6.2《基因工程及其应用》课件顾良国.ppt

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1、能否让细菌“吐出”蛛丝?让禾本科植物也能固氮?,设想,根瘤菌的固氮作用,基因“嫁接”,基因工程及其应用,第2节,基因工程:即 。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里, 地改造生物的 。,原 理:,操作水平:,结 果:,一、基因工程,基因重组,DNA分子水平,定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。,基因拼接技术或DNA重组技术,定向,遗传性状,二、基因操作的工具,1、基因工程的,限制性核酸内切酶(限制酶),主要存在于微生物,一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子,已发现的有200多种,作用于:,

2、磷酸二酯键,EcoRI 剪切目的基因,黏性末端,被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端?,思考:,形成的黏性末端不同,不同的限制酶呢?,具有,2、基因工程的,DNA连接酶,将互补配对的两个粘性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子,使用DNA连接酶制作重组DNA分子,甲片段,DNA连接酶的作用位点是:相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成:磷酸二酯键。,3、基因的运载体,(3)条 件,能够在宿主细胞中复制并稳定地保存,具有多个限制酶切点,以便与外源基因连接,具有标记基因,便于进行筛选,(2)常用 的运载体:,质粒、噬菌体和动、植物病毒等,(1)概念,标记基因,便于进行检测。,质粒

3、存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是能够自主复制的很小的环状DNA分子。,从细胞中分离出DNA,从大肠杆菌中提取质粒,提取目的基因,目的基因与运载体结合,DNA连 接酶,目的基因导入受体细胞,目的基因的表达与检测,三、基因工程操作的基本步骤,抗虫棉,抗CMV甜椒,抗虫原理?抗虫结果?,四、 基因工程的应用,1、基因工程与作物育种,抗虫转基因植物,生长快、肉质好的转基因鱼(中国),乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷),转黄瓜抗青枯病基因的甜椒,2、基因工程与药物研制,我国生产的部分基因 工程疫苗和药物,许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限,其价格往往十分昂贵。,微生物生长

4、迅速,容易控制,适于大规模工业化生产。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内,让它们产生相应的药物,不但能解决产量问题,还能大大降低生产成本。,胰岛素从猪、牛等动物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰岛素,其产量之低和价格之高可想而知。,将合成的胰岛素基因导入大肠杆菌,每2000L培养液就能产生100g胰岛素!使其价格降低了30%-50%!,临床常见的生长激素,干扰素和乙肝疫苗等药物都可以用基因工程来大规模生产,1987年开始上市的干扰素,生产胰岛素历史?,基因工程做成的“超级细菌”能吞食和分解多种污染环境的物质。,通常一种假单孢杆菌只能分解石油中的一种烃类用基因工程培育成

5、功的“超级细菌”却能分解石油中的多种烃类化合物。,科学家还培育出能吞食转化汞、镉等重金属,分解DDT等毒害物质的细菌。,3、环境污染治理,利用基因工程培育的“指示生物”能十分灵敏地反映环境污染的情况,却不易因环境污染而大量死亡,甚至还可以吸收和转化污染物。,转基因食品,安全吗?!,转基因植物的安全性争论,支持派认为:如果转基因农业生物技术得不到社会支持,这一研究将被扼杀,并且强调,迄今为止并没有发现转基因食品危害人体健康和环境的确切证据。,美国人食用转基因食品已多年,超级市场上有4000多种商品是含有转基因植物成分的,还没有事例证明人吃了以后会得病,甚至会引起死亡。 加拿大、澳大利亚也是转基因

6、食品的生产大国,均有几千万人在吃,到现在为止也没有个案例说明它有问题 。,反对派的观点,一英国科学家声称,转基因马铃薯会减弱老鼠免疫系统功能; 美国康乃尔大学也发现,转基因玉米会危害蝴蝶幼虫及其相关生态环境。,环保团体认为这种违反自然的转基因作物及产品,未经长期安全测试,长期食用可能对人类及生态环境造成负面影响。 尤其是注重环境和生态保护的欧盟国家,对转基因作物更加排斥,因而抵制美国GMO产品的进口。,基因工程的操作工具,1.基因的剪刀 限制酶,2.基因的针线 连接酶,3.基因的运输工具 运载体,基因工程的操作步骤,1.目的基因的提取,2.目的基因与运载体结合,3.目的基因导入受体细胞,4.目的基因的检测与表达,小结,一、基因工程的原理,二、基因工程的应用,三、转基因和转基因食品的安全性,

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