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1、血液检测原理,Sysmex学术应用部 曹文静,3,Sysmex 血液分析仪家族,XE-2100,XE-2100D/L,KX-21N,K-4500,pocH-100i,XT-1800i,XT-2000i,3-part Diff,Low end 5-part Diff,Mid-end 5-part Diff,High-end 5-part Diff,XE-alpha,HST,XS-800i,XE-5000,XN,五分类仪器归总：,规格：尺寸（机组）,：搭载 ON：软件控制下的选择方式：“选择” OFF：软件控制下的选择方式：“无选择” ：作为参考参数汇报,WB: whole blood, PD:
2、prediluted, BF: body fluid,灵活地适应顾客的要求 准备分析功能不同的2种型号 （XN-10、XN-20） 采用设备时，通过软件的变更，可将XN-20设定为2组机型XN-10设定为4组机型,搭配原则：遵循左高右低,XN2000/3000机型搭配要求,XN9000机型搭配原则,可搭配机型,不可搭配机型,要符合左高右低搭配的原则，同类型配置原则,吸样量 所需血液量 全血模式 低值白细胞模式 稀释模式4 体液模式,进样器检测定1 手动测定 微量测定2 微量测定3 （微量采血管测定） 微量测定2 微量测定4 （微量采血管测定） 手动测定 微量测定2 微量测定3 （微量采血管测定
3、）,88L 88L 88L 88L 70L 70L 88L 88L 88L,1 mL 1 mL 0.3 mL 160L 0.3 mL 140L （稀释后 ） 1 mL 0.3 mL 160L,1 进样器测定：试管架自动传送的进样器测定。 2 微量测定：为了减少最低体积（dead volume）、打开采血管盖进行的手动测定。 3 微量测定（微量采血管测定）：使用微量采血管进行的检测。开盖测定。 4 稀释模式：将血液7倍稀释后进行测定的模式。,规格：吸样量所需血液量,以XE2100为例，检测原理、通道、参数信息,检测模块,检测原理,检测通道,检测信息,RBC/PLT,WBC,鞘流原理 -DC检测
4、-,流式细胞原理,RBC/PLT 通道,PLT 直方图,RBC 直方图,WBC 散点图,检测参数,PLT,RBC,WBC/Ba 通道,HPC,HGB,HGB 通道,比色法,HGB,全血标本,IMI 通道,DIFF 通道,NRBC 通道,RET 通道,DIFF 散点图,WBC Baso,NRBC,RET PLT-O IRF,NRBC 散点图,RET 散点图,Lymph Mono Neut+Ba Eo,RET,流式细胞原理,RF/DC,检测通道,RBC/PLT,XN仪器检测通道的改善,RET,DIFF,IMI,WNR,PLT-F 低值血小板,WPC,1.半导体激光+流式细胞,半导体激光提供的细胞信
5、息 FSC 前向散射光：细胞大小 SSC 侧向散射光：细胞内容物复杂程度 SFL 侧向荧光：细胞内核酸含量,主要原理 WNR WDF RET/PLT-O PLT-F 激光633nm 荧光染色 聚次甲基 噁嗪 流式,2.阻抗+射频,主要原理 RBC/PLT-I 鞘流阻抗法,11,前鞘流：避免多颗粒同时通过宝石孔少计数 避免颗粒侧流多计数 后鞘流：避免颗粒回流多计数,血细胞通过电阻值发生变化脉冲被检测 当血细胞通过检测部小孔时，电阻信号 信号的大小与通过的细胞体积呈正比 电阻变化的次数细胞数,3.SLS-血红蛋白法,HGB通道,十二烷基磺酸钠：无氰无毒,IG HPC,NRBC RET RET-HE
6、 IRF,IPF,幼稚细胞和异常标本的检出,粒系,红系,巨核系,0.7%,添加实验,幼稚细胞灵敏度高达,各通道检测原理,XE系列,XN系列,和XE相比较，LYMPH和MONO的散点群更加明确地得以划分。,原理：WDF通道,病例 未分类样本改善,XE5000,XN2000,报警信息： 原始细胞？异淋? 有核红？ 白细胞散点图异常 核左移？单核细胞增加？ 嗜碱细胞增加？幼稚细胞？,5分类 NRBC 0.9%,未分类NRBC?,报警信息： 原始细胞？ 白细胞散点图异常 核左移？单核细胞增加？ 幼稚细胞存在？,WDF通道中，对白细胞进行计 数并分类为中性粒细胞、淋巴细 胞、单核细胞以及嗜酸性粒细胞,同
7、时定量检出幼稚粒细胞(IG% ，#）以及异型淋巴细胞（,HFLC%，#）等的异常细胞。 对相关异常参数 的复检规则制 定更具定量化。,1.WDF通道：IG和HFLC的定量参数,检测参数： NEUT, LYMPH, MONO, EO, IG,病例：IG增高病例,镜检图片：,Sysmex仪器对于异常细胞检出的灵敏度为0.7%,WDF通道的要点,散点图基本上和XE系列的DIFF通道无区别。 试剂得以改良（溶血剂的作用较XE系列稳定。） 新的SFLAS算法应用， 使得LY和MO间距拉宽，除散点位置外还综合散点重心、形态等，使得得以更加明确地划分。,FSC：前向散射光,溶血剂：Lysercell WNR
8、 染色液：Fluorocell WNR,WNR散点图,SFL：侧向荧光,BASO,WBC,NRBC,Debris,2.WNR：有核红细胞计数为常规报告参数,New,嗜碱性 粒细胞,淋巴细胞,单核细胞 粒细胞 （中性粒细胞 嗜酸性粒细胞等）,有核红细胞 红细胞,中,弱 极弱,中,中 极弱,(SFL) 强,侧向荧光 前向散射光,(FSC) 强,项目： WBC, NRBC, BASO 报警信息 PLT Clumps?, NRBC Present, WBC Abnormal Scattergram 细胞膜通过,溶血,荧光,病例：外周血有核红病例,NRBC升高见于：,有效降低推片复检率,WNR通道WBC
9、总数：9.67*109/L,WDF通道WBC总数：9.51*109/L,正常情况，两个通道WBC总数相差不大, 由于在CBC模式下该通道用于WBC测定，因此可以在全体样本中测得NRBC计数，以及由NRBC数修正过的WBC数据。 由于采用荧光染色进行检测，红细胞没有被染色，所以不存在红细胞溶血不良所造成的影响。 （仪器评估检测时也未出现溶血不良的例子） 删除“RBC Lyse Resistance?”的报警。,2.WNR通道要点：,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,试剂 溶血剂：Lysercell WPC 染色液：Fluorocell WPC,SSC：侧向散射光,WBC,Blast WBC
10、Abn Lymph,Blast,WPC散点图 Abn Lymph,报警信息 Abnormal lymph?, Blasts?, Atypical lymph?,异常淋巴 细胞 原始细胞 成熟 白细胞,溶血,染色,侧向荧光 前向散射光 侧向散射光 (SFL) (FSC) (SSC),中强 弱中 中,弱 强 弱强,弱 弱 弱强,HPC,HPC,3.WPC：通过REFLEX设置选择性检测,New,主界面,研究界面,HPC散点图,HPC通道测定时，HPC区域中出现的粒子显示为紫红色。 (全血模式时显示为红色)。,HPC,外周血中，可见白细胞数增加、贫血，成熟淋巴细胞增加（93）。淋巴细胞的体积大约是红
11、细胞体积的2倍左右，细胞质面积小，嗜碱性弱。核为类圆形，核染色质浓缩。核仁不显眼。另外，在标本上可见大量的破碎细胞核的轮廓。,病例（一）： (B-CLL)淋系白血病,外周血中，可见白细胞数增加、贫血、血小板数减少。原始细胞的形态为中型，核质比较低。核为类圆形，或可见切迹。核染色质为较大，且纤细，可观察到明显的核仁。零散地可见有Auer小体（ ）的原始细胞。另外，在核和细胞质中可观察到空泡。,病例（二）：( AML-M2 )髓系白血病,使用WPC通道进行复检，可降低推片率,3.WPC通道要点：, 选择性使用：通过reflex对怀疑类报警追加WPC检测在WPC通道，采用荧光染色可以检出类似Abno
12、rmal Lymph和Blast的异常细胞。 试剂无臭味：通过试剂的改良，区别与原先IMI通道。 特异性高：在保持高灵敏度前提下，不仅区分髓系还能区分淋系。 降低推片率，缩短TAT。 异常淋巴细胞(Abnormal Lymph)：易着色，体积较小。 原始细胞(Blast)：不易被染色，体积较大。,4.原理：RET通道,稀释剂：CELLPACK DFL 染色液：Fluorocell RET,RET散点图,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目 RET, RET-He 标志 RET Abnormal scattergram, Fragments?,RET参考范围-卫生部正在操作。 建议实验室也
13、可建立自己的参考范围。,网织红细胞检测参数,RET-He:网织红细胞血红蛋白含量,LFR:低荧光强度网织红细胞比率,MFR：中荧光强度网织红细胞比率,HFR:高荧光强度网织红细胞比率,IRF：未成熟网织红细胞百分比,RET#% 网织红细胞计数的绝对值和百分比,网织红 检测参数,RET通道小结：,1.XN校准品种还有RET参数，具有溯源性。 2.IRF：IRF是反映红系增生减低比较敏感的指标，IRF对肾性贫血的疗效判断具有重要价值。 3.RET-HE: 缺铁性贫血的鉴别诊断，IDA时，明显减低 肾性贫血：建议EPO+铁剂治疗，同时检测RET-HE的变化,稀释剂：CELLPACK DFL 染色液：
14、Fluorocell PLT,PLT-F散点图,SFL：侧向荧光,FSC：前向散射光,项目 PLT, IPF 标志 PLT Abnormal scattergram, PLT Clumps?,5.原理：PLT-F通道,SFL,PLT-O： 颗粒,PLT-F ：线粒体DNA,XN-3种检测通道检测PLT,PLT-I：颗粒大小,DC,低值血小板检测更加准确,一例烧伤患者的XN PLT-F散点图,Fragmentated,一例烧伤患者的XE PLT-O散点图,Erythrocyt Erythrocyt Fragmentated,erythrocytes,erythrocytes Platelets
15、Platelets 使用试剂的区别：,PLT-O 、PLT-F染色试剂的区别,低值血小板重复性,显微镜见极少量RBC碎片,显微镜见1%RBC碎片,显微镜见极少量RBC碎片,显微镜见少量RBC碎片,PLT-F通道检测低值血小板的重复性最佳。,以PLT-F结果为准,病例 ：红细胞碎片对血小板计数的干扰,5.PLT-F通道要点：,在PLT-F通道，使用了不同于RET通道的荧光染料噁嗪 ，而 PLT-O 的荧光染料是聚次甲基+噁嗪。噁嗪对 DNA 极其敏感 由于选择性染色血小板，故网织红细胞难以染色。另外，也不易受到红细胞碎片的影响。 血小板低值样本，5倍计数，提高精密度的同时保证了检测的准确度。,X
16、E/XT体液模式界面及散点图,BF报告参数,BF研究参数,WDF: 主画面,WDF (EXT): 服务画面,体液BF模式：散点图,WDF散点图,WDF(EXT)散点图,WDF散点图,WDF(EXT)散点图,XN/XE体液功能的变化,46,统一、完整的质控校准体系,完整的质控校准体系 统一质控品覆盖全部报告项目项目，全系列XN仪器通用 唯一SFDA注册的体液质控品 唯一含RET校准项目的校准品,原理部分Q&A：,1. XN 的 WDF 通道和原来 XE 系列的 DIFF 通道相比，白细胞分类更好的原因是什么? 2.XN机型中哪些机型可以测PLT-F？哪些机型可以测RET？ 3.简述WPC通道优势？ 4.最能体现最先进血液分析仪白细胞系定量检测的参数为？红细胞系可定量检测的参数为？血小板定量检测的参数为？ 5.XN的质控品分哪几种？校准品分哪几种？,谢 谢！,