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1、,赖氨酸的发酵流程,目 录,一、赖氨酸的简介 二、菌种的选育 三、赖氨酸的发酵工艺流程 四、赖氨酸的提取与精制工艺,一、赖氨酸的简介,赖氨酸是人体必需氨基酸之一，能促进人体发育、增强免疫功能，并有提高中枢神经组织功能的作用。缺乏赖氨酸的症状包括疲劳，虚弱，恶心，呕吐，头晕，没有食欲，发育迟缓，贫血等。赖氨酸为碱性必需氨基酸。由于谷物食品中的赖氨酸含量甚低，且在加工过程中易被破坏而缺乏，故称为第一限制性氨基酸。,二、菌种的选育,根据赖氨酸的发酵机制（图1）菌种的选育遵循： 1）切断或减弱支路代谢，选育高丝氨酸缺陷型（Hom）突变株，或蛋氨酸和苏氨酸或异亮氨酸缺陷型（Met + Thr、Ile）突
2、变株； 2）解除赖氨酸和苏氨酸的协同反馈抑制作用，选育结构类似物抗性突变株，使赖氨酸大量积累，,赖氨酸发酵机制,图 1 高产赖氨酸菌的遗传标记位置,三、赖氨酸的发酵工艺流程,参数控制 温度：发酵前期 32，中后期 34 pH ：6.57.5 种龄和接种量：二级种子接种量约 2%，种龄812h 三级种子接种量10%，种龄628h 通风供氧：Lys的最大生成量是在供氧充足、细菌呼 吸充足的时候,生物素：要充足，2030g/L以上 维生素B1 ：有促进作用 醋酸：加入醋酸比单独采用糖质原料Lys产量高 硫酸铵：适当增加，4%4.5% Cu2+：一定浓度的CuSO45H2O，可提高产量 流加糖和其它生
3、长因子,四、赖氨酸的提取与精制工艺,1）发酵液的处理：用草酸除去发酵液中的Ca3+ ，调节pH至23 2）菌体分离：用碟片式自动卸渣高速离心机，分离菌体和草酸钙等 3）离子交换吸附及洗脱：铵型阳离子交换树脂，洗脱剂为氨水加氯 化铵；用茚三酮检查流出液，pH9.512，得率可达90%95% 4）真空浓缩：去除氨，并提高Lys含量，真空时温度65，浓度22 23B 5）中和结晶：加入工业盐酸，搅拌，pH5.2，自然冷却结晶，至5结 晶完全（粗结晶，含一分子结晶水的粗L-Lys盐酸盐） 6）重结晶：用蒸馏水溶解，1112B，加入活性炭脱色，压滤，再真空浓缩至22B，再结晶、冷却、离心分离并水洗 7）干燥：60热风干燥，去结晶水，得到L-Lys盐酸盐，含水0.1%以下,五、灭菌操作,自从发酵技术应用纯种培养后，要求发酵全过程只能有生产菌，不允许其他任何微生物共存，因此所有发酵过程必须进行纯种培养。为了确保纯种培养，在生产菌接种前，要对培养基通入的空气、各种添加物、设备、管道等进行灭菌，还要对生产环境进行消毒。,