课题DNA的粗提取与鉴定.ppt

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1、课题1 DNA的粗提取与鉴定,专题5 DNA和蛋白质技术,一 基础知识,问题: DNA是什么?DNA分布在哪里? 提取DNA的思路?,(一)DNA的溶解性,NaCl溶液 酒精溶液,DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质溶于酒精溶液。,P54思考题,(二)DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性,(1) 酶 (2) 高温,蛋白酶水解蛋白质而不会对DNA产生影响。,大多数蛋白质60-80变性, DNA在80以上才会变性。,瓦解细胞膜,但对DNA无影响。,(3) 洗涤剂,(三)DNA的鉴定,在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。,二 实验设计,(一)实验材料的选取,(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液

2、,动物材料:鸡血细胞液(如何获得?),植物材料:菜花,吸水涨破,细胞膜:洗涤剂,P55旁栏题,(三)去除滤液中的杂质,阅读方案1、2、3,P55-56旁栏题,(四)DNA的析出与鉴定,冷却的酒精溶液,二苯胺试剂 沸水浴,例:下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置,请回答问题。,(1)实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血,主要原因是鸡血细胞液中 含量较高。 (2)在图A所示的实验步骤中加蒸馏水20 mL的目的是 ,通过图B所示的步骤取得滤液,再在滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是 ;图C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是 。 (3)为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA,可按图D所示进

3、行实验,滴加 溶液。,DNA,使血细胞吸水涨破,放出DNA,使滤液中的DNA溶于浓盐溶液,使DNA析出,二苯胺,例:下图为“DNA的粗提取与鉴定”的实验装置,请回答问题。,(4)a试管为对照组,b试管为实验组。 a试管现象 ; b试管现象 。 在沸水中加热的目的是 ,同时说明DNA对高温有较强的 。 a试管在实验中的作用是 。 b试管中溶液颜色的变化程度主要与 有关。,加快颜色反应速度,溶液不变蓝,溶液变蓝,耐受性,对照,加入丝状物的多少,步骤:,提取血细胞核物质(蒸馏水涨破),溶解(2 mol/L的NaCl),过滤(含核物质滤液),析出(滴蒸馏水,降NaCl浓度至0.14 mol/L),过滤(DNA的黏稠物),再溶解(2 mol/L的NaCl),过滤(含DNA的滤液),进一步提纯(体积分数为95%的冷却酒精),鉴定,制备鸡血细胞液,

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