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1、ThinPrep 非妇科细胞学 演讲系列,非妇科标本制片,P/N 86223-002 B 版,ThinPrep 技术的优势,ThinPrep 非妇科细胞学技术应用于非妇科标本有助于: 使细胞的保存得到优化 使标本制片标准化 简化玻片读片流程 可提供多样性检测，能够进行辅助实验,材料,所需材料清单,ThinPrep 2000 处理器 ThinPrep 显微玻片 非妇科 过滤器（蓝色） Multi-Mix 振荡仪 CytoLyt 和 PreservCyt 溶液,所需材料清单,50 ml 容量的离心机 50 ml 离心管 玻片染色系统和试剂 1 ml 塑料移液器（分级） 标准实验室固定液 盖玻片和固
2、定装置 用于故障排除的冰乙酸、DTT 和盐水,溶液,推荐使用的采集介质,CytoLyt Plasma-Lyte Polysol 电解质平衡液,不推荐使用的采集介质,Mucollexx 乙醇 含有聚乙二醇 的液体 Saccomanno 液,不推荐使用的采集介质,普通盐水 培养介质 RPMI PBS 含有甲醛的溶液,CytoLyt 溶液 PreservCyt 溶液,Hologic 溶液,甲醇缓冲型保存液 溶解红细胞 保护蛋白质沉淀 溶解粘液 使普通细胞学标本的形态在室温下保存 8 天,Hologic 溶液 CytoLyt 溶液,用作转移介质 在处理之前，可在标本制片过程中使用,Hologic 溶液
3、 CytoLyt 溶液,在使用 ThinPrep 2000 处理器进行转移和制片时，甲醇缓冲型溶液用于对细胞提供支持。 在处理之前，必须在 PreservCyt 溶液中完成标本的转移和存放工作,Hologic 溶液 PreservCyt 溶液,PreservCyt 溶液不得由任何其它试剂所代替 PreservCyt 溶液中的细胞在 4-37C 的温度范围内大约可保存 3 周,Hologic 溶液 PreservCyt 溶液,标本采集与制片,采集 细针抽吸,将整个标本放入 盛有 30 ml CytoLyt 溶液的离心管中漂洗；或将其放入电解质平衡液（如 Polysol 或 Plasma-Lyte
4、）内,采集 粘液标本,直接将采集物放入 30 ml CytoLyt 溶液内 如果刚刚完成采集，则应尽快加入 30 ml CytoLyt 溶液,采集 粘液标本,痰液： 将采集物直接放入 CytoLyt 溶液内 漂洗/灌洗： 采用电解质平衡液 (BES) 进行采集 刷洗： 将标本采集刷直接放入预先盛有 CytoLyt 溶液的试管内,采集 液体标本,在加入 CytoLyt 溶液之前，通过离心的方式对刚采集到的标本进行浓缩 如果不可行，则将采集到的标本直接放入 CytoLyt 溶液内 CytoLyt 与标本的比率最低应为 1:3,采集 表层标本,表层刷洗物和刮取物会被直接采集至 PreservCyt
5、溶液内,离心浓缩 滤出上清液并重制细胞团悬液 对细胞团进行评估 将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内 静置 15 分钟 使用“序列 2”，并在 ThinPrep 处理器上进行处理 固定、染色并评估,制片 细针抽吸,机械振荡 离心浓缩 滤出上清液并重制细胞团悬液 对细胞团进行评估 将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内 静置 15 分钟 使用“序列 3”，并在 ThinPrep 处理器上进行处理 固定、染色并评估,制片 粘液标本,离心浓缩 CytoLyt 溶液漂洗 滤出上清液并重制细胞团悬液 对细胞团进行评估 将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内 静
6、置 15 分钟 使用“序列 2”，并在 ThinPrep 处理器上进行处理 固定、染色并评估,制片 液体标本,标本制片技术,离心 600g x 10分钟,要将细胞物质同上清液分隔开来，应对细胞物质进行离心处理 请参阅ThinPrep 2000 Owners Manual“离心转速”章节中的“非妇科”部分，并确定要取得 600g 离心力所需达到的正确转速,机械振荡 粘液标本,方法 A 在“自动”振荡仪上，振荡 CytoLyt 溶液 5 分钟 方法 B 混合 CytoLyt/标本混合液几秒钟,滤出上清液,本步骤的目的是要对标本进行浓缩 以一个连贯的动作将离心管翻转 180，滤出所有的上清液，然后将
7、离心管恢复至原来的位置,振荡并 重制细胞团悬液,本步骤的目的是使细胞团随机分布，并提升 CytoLyt 溶液漂洗步骤的效果 将离心管放入振荡器内，并搅动细胞团 3 秒钟；或使用塑料移液器，前后甩动细胞团，以手动进行振荡,CytoLyt 溶液漂洗,本步骤的目的是使细胞形态能够得以保存，同时溶解红细胞、溶解粘液，并减少蛋白质沉淀 向细胞团中加入 30 ml CytoLyt 溶液、离心浓缩、滤出上清液，然后进行振荡并重制细胞团悬液,对细胞团进行评估,如果细胞团呈白色、淡粉色、棕褐色或无色，请 将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶中,对细胞团进行评估,如果细胞团明显呈红色或棕色，则表明有
8、血液存在 CytoLyt 溶液漂洗 加入 30ml CytoLyt 溶液 离心浓缩 滤出上清液 振荡并重制细胞团悬液,对细胞团进行评估,要检测液体的形式，可抽取少量的标本至移液器内，然后重新将其滴入离心管中 如果液滴呈串状或胶状，则必须对粘液作进一步的溶解,对细胞团进行评估,CytoLyt 溶液漂洗 加入 30ml CytoLyt 溶液 机械振荡 离心浓缩 滤出上清液 振荡并重制细胞团悬液,将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内,如果细胞团清晰可见，并且细胞团容量 1ml，则 对细胞团进行振荡，并向新制的 PreservCyt 溶液标本瓶中滴入两滴液体,将标本加入盛有 Prese
9、rvCyt 溶液的标本瓶内,如果细胞团容量 1ml，则 向离心管内加入 1ml CytoLyt 溶液，并快速振荡，重制细胞团悬液 向新制的 PreservCyt 溶液标本瓶中滴入一滴液体,将标本加入盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶内,如果细胞团无色或较少，则 将新制 PreservCyt 溶液标本瓶中的液体加入至离心管内，并快速振荡以使溶液混合 将所有标本倒回标本瓶内,故障排除,粘液标本,“标本过于稀释”消息,否,是,检查细胞量是否足够。 否则，如果有细胞团可供使用的话，应使用更多的细胞团。,粘液标本,玻片上是否有细胞物质的“晕轮”以及/或白细胞？,否,是,稀释、然后加入至盛有 Pre
10、servCyt 溶液的标本瓶中。 如果新玻片上出现晕轮，请联系 Hologic 技术服务部。,粘液标本,玻片中的细胞是否稀少，以及是否含有粘液？,否,联系 Hologic 技术服务部,是,进行离心处理，滤出上清液并振荡。 使用 CytoLyt 溶液进行漂洗。 如果玻片中的细胞最终仍很稀少，请联系 Hologic 技术服务部。,血液或 蛋白质标本,“标本过于稀释”消息,否,是,检查细胞量是否足够。 否则，如果有细胞团可供使用的话，应使用更多的细胞团。,血液或 蛋白质标本,玻片上是否有细胞物质的“晕轮”以及/或白细胞？,否,是,稀释、然后加入至盛有 PreservCyt 溶液的标本瓶中。 如果新玻
11、片上出现晕轮，请联系 Hologic 技术服务部。,血液或 蛋白质标本,玻片中的细胞是否稀少，以及是否含有血液、蛋白质或非细胞碎片？,是,进行离心处理，滤出上清液并振荡。 如果玻片中的细胞最终仍很稀少，请联系 Hologic 技术服务部。,否,联系 Hologic 技术服务部,常见的干扰物质 胞核细节模糊,可能是将 PBS、盐水或 RPMI 作为采集液使用所致 将刚采集到的标本放入 CytoLyt 溶液内， 或放入电解质平衡液内,常见的干扰物质 晕轮,在密集的标本中，只可能将外边缘的细胞物质转移至玻片 -如果玻片评估不满意， 则可参照第一张玻片，并采用相同的 制片故障排除步骤来制备第二张玻片,常见的干扰物质 染色 干扰物质,标本中心呈现由红色至橙色的染色，并且主要在细胞团内；这与干涸的物质较为相似 使用干净的乙醉进行漂洗，或在完成胞浆染色之后， 再次进行漂洗,有关更多信息,请参阅“ThinPrep 2000 Operators Manual”,有关更多信息,请访问我们的网站 或者 产品目录 联系信息 完整的妇科及 非妇科文献资料 细胞学案例演示,