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1、第四节 氨基酸的化学反应一、-氨基参加的反应与亚硝酸的反应测量氮气的体积可计算氨基酸的含量。与酰化试剂的反应可用于氨基的保护。烃基化反应可用于测定多肽链的氮末端氨基酸。形成西佛碱的反应为转氨基反应的中间步骤。脱氨基反应为氨基酸分解反应的重要中间步骤。二、-羧基参加的反应成盐和成酯反应可用于羧基的保护。成酰氯反应可用于羧基的活化。脱羧基反应是生成胺类的重要反应。叠氮反应可用于羧基的活化。三、-氨基和-羧基共同参加的反应（一）与茚三酮的反应常用于氨基酸的定性或定量检测。（二）成肽反应四、侧链R 基参加的反应酪氨酸可发生碘化、硝化、重氮反应，后者可用于检测酪氨酸。组氨酸可发生重氮反应。精氨酸可与环己
2、二酮发生缩合反应，曾被用于氨基酸序列分析。色氨酸可被N-溴代琥珀酰亚胺氧化，生成有色化合物，可用于色氨酸定量测定。半胱氨酸可生成烷基衍生物，可用于巯基的保护。巯基可与重金属生成盐，使蛋白质失活。巯基在空气中可被氧化，金属离子对此有催化作用。胱氨酸的二硫键可被还原为两个巯基。也可以被过甲酸氧化成两个磺酸基。第五节 氨基酸的光学活性和光谱性质一、氨基酸的光学活性和立体化学氨基酸的不对称碳原子可用D-或L-表_示，其比旋值可用于氨基酸的鉴别。二、氨基酸的光谱性质芳香族氨基酸的紫外吸收光谱如下图所示。这一性质可用于蛋白质的定量测定。三、氨基酸的核磁共振（NMR）在外加磁场的作用下，原子核的自旋方向达到
3、一致，可以和一定频率的外加磁场共振而形成吸收峰，同一种原子核在分子中的位置不同，因其外围的电子云对核的屏蔽作用引起的吸收峰位置移动（化学位移）也不同，由吸收峰的位置可以推断原子处于哪一个基团，在1H NMR 谱中，当相邻基团上有n 个质子时，该基团的质子吸收峰将分裂成n+1 个峰。第六节 氨基酸混合物的分析分离一、分配层析法的一般原理逆流分溶符合二项式的展开式，但对于纸层析和柱层析来说，有关的计算无实际意义。分配系数=物质在流动相中的总量/物质在固定相中的总量二、分配柱层析可以同检测器、记录仪、馏分收集器、输液泵构成层析系统。三、纸层析Rf 主要与R 基的极性有关，溶剂的PH 可影响R 基的极性，氨基酸与滤纸的吸附作用也影响Rf。四、薄层层析速度快，硅胶等支持物可以使用较强烈的显色方法。五、离子交换层析离子交换树脂的结构如图所示，功能基团种类较多。氨基酸的离子交换分离原理：若pIpH0，两性离子带净正电荷，若pIpH0，两性离子带净负电荷，差值越大，所带的净电荷越多。用氨基酸自动分析仪分析氨基酸混合物的洗脱曲线（阳离子交换剂）。六、气液层析七、高效液相层析HPLC 分析氨基酸混合物的洗脱曲线。