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1、第四章 尿液检验,第三节 尿液常用的化学检查,第三节 尿液常用的化学检查,尿比密（SG） 酸碱度（pH） 尿蛋白（PRO） 尿糖（GLU） 尿酮体（KET） 尿胆红素（BIL） 尿胆原（URO） 尿血红蛋白（RBCOBHbBLDERY） 尿白细胞（WBCLEUNEU） 尿亚硝酸盐（NIT）,一、尿液酸度测定,尿液pH受机体饮食、运动、药物、疾病和代谢的影响。测定它可以间接的反映肾小管的功能。 测定方法： 1、指示剂法 2、试纸法 3、pH计法,参考值和临床意义,随机尿pH波动范围在4.68.0，多在5.56.5 酸性尿: 腹泻、脱水、发热、低钾性代谢性碱中毒、代酸、痛风、糖尿病、白血病等。 碱
2、性尿: 急慢性肾病、严重的呕吐、呼吸性碱中毒、肾小管酸中毒、应用利尿剂或炭酸氢钠药物等。,二、尿液蛋白质定性检查,若尿液蛋白质（protein）排出量大于150mg/24h、或尿中蛋白质浓度大于100mg/L时，常规化学定性检查为阳性，即称为蛋白尿（Proteinuria ）。,蛋白尿成因分类,生理性蛋白尿：发热、剧烈运动、精神紧张等应激状态或体位改变。多为一过性和暂时性，程度较轻。指出晨尿中也可出现蛋白尿弱阳性结果。 病理性蛋白尿：肾脏本身病变,蛋白尿成因分类,肾前性蛋白尿：血浆因素 肾性蛋白尿：肾脏本身病变 肾后性蛋白尿：输尿管、膀胱、尿道 前列腺、精囊腺、附睾等,病理性蛋白尿：根据形成部
3、位可分为,蛋白尿成因分类,肾小球性蛋白尿：肾小球病变 肾小管性蛋白尿：肾小管病变 混合性蛋白尿：肾小球肾小管混合病变 组织性蛋白尿：输尿管、膀胱、尿道前列腺、 (假性蛋白尿) 精囊腺、附睾等 溢出性蛋白尿：血浆因素,病理性蛋白尿：根据形成机制可分为,蛋白尿测定方法,1、加热醋酸法 可以区别乳糜尿和菌尿脓尿结晶尿等 2、磺柳酸法 敏感，易导致假阳性 3、干化学法 蛋白质误差原理,酸滴定,三、尿液糖定性检查,当血浆葡萄糖（glucose）含量超过肾糖阈（8.88mmolL），或肾小管重吸收能力下降时，尿糖定性为阳性，称为糖尿（glucosuria）。 如果因后者引起肾糖阈下降而形成尿糖阳性称为肾性
4、糖尿。,尿糖测定方法,1、班氏法（Benedict Method） 定性或半定量 2、干化学试带法 葡萄糖氧化酶法 特异性高,尿糖测定的意义,1、血糖增高性糖尿 见于 糖尿病性糖尿： 其它内分泌异常：甲亢、柯兴综合征 应激状态：手术、紧张等 摄入因素：饮食、输液等 2、肾性糖尿病：血糖正常，肾糖阈降低 3、非葡萄糖糖尿,四、尿中酮体定性检查,酮体（ketone body）是脂肪代谢的中间产物，由乙酰乙酸、羟丁酸和丙酮组成。其中乙酰乙酸、羟丁酸和丙酮分别占20、78和2。 当体内脂肪代谢加速，生成的大量酮体便在血中蓄积称为酮血症（ketonemia），从尿中排出形成酮尿（ketonuria）。,
5、四、尿酮体定性检查方法,1、Lange法（朗格法） 亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物。 2、改良Rothera法（粉剂法） 原理与Lange相同，优点是减少了干粉试剂用量，便于储存与携带。 3、干化学试带法 原理与Lange法相同。试带法敏感、方便、快速，已基本取代了上述两种方法。,尿酮体阳性的意义,1、糖尿病酮症酸中毒 酮尿是糖尿病性昏迷的前期指标，多伴有高血糖和糖尿。 2、其它 如饥饿、过分节食、剧烈呕吐或腹泻、全身麻醉、长时间空腹运动及寒冷刺激等尿酮体阳性；妊娠妇女可因严重妊娠反应、剧烈呕吐、重症子子痫出现酮尿；酒精性肝炎、肝硬化也可出现酮尿。,溶血性黄疸,肝细
6、胞性黄疸,阻塞性黄疸,五、尿液胆红素定性检查,血中结合胆红素(bilirubin，BIL)水平升高，则有较多的胆红素经肾脏滤出，导致尿胆红素定性阳性，称为胆红素尿(bilirubinuria) 。 测定方法： 1、湿化学法 2、干化学试带法 临床意义： 阻塞性及肝细胞性黄疸，尿胆红素阳性，而溶血性黄疸尿胆红素则阴性结果。,Harrison原理,六、尿胆原定性检查,胆红素经胆管排泄至肠道后，被肠道细菌氧化为尿胆原（urobilinogen，URO），其中大部分又经肠肝循环被肝细胞摄取转化成胆红素。少部分尿胆原进人血液由尿中排出，还有一部分随粪便排出体外。当尿胆原合成增加，或肝细胞摄取、转化尿胆原
7、的能力下降，尿中尿胆原排出增加；而由于胆管阻塞，胆红素不能排泄人肠道时，则没有尿胆原生成，尿中尿胆原减少甚至阴性。,尿胆原测定的方法,1、改良Ehrlich法 是利用尿胆原在酸性条件下与对二甲氨基苯甲醛反应生成樱红色化合物的特性而设计的湿化学定性法。操作简便，检测前一般需先分离胆红素。 2、干化学法 试带有两种，一种是以Ehrlich醛反应为基础的试带，另一种是利用尿胆原与重氮化合物的偶联反应，根据产生红色的深浅判断尿胆原含量。试带法简单快速，可以半定量，不受尿中胆红素的影响。,临床意义,1、黄疸的鉴别 尿胆原定性多与胆红素定性同时进行，在临床上常结合血清胆红素定量及粪便颜色的改变用于黄疸的鉴
8、别。溶血性黄疸时尿胆原生成及排出明显增加；肝细胞性黄疸时尿胆原排出增加；完全阻塞性黄疸时尿胆原阴性。 2、反映肝细胞损伤的敏感指标 急性黄疸性肝炎时，尿胆原排泄量首先增加，早于黄疸症状出现之前。 3、药物影响 长时间大剂量应用抗生素可抑制肠道菌群，使尿胆原不能合成，造成尿胆原阴性；而长时间便秘则容易使尿胆原阳性程度增加。分析时应结合用药史和病史。,正常人及三种黄疸的胆红素代谢检查结果,血清胆红素 尿二胆 结合型 非结合型 尿疸原 胆红素 正常人 正常 正常 正常 阴性 溶血性黄疸 轻度增高 明显增高 明显增高 阴性 肝细胞性黄疸 中度增高 中度增高 多为中度增高 阳性 胆汁淤积性黄疸 明显增高
9、 轻度增高 减低 强阳性,CB:结合型胆红素 UCB：未结合胆红素 DBIL：直接胆红素 IDBIL：间接胆红素 TBIL：总胆红素 TBIL=DBIL+IDBIL,七、尿血红蛋白定性检查,正常人血浆中仅有微量的血红蛋白（hemoglobin，Hb），与触珠蛋白形成Hb-Hp复合物，在单核巨噬细胞系统代谢，不能从尿中排出。但当Hb超过Hp结合能力时，即可从中排出。 尿中血红蛋白来源有两个，一为血管内溶血，另一为肾及上尿路出血、溶血。当尿中的血红蛋白含量较少时，肉眼看不出尿液颜色变化，但化学定性为阳性，故称为隐血试验（occult blood test，OBT）或潜血试验。,尿液血红蛋白的测定方
10、法,1、湿化学法 有联苯胺、邻甲苯胺、邻联甲苯胺、无色孔雀绿、愈创木酯和氨基比林（又称匹拉米洞法）等。 2、干化学试带法 与湿化学法原理相同。试带模块上主要含有邻联甲苯胺、联苯胺或其衍生物。简便、快速，敏感度高。,尿液血红蛋白的测定方法,上述方法干扰因素很多。vitC等其它还原性物质可抑制酶活性使反应呈假阴性；一些铁剂、碘化合物等氧化物可使反应呈假阳性。这些试剂与肌红蛋白也起反应。因而特异性差，需加以鉴别。,尿液血红蛋白的测定方法,3单克隆抗体免疫胶体金法 采用抗人血红蛋白单克隆抗体进行隐血检测。敏感度更高（0.21gL，2个RBCHP），主要优点是特异性强，与其它动物血都不起反应，干扰因素少
11、。既适用于检查尿隐血，也适用于粪便隐血。加之操作简便、快速，但目前费用较高。,尿液血红蛋白的测定临床意义,1、辅助诊断泌尿系统疾病 血红蛋白主要存在于红细胞内，因而泌尿系统疾病引起出血都可导致隐血试验阳性。尤其是隐匿性肾炎，当尿中仅有的少量红细胞破坏时，可能表现为查到的红细胞数与隐血试验结果不一致，应注意分析。 2、辅助诊断肾前性溶血性疾病 各种血管内溶血性疾病，如阵发性睡眠性血红蛋白尿、阵发性寒冷性血红蛋白尿、行军性血红蛋白尿、自身免疫性溶血性贫血、血型不合输血等，均可能出现尿隐血试验阳性。,八、尿液亚硝酸盐定性检查,当尿中有病原微生物增殖，并且尿液在膀胱中存留足够长时间的情况下，某些含有硝
12、酸盐还原酶的感染病原菌可将尿中的硝酸盐（nitrate）还原为亚硝酸盐（nitrite， NIT）。最常见的细菌有：大肠杆菌属、克雷白杆菌属、变形杆菌、葡萄球菌属、假单孢菌属等。此外产气杆菌、铜绿假单胞菌、某些厌氧菌以及真菌也富含有稍酸盐还原酶。因此，亚硝酸盐定性试验可作为泌尿系感染的筛选指标之一。,尿液亚硝酸盐的测定方法,1、湿化学法 是将混合药物的干粉直接与尿液作用，观察颜色的变化。 2、干化学法 据Griss原理而设计开发，主要用于检测尿路因大肠杆菌感染而产生的亚硝酸盐，与白细胞测定模块组合对泌尿系感染的诊断筛查更有意义。NIT测定基本上都是利用Griss原理，即NIT先与对氨基苯磺酸或氨基苯磺酰胺反应形成重氮盐，再与一萘胺结合形成红色偶氮化合物。,注意,由于Griss反应取决于以下3个条件： 感染的病原微生物的种类 尿液滞留时间 硝酸盐的存在 因此，NIT测定对泌尿系感染的阳性检出率并非100。该指标可作为泌尿系感染的过筛试验，但NIT阴性不能排除感染。,