,操作步骤: 制备蟾心; 处死,分离心脏; 穿线二,插管; 结扎,取出夹上 加入任氏液约1 毫升,夹心尖, 连接Medlab生物信号系统,描记正常曲线I 换入低钙任氏
6、液约1毫升,描记低钙曲线II 滴加夹竹桃3滴+3滴,描记强心曲线III 滴加夹竹桃直至中毒,描记中毒曲线IV 6 换洗三次,观测心脏功能恢复情况及曲线,15,吗啡的镇痛作用 【有关知识】 吗啡镇痛作用机制 吗啡 (+)阿片R ( 、 、 、 R ) 镇痛 、致幻 吗啡成瘾后的戒断症状： a. 兴奋,失眠,疼痛,震颤 b. 流泪,涕,呕,泻,出汗 c. 一种说不出来的难受感觉,16,【操作步骤】 予试验 小鼠2只，后爪SC2福尔马林20l, 间隔5分钟累积，观察30分钟内连续舔足时间 正式试验 生理盐水组 6只小鼠，SC NS(0.1ml/10g),5分钟后： 后爪SC2福尔马林20l, 记录5
7、分钟内连续舔足时间,17,吗啡组 6只小鼠，SC 0.02%盐酸吗啡(0.1ml/10g)，5分钟后 后爪SC2福尔马林20l, 记录5分钟内连续舔足时间 吗啡纳洛酮组 6只小鼠，IP 0.01%纳洛酮(0.1ml/10g)，5分钟后, SC 0.02%盐酸吗啡(0.1ml/10g)，5分钟后, 后爪SC 2福尔马林20l, 记录5分钟内连续舔足时间,18,【注意事项】 1 保持安静，以免影响小鼠的痛觉行为； 2 注射福尔马林时角度不要太大，进针不要太深； 3 应预先熟悉秒表的使用方法，以免错过记录 时间。,19,利多卡因对氯化钡诱发 家兔心律失常的预防作用 【有关知识】 利多卡因药理作用 1
8、 降低异位自律性； 2 影响传导： 已有阻滞之，致传导 抑制钠离子内流 部分除极之，致传导 促进钾离子外流,20,【操作步骤】 A 1 取甲兔、称重； B 1 取乙兔，同左 2 麻醉(iv2%戊巴比妥钠1.5ml/kg) 2 同左 3 缓慢iv2%利多卡因0.5ml/kg，5后 3 iv NS，同左 4 iv0.4%BaCl20.8ml/kg 4 同左 5 记录01、3、5、10、15、 5 同左 20、30心电图 6 统计心律失常出现时间、持续时间 6 同左,21,【注意事项】 1 利多卡因静脉注射速度要慢，以免诱发惊厥; 2 氯化钡静脉注射速度要快； 3 每次给药后补入0.5ml生理盐水,
9、22,苯巴比妥和苯妥英钠的 抗电惊厥作用 【有关知识】 苯巴比妥 抑制病灶神经元异常放电及其扩散，主要用于 癫痫大发作及其持续状态 苯妥英钠 阻止病灶异常放电向正常脑组织扩散，降低细胞膜 对钠离子、钙离子的通透性，抑制PTP形成。主要用于 1 大发作、精神运动性发作 首选 2 三叉神经痛、舌咽神经痛 3 心律失常（室性）,23,【操作步骤】 设定条件：电压100V。方式：单次， A频率2Hz，B时间1S 选择电惊厥阳性鼠6只，称重后分3组； 甲、乙、丙组分别IP NS、苯巴比妥、苯妥英钠 剂量均为 0.1ml/10g 30分钟后，原条件再给予电刺激， 记录强直性屈曲、伸展等的持续时间,24,【
10、注意事项】 小鼠电惊厥指标：前肢屈曲、后腿伸直； 鳄鱼夹需沾生理盐水，以利导电； 3 用药前后小鼠电刺激条件要一致。,25,地西半的抗药物惊厥作用 【有关知识】 地西半 作用机制 BZ类药（）BZ受体促进GABA与 相应受体结合，增加Cl通道开放频率, Cl 内流，超极化，抑制性效应 作用用途 抗焦虑、镇静催眠、抗惊厥抗癫痫、中枢性肌松 印防己毒素 1 (+) 脑干呼吸中枢； 2 中毒量致阵挛性惊厥 解除中枢以GABA为介质的运动神经突触 前抑制，从而取消了限制中枢兴奋泛发传播 的自身调节机制导致惊厥。,26,【操作步骤】 1 取鼠4只分2组； 2 甲组IP NS，乙鼠IP 地西半， 剂量均为
11、 0.05ml/10g； 3 30分钟后，IP 印防己毒素 0.15% 0.05ml/10g； 4 比较，记录惊厥发生时间,27,【注意事项】 1 腹腔注射应注意穿刺部位和深度； 2 注射时避免药液外漏； 3 观察药物惊厥现象时可给予触动刺激。,28,有机磷农药中毒及药物治疗 有关知识: 1 中毒机理 有机磷酸酯+胆碱酯酶 磷酰化胆碱酯酶（Ach蓄积) 2 中毒表现 3 解毒机理 阿托品 M受体阻断 氯解磷定+磷酰化胆碱酯酶 磷酰化解磷定+胆碱酯酶,29,操作步骤: 1 取兔,称重,记录正常指标; 瞳孔,唾液,二便,肌震颤 2 灌胃6%敌百虫6ml/kg,记时观察; 3 中毒明显时,耳缘i.v
12、.阿托品0.05%3ml/kg; 4 i.m.氯解磷定0.5ml/kg,观察,30,注意事项: 1 灌药后,补入适量生理盐水; 2 灌药前,阿托品及解磷定予先抽好备用; 3 敌百虫灌药40分钟后不出现症状 可补适量.,31,传出神经系统药物对家兔血压的 影响,实验目的 1、观察拟肾上腺素药肾上腺素、去甲肾上腺 素与异丙肾上腺素对心血管作用的不同。 2、观察应用-肾上腺素能受体阻断剂酚妥拉 明后拟肾上腺素药物对血压的影响。 3、观察应用-肾上腺素能受体阻断剂心得安 后拟肾上腺素药物对血压的影响。,32,相关知识 1、Adr： （+）1、1、2 2、NA： （+） 1、显弱1 3、ISO： （+）
13、 1、2 4、酚妥拉明： （-） 1、1 5、心得安： （-） 1、2,33,操作步骤 连接检压装置（压力换能装置） 套管系统充满肝素生理盐水 取兔称重、麻醉2%戊巴比妥钠30mg/kg耳缘iv（缓慢） 仰卧、固定、剪去颈毛 切开颈部皮肤、分离出气管及颈动脉,34,气管切开、插入丫形管粗线结扎 扎、夹颈动脉远、近心端（间距1.5cm） 近扎端剪口、插入A套管 （连接于MedLab生物信号系统）、扎紧、取下A夹 耳缘iv生理盐水、 A夹固定针头、注入肝素少量；,35,耳缘静脉依次给药 N.S. 酚妥拉明(1:100) 心得安 阿托品 5分钟后 3分钟后 Adr NA ISO Adr ISO 注：每给一次药后注入0.5ml N.S.，然后描记 一段曲线。,36,