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1、学号：071040219本科生毕业论文SPME-GC/MS测定三种不同蒿属植物挥发性物质 院 （系）： 生物科学与技术学院 姓 名： 付伟 班 级： 0710402班 专 业： 生物工程 指导教师： 周毅峰 副教授 中国恩施二一四年五月2ID:071040219BACHELORS THESIS OF HUBEI UNIVERSITY FOR NATIONALTIES Determination of three kinds of different Artemisia volatile substance SPME-GC/MSName: Fu WeiGrade: 071040219Profes
2、sion: Biological engineeringTutor: Zhou Yi-feng Enshi ChinaMay, 2014I2学术声明1、 坚持以“求实、创新”的科学精神从事研究工作。2、 本论文是我个人在导师指导下进行的研究取得的学术成果。3、 本论文中除引文外，所有试验、数据和有关材料均是真实的。4、 本论文中除注明作者和来源的引文外，不包含其他人、其他机构已经发 表或撰写过的研究成果。5、 其他同志对本研究所做的贡献已在论文中做了声明并表示了谢意。6、 本声明的法律后果由本人承担。 作者签名：年 月 日导 师 审 核 声 明 本人郑重声明：该生所呈交的学位论文，是在本人的指
3、导下独立进行研究工作所取得的成果。其中文字、图、表及其它相关内容均经本人审核，同意作为该生的学位论文提交。 导师签名： 年 月 日I2SPME-GC/MS测定三种不同蒿属植物挥发性物质付伟（湖北民族学院生物科学与技术学院，湖北恩施，445000）摘要:为了解艾蒿、臭蒿和黄花蒿三种蒿属植物挥发性物质的组成，探寻其与叶面腺毛体的关系，通过顶空固相微萃取和气相色谱-质谱联用法对其化学成分进行鉴定分析比较，并利用体式荧光显微镜观察三种蒿属植物叶面腺毛体数量。结果表明：1）黄花蒿挥发性物质种类和含量最多，艾蒿挥发性物质种类和含量其次，臭蒿挥发性物质种类和含量最少，三者主要成分均为单萜类化合物与倍半萜类化
4、合物；2）三种植物均含有顺-3-己烯酸乙酯、蒈烯、桉树脑、大根香叶烯、-石竹烯；3）艾蒿挥发性物质还含有罗勒烯、2，6-二甲基-1，5，7-辛三烯-3-羟基、樟脑、-榄香烯、丁香烯、桉叶稀、杜松烯、E-环氧法尼稀，臭蒿挥发性物质还含有羟基脲、-蒎稀、-榄香烯、丁香烯，黄花蒿挥发性物质还含有3-己烯-1-醇、2-辛烯-4-醇、5，5-二甲基-1-乙基-1，3-环戊二烯、邻异丙基甲苯、莰烯、D-柠檬稀、-蒎稀、E-法尼烯。4）三种植物中黄花蒿挥发性物质种类和含量最多，其腺毛体数量也最多，艾蒿挥发性物质种类和含量其次，其腺毛体数量也处于其次，臭蒿挥发性物质种类和含量最少，其腺毛体数量也最少。关键词：
5、艾蒿；臭蒿；黄花蒿；腺毛体；挥发性物质Determination of three kinds of different Artemisia volatile substance SPME-GC/MSFu Wei（College ofbiologicalscience and technology,Hubei Institute for Nationalities,Enshi,445000）Absract: In order to know the volatile substances of Artemisia argyiH. Lv. et Vaniot, Artemisia hedinii
6、 and Artemisia annuaL.and try to explore its relationship with the number of glandular trichomes on leaf. Using headspace solid-phase micro extraction and gas chromatography-mass spectrometry to analysis and identify the chemical components,and using type fluorescent microscope to observe the number
7、 of glandular trichome. The results show that: 1）the species of Artemisia annuaL volatile substances is most, the species of Artemisia argyiH. Lv. et Vaniot volatile substances is second, the species of Artemisia hedinii volatile substances is least.The main constituents are monoterpenes and sesquit
8、erpene;2)All contain cis-Ethyl 3-hexenoate, karen, Cineole, Germacrene, -Caryophyllene;3)Artemisia argyi volatile substances also contains Ocimene ,2,6-Dimethyl-1,5,7-octatriene-3-ol, DL-Camphor, -Elemene, Caryophyllene, -selinene, Cadinene, E- Farnesene，Artemisia hedinii volatile substances also co
9、ntain Hydroxycarbamide，-pinene,-Elemene, Caryophyllene,Artemisia annuaL. volatile substances also contains 3-Hexen-1-ol,2-Octen-4-ol,1-isopropyl-2-methylbenzene,-pinene,D-limonene,5,5-dimethyl-1-ethyl-1,3-cyclopentadiene,Camphene, E-Farnesene.4) The species and contents of volatile substances and gl
10、andular trichomes of Artemisia annua L.are most; The species and contents of volatile substances and glandular trichomes of Artemisia argyi are second; The species and contents of volatile substances and glandular trichomes of Artemisia hedinii.are least.Keywords: Artemisia argyiH. Lv. et Vaniot;Art
11、emisia hedinii;Artemisia annuaL.；glandular trichomes;volatile substancesIV目录1 文献综述11.1 艾蒿的生物学特性11.2臭蒿的生物学特性11.3黄花蒿的生物学特性21.4蒿属植物挥发性物质研究21.5研究意义32 材料与方法52.1 材料与设备52.2.1材料52.2.2设备52.2 GC-MS条件52.3方法52.3.1体式荧光测定三种蒿属植物的腺毛体数52.3.2三种蒿属植物挥发性物质测定53结果与分析73.1三种蒿属植物叶片形态观测73.2三种蒿属植物挥发性成分测定84讨论10参考文献10致谢13附件141 文
12、献综述1.1 艾蒿的生物学特性艾蒿（Artemisia argyiH. Lv. et Vaniot）俗名医草、野艾、蕲艾，多年生草本植物或者略成半灌木状，有浓烈香气。基部木质化而上部为草质，并有少量短分枝，茎枝上覆盖有灰色蛛丝状柔毛。一回羽状深裂，裂片卵形、卵状披针形或披针形，叶基部宽楔形渐狭成短柄，叶脉明显，在背面凸起；上部叶羽状半裂、浅裂或不分裂，而为椭圆形、长椭圆状披针形、披针形。瘦果长卵形或长圆形，花果期7-10月。艾蒿的适应性极强，向阳排水顺畅的地方都可以生长，以湿润肥沃的土壤生长较好，生长在路旁荒野、草地1。主要分布于安徽、广东、湖北、湖南等省，常见于低海拔到中海拔区域的荒地、路旁
13、河边及山坡等地，也见于森林草原及草原地区。艾蒿的主要药用部位是叶，经大量研究表明其含有挥发油、桉叶烷、黄酮、三萜类及微量化学元素等2。现代药理发现，艾蒿叶含大量挥发油并且为多种化合物的混合物，有脂肪族化合物、芳香族化合物，但更多为萜类衍生物，还含有大量的多酚类物质黄酮，有抗氧化、抑菌、清除自由基等的作用。对于抗菌作用、利胆作用、对呼吸系统影响等药理方面对艾蒿做了大量研究 。目前各报道中其全草和叶的挥发油主要成分及含量存在较大差异，这可能与艾蒿的种类、生长环境、气候条件、采集时间或者其它因素等有关3。 1.2臭蒿的生物学特性臭蒿（ Artemisia hedinii ）俗称海定蒿、牛尾蒿、克朗，
14、一年生草本植物，有浓烈的臭味。茎单生较稀少，高约15100cm。叶绿色，背面有腺毛状短柔毛；基生叶多数，羽状分裂，羽状深裂或者全裂；茎下部或者中部为长椭圆形，二回羽状分裂，第一回全裂，每裂叶多有多枚小裂叶，基部稍平展，椭圆形卵状瘦果，一般花期为710月。臭蒿产于内蒙古西南部、新疆南部、四川西部、云南西部等，其中青海和西藏最常见，多分布于海拔20005000m地区，多生于湖边、草地、田边、河滩等，局部地区可形成植物群落优势种群或者主要的伴生种。臭蒿煎剂、去挥发油水浸剂、挥发油等有促进胆汁分泌和利胆作用；对肝脏有影响、可用于治疗肝细胞肿胀、脂肪变、坏死等4；对正常体温有明显的降低，具有解热作用；有
15、一定的抗动脉粥样硬化作用，可以降血脂、扩张冠脉及促纤溶；水浸液、挥发油有降血压作用；有抗菌和消炎作用；其对平滑肌有相应的作用；具有促进白细胞分裂、免疫调节和诱生干扰素等作用，可以提高机体免疫功能；还有抗钩端螺旋体、平喘等；幼嫩枝、叶可以作为菜蔬或者酿制茵陈酒，或者可作为家畜的饲料。在民间入药，有清热、消炎、解毒的功效，主要治疗湿热黄疸、胆囊炎、痈肿毒疮等，还可以作为杀虫药。1.3黄花蒿的生物学特性黄花蒿（Artemisia annuaL.）俗称黄蒿、青蒿、草蒿等，一年生草本，有浓烈的挥发性香气。根单生、垂直、纺锤形；茎单生，有纵棱，幼时为绿色后变为褐色或着红褐色，多分枝；茎、枝、叶、两面及总苞
16、叶背面无毛或者初时背面微有稀疏短微毛，后脱落无毛；茎下叶都为圆形或者三角卵形，绿色，两面有细小脱落性的白色腺点及细小凹点；中部叶二回有羽状深裂，无柄。果实瘦小，椭圆形或者卵形，交扁，花果期811月5。黄花蒿具有极强的环境适应性，常常生长在路边、荒地、山坡等处，局部地区可以形成优势种群或者主要伴生种。广泛分布于欧洲、亚洲的温带、寒温带以及热带地区，欧洲中部、东部、南部及亚洲北部、中部、东部最多，向南延伸到地中海及非洲北部，亚洲南部、西南部各国；从亚洲北部迁入北美洲、并广泛分布于加拿大以及美国6。 黄花蒿富含挥发油、青蒿素、樟脑等，植株地面部分含有东茛菪内脂类化合物。青蒿素为倍半萜内脂化合物，可治
17、疗各种类型疟疾，具有速效和低毒的特点，对恶性疟及脑疟尤佳。现已在青蒿素的基础上开发出了多种衍生物，均具有抗疟、抗孕、抗心律失常等作用。黄花蒿的水煎液对白喉杆菌、炭疽杆菌等有较强的抑菌作用，也有抗流感病毒的作用。1.4蒿属植物挥发性物质研究蒿属植物生长环境不同和提取方法不同，挥发性物质及相对含量会出现很大差异，艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物中研究较多的为黄花蒿，其挥发性物质主要为萜类及其含氧衍生物，其中单萜及其衍生物和倍半萜及其衍生物最多，还含有小分子脂肪族化合物和小分子芳香族化合物。挥发性物质大多是无色或着淡黄色，室温就可以挥发，极大多数比水轻，仅少数比水重。挥发性物质可以随水蒸气蒸馏出来，却
18、很难溶于水，能溶于乙醇、氯仿、脂肪油等，其中某些成分对人类社会发展有着巨大的贡献。黄花蒿含有大量挥发性物质，化学成分复杂，可分为蒿酮、樟脑、茨烯、丁香烯等成分，因其以烯类为主，故具有芳香气味7，如甜没药萜醇、甜没药萜醇氧化物A、甜没药萜醇氧化物B等挥发性物质含量较高，具有灭菌、消炎、愈合溃疡等功能，可用于口腔卫生产品，具有很大的开发和应用价值，也可以作为空气清香剂的主要成分，在医药工业、香料、香精和化妆品中广泛应用。黄花蒿挥发性物质含有以亚油酸为主的多种脂肪酸，亚油酸是人体必需脂肪酸，与平滑肌收缩、类固醇激素、前列腺素以及其他生命机能有关，还具有颇高保健功能8。黄花蒿挥发性物质具有兰花香味，蒿
19、粉可以作为磨擦剂或着护理剂用以制备牙膏应对口臭、口腔异味，口气倍感清新、持久9。挥发性物质清爽气、芳香味、香气浓郁，可用于化妆品、香皂、香水、空气清新剂等10。含有挥发性物质的中草药或着提取出挥发性物质大多具有止痛、抑菌、矫味等作用，是防暑良药11。1.5研究意义 目前国内外高校和科研机构研究院所对蒿属植物的研究主要在于挥发油、化学成分、药理作用、栽培技术等方面，其中对蒿属植物中的黄花蒿的相关研究最多，却很少将多种蒿属植物中挥发性物质与叶面腺毛体数量联系在一起。 本文采用顶空固相微萃取法在室温条件下利用萃取头对艾蒿、黄花蒿和臭蒿三种蒿属植物挥发性物质进行萃取，然后进行气相色谱质谱联用分析蒿属植
20、物挥发性物质分析，比较三种蒿属植物挥发性物质的异同点。实验中对三种蒿属植物叶面腺毛体数量观察，将其与三种蒿属植物叶片挥发性物质联系在一起。蒿属植物为宝贵的中药材，气相色谱质谱联用法（GC-MS）可有效地分析蒿属植物挥发性成分，从而探讨蒿属植物的挥发性物质成分及其含量，为艾蒿、臭蒿、黄花蒿的鉴别提供可靠依据，也为其在医药、工业、科研等方面的开发利用提供研究依据和理论指导，对开发利用我国丰富的蒿属植物资源具有重要的现实意义和理论价值，使蒿属植物生物资源的开发利用有一定经济价值和社会效益。2 材料与方法2.1 材料与设备2.2.1材料 新鲜的采自栽培基地的黄花蒿，校内实习基地采摘的新鲜艾蒿和臭蒿。2
21、.2.2设备 数显鼓风干燥箱（GZX-9420MBE，上海博迅实业有限公司医疗设备厂）；分析天平（ME204E/02，梅特勒-托利多有限公司）；尼康 Nikon AZ100型体式荧光DIC成像系统（上海衡浩仪器有限公司）；Agilent6890N/5975C型气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司）；DBV/CAR/PDMS 50/30m萃取头（美国Supelco公司）。2.2 GC-MS条件色谱条件：HP-5MS石英毛细管柱（0.25m0.25mm30m),载气为氦气，流速为1mLmin-1，进样口温度为250，不分流进样。程序升温条件（40保持2min，再以5min-1升温至130，保持1m
22、in；再以15min-1升温至280，保持2min）质谱条件：离子源EI源，电子能量70eV，离子温度230，四级杆温度为150，倍增管电压1.2kV，扫描质量范围m/z35550。2.3方法2.3.1体式荧光测定三种蒿属植物的腺毛体数为了观察艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物叶面腺毛体并加以比较分析，分别选取三种蒿属植物生长较旺盛的叶，轻轻去掉叶片上面的杂质进行压片制片，在AZ100型体式荧光DIC成像系统下分别观察叶上、中、下部位，并加以分析统计。2.3.2三种蒿属植物挥发性物质测定2.3.2.1器材预处理在校内实习基地选取生长较旺盛的艾蒿和臭蒿植株带回实验室，同时选取生长程度相似的栽培在实习
23、基地的黄花蒿植株。将50mL试剂瓶洗涤干净并用蒸馏水润洗，然后将其放置在数显鼓风干燥箱中60烘干，实验开始前数分钟将其取出放置在室温条件下冷却备用。2.3.2.2取样分别选取艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物生长较旺盛的叶，轻轻去掉叶片上面的杂质并放入分析天平中进行称重，并记录数据。2.3.2.3萃取将已称取的蒿属植物叶片加入到50mL试剂瓶中并称取适量的无水氯化钙加入其中，然后用8层封口膜对试剂瓶瓶口进行密封，并用2根橡皮筋将瓶口的封口扎紧，迅速插入已在进样口（250）老化30min的萃取杆，推出萃取头，在常温下萃取30min。2.3.2.4测定将已经萃取完毕的萃取头推回，将萃取杆迅速插入气相色
24、谱-质谱联用仪的进样口，推出萃取头，解吸3min，进行测定。然后重复上述步骤，依次其余的蒿属植物叶片挥发性物质。3结果与分析3.1三种蒿属植物叶片形态观测 为了辅助分析艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物挥发性物质的差异，分别拍摄了艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物叶片正反面的形态图和叶片正反面的显微图，如图1所示。从艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物叶片正反的形态图可以清楚的观察到叶片羽状深裂呈齿状。艾蒿叶片较大，羽状深裂呈披针形，羽状叶片较宽较长，叶顶端呈针尖状12。臭蒿叶片较小，羽状分裂，羽状叶片裂片长圆形较短较宽，有锯齿，小裂片呈线状披针形，叶顶端呈圆形。黄花蒿叶片分叉较多，羽状深裂，裂片长椭圆状卵
25、形且较细较长，再次分裂，小裂片边缘具有多枚长三角形或着三角形深裂齿，裂片矩圆形或着长椭圆形，两面被短毛，叶顶端呈针尖状；艾蒿叶片正面为深绿色，背面为白色。臭蒿叶片正面为浅绿色，背面呈白色。黄花蒿叶片正面为深绿色，背面为浅绿色。图1 三种蒿属植物叶片正反面的形态Fig.1 the morphology of the forward & reverse leaves surfaces of three plants in Artemisia 从艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物叶片正反面的显微图可以清楚的观察到，艾蒿叶片正面为深绿色，有白色腺点和少量白色短柔毛，叶片背面有大量而密度较小的密被灰白色蛛丝
26、状密绒毛而呈白色，并有白色腺点13；臭蒿叶片正面为浅绿色，有白色腺点和许多柔毛，叶片背面有大量而密度较大的腺毛状短柔毛而呈白色，还有许多白色腺点；黄花蒿叶片为暗绿色，但叶片正面比其叶片反面颜色较深，叶片两面有短毛和椭圆形的气孔。叶片正面和反面均布满腺毛和非腺毛，腺毛呈椭圆形，T形非腺毛位于叶脉附近。叶面均有大量有白色腺点，但叶片反面有白色腺点较正面较多。图2 三种蒿属植物叶片正反显微图Fig.2 the micrograph of the forward & reverse surfaces of three plants in Artemisia3.2三种蒿属植物挥发性成分测定将艾蒿、臭蒿、
27、黄花蒿三种蒿属植物挥发性物质按照上述方法进行测定，对总离子流图中的各峰经过质谱扫描后得质谱图。为了更好进行直观的比较，将三种蒿属植物挥发性成分总离子流质谱图进行叠加，经质谱数据库检索，并结合有关文献从基峰、相对丰度等几个方面进行直观比较，确定了三种蒿属植物挥发性成分的化学组成，其结果见图3。图3 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig. 3 Total ion flow superposition graph of three Artemisia volatile substances经固相微萃取法提取艾蒿、臭蒿和黄花蒿三种蒿属植物的挥发性物质，并用气相色谱-质谱联用法得总离子图对其化学成
28、分进行鉴定，将各自的总离子流图谱进行分析，得出成分分析表，见表3.1。从三种蒿属植物挥发性物质成分含量分析表中可知三种蒿属植物挥发性物质的主要成分均为萜类化合物，但单萜类化合物与倍半萜类化合物的含量很大，艾蒿挥发性物质中单萜类化合物（11.42%），倍半萜类化合物（83.83%），臭蒿挥发性物质中单萜类化合物（13.25%），倍半萜类化合物（63.42%），黄花蒿挥发性物质中单萜类化合物（35.93%），倍半萜类化合物（23.18%）。三者均含有顺-3-己烯酸乙酯、蒈烯、桉树脑、大根香叶烯、-石竹烯，但含量差别很大，艾蒿挥发性物质还含有罗勒烯、2，6-二甲基-1，5，7-辛三烯-3-羟基、樟脑
29、、-榄香烯、丁香烯、桉叶稀、杜松烯、E-环氧法尼稀，臭蒿挥发性物质还含有羟基脲、-蒎稀、-榄香烯、丁香烯，黄花蒿挥发性物质还含有3-己烯-1-醇、2-辛烯-4-醇、5，5-二甲基-1-乙基-1，3-环戊二烯、邻异丙基甲苯、莰烯、-蒎稀、D-柠檬稀、法尼烯。艾蒿挥发性物质与臭蒿挥发性物质较多成分相同，但其含量不同。黄花蒿挥发性物质与艾蒿和臭蒿挥发性物质成分差异较大，只有极少成分相同且含量不同。表3.1 三种蒿属植物挥发性物质成分含量分析Table3.1 Analysis volatile matter content of three Artemisia 三种蒿属植物挥发性物质化学式蒿属植物挥发
30、性物质含量备注艾蒿臭蒿黄花蒿羟基脲CH4N2O2018.310其它3-己烯-1-醇C6H12O002.85醇类顺-3-己烯酸乙酯C8H14O24.563.5420.44酯2-辛烯-4-醇C8H16O002.43醇类5,5-二甲基-1-乙基-1,3-环戊二烯C9H14004.73烯烃邻异丙基甲苯C9H140010.44烯烃莰烯C10H16003.19单萜类化合物罗勒烯C10H161.5300单萜类化合物-蒎稀C10H1602.442.2单萜类化合物蒈烯C10H163.272.192.94单萜类化合物D-柠檬稀C10H16001.07单萜类化合物2,6-二甲基-1,5,7-辛三烯-3-羟基C10H
31、16O1.6400单萜类化合物樟脑C10H16O3.01025.39单萜类化合物桉树脑C10H18O1.978.621.14单萜类化合物大根香叶烯C15H2430.3421.254.05倍半萜类化合物-石竹烯C15H2429.6925.869.41倍半萜类化合物-榄香烯C15H246.686.10倍半萜类化合物丁香烯C15H245.3210.210倍半萜类化合物桉叶稀C15H243.5800倍半萜类化合物杜松烯C15H246.0700倍半萜类化合物E-法尼烯C15H24009.72倍半萜类化合物E-环氧法尼稀C15H24O2.1500倍半萜类化合物4讨论经过对艾蒿、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物叶片
32、挥发性成分总离子流质谱图进行叠加，谱数据库检索，并结合有关文献从基峰、相对丰度等几个方面进行直观比较，艾蒿挥发性物质占总检出含量的99.81%，其叶片腺毛体数量居中；臭蒿挥发性物质占总检出量的98.56%，其叶片上腺毛体数量也最少；黄花蒿挥发性物质占总检出量的100%，其叶片上的腺毛体数量最多，可以得出这三种蒿属植物挥发性物质的种类和含量与其叶面上腺毛体的数量相关。目前许多研究表明植物挥发性物质主要存在种子植物中和植物的腺毛、油管、分泌细胞、油室或着树脂道中，挥发性物质可以通过从腺毛体而挥发14，而本文尚不能确定三种蒿属植物挥发性物质与其叶面上腺毛体的数量的具体相关，还需要进一步实验确定。艾蒿
33、、臭蒿、黄花蒿三种蒿属植物挥发性物质可以通过顶空-固相微萃取法提取，也可以用水蒸气蒸馏法提取。水蒸气蒸馏法首先将水蒸气通入水中浸泡过一段时间或着未浸泡的样品，使不溶或着难溶于水但有一定挥发性的有机物质在低于100时，随水蒸气蒸馏出来，再用低沸点有机溶剂萃取，蒸馏出溶剂得到挥发性成分，并无水硫酸钠干燥得挥发油，最后用适量乙醚溶解稀释，并用无水硫酸钠脱水后供GC-MS分析用。水蒸气蒸馏法受热时间长容易导致热敏物发生氧化、聚合等反应，不能客观表征蒿属植物挥发性物质的真实组成及含量15。冯文宇等用水蒸气蒸馏法对GC-MS分析酉阳青蒿挥发油的化学成分分析，鉴定出主要成分樟脑（12. 12%）、蒿酮（43
34、.04%）、桉叶素（7.44%）等化合物16。崔兆杰等. 用水蒸气蒸馏法对青蒿挥发油化学成分的GC/MS研究，鉴定出蒿酮(4. 06% )、石竹烯(8. 18% )、香橙烯(4.77% )等化合物17。张燕等用水蒸气蒸馏法对新疆产黄花蒿挥发油成分研究，鉴定出桉叶素(1.68% )、-月桂烯(10.13% )、圣亚麻三烯(1. 52% )等化合物18。魏兴国等用水蒸气蒸馏法对山东产青蒿挥发油成分分析,鉴定出咕巴烯(9.06% )、-蒎烯(5. 11% )、大根香叶烯D (3. 36% )等化合物19。由于提取方法的不同，青蒿挥发性物质差异较大，但均以倍半萜和单萜为主，主要成分是樟脑、莰烯、蒿酮、
35、蒎烯、石竹烯、石竹烯氧化物、1，8-桉叶素和大根香叶烯D等化合物，两种方法提取的物质组成及各成分的相对百分含量均存在一定差异，但主要挥发性成分差别不明显20。参考文献1陈纯. 艾蒿的抑菌作用及其在果蔬保鲜中的应用J. 福建农林大学, 2009, 37(04)：16.2王涛玉. 浅谈含艾蒿牙膏的配方与制造J. 河北化工, 2007, 30(1):17.3王绍政, 张邦全, 沈艳艳. 艾蒿在口腔护理用品中的应用J. 口腔护理用品工业, 2010, 20(02):24-25.4张铁. 活血化瘀中药对清热利胆中药增效作用的实验研究J. 天津医科大学, 2005, 19(06):319.5魏翠利. 河南
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38、, 杨占南, 等. 水蒸汽蒸馏法及顶空-固相微萃取法提取青蒿花挥发性成分比较分析J. 光谱实验室. 2011,31(05):1276-1279.16原玲芳, 尹壮壮, 高健, 等. GC-MS法分析小蓬草茎叶挥发油的化学成分研究J. 北方园艺,2010,30(09):332. 17崔兆杰, 邱琴, 刘廷礼, 等. 青蒿挥发油化学成分的GC/MS研究J. 中成药. 2001,23(4):278-280.18张燕, 张继, 姚健, 等. 新疆产黄花蒿挥发油成分研究J. 西北师范大学学报(自然科学版), 2004, 14(1): 67-69.19董岩, 王新芳, 魏兴国. 山东艾蒿挥发油化学成分的G
39、C-MS研究J. 中成药, 2005, 27(3):326-328.20李燕, 胡浩斌, 郑旭东,等. 青蒿挥发油研究进展J. 安徽农业科学, 2011, 39(7) : 3960-3961.致谢时间一愰而过，大学生活即将走到尾声，在这四年中硕果相伴。在此，首先要感谢湖北民族学院给予我一个继续求学的机会，使我能够进入这所大学，并在大学生活中得到了很好的锻炼。感谢湖北民族学院生物科学与技术学院在大学四年对我的培养，使我不论是学习还是生活上都得到了锻炼，使我更加独立。感谢湖北民族学院生物科学与技术学院物工程专业周毅峰、唐巧玉、李伟、刘金龙、赵玉宏等全体老师对于我的谆谆教诲。在今后的道路中，我将继续
40、从事生物学相关的学习以及工作，诸位老师在学业上的亲力教授，都将会是我赖以生存的技能，会在对我未来的人生一直起指引作用。特别要感谢周老师和唐巧玉老师，在如此仓促的时间内因种种原因实验换了一个又一个，您能够不厌其烦的给我提供新的毕业论文题目并加以巨大指导，使我的研究能得以顺利完成。周老师的严谨求真，勇于创新的科研精神是我收获到的又一笔财富，受益匪浅。在此，再一次对两位恩师表示最诚挚的感谢。感谢班主任李伟老师，感谢在我大学生活中扮演了亦师亦友角色的老师。在刚进大学时，我因种种原因想放弃大学学习步入社会生活，是您给我许多思想指导使我能够有机会继续大学生活，是您在我遇到一次又一次困难时帮我走出困境，重新
41、点燃信心前行。同时也感谢程晨、肖凯伦、李佳洋等同学给我提供的大量帮助与支持，正是因为有他们的无私帮助，使我能够在短时间完成毕业论文，在此向他们表示感谢。感谢父母、亲戚、朋友对我的大力支持，使我能够大学生活中得到了很好的锻炼。经过大学的锻炼，使我得到了很大的提升。这接下来的征程的中，我将继续努力。最后，再一次感谢所有关心和帮助过我的人，也再一次感谢整个生物科学与技术学院的老师及领导在我大学期间的所有物质及精神上的关怀，使我能顺利毕业。附件 图A1 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig.A1 Total ion flow superposition graph of three Artemi
42、sia volatile substances图A2 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig.A2 Total ion flow superposition graph of three Artemisia volatile substances图A3 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig.A3 Total ion flow superposition graph of three Artemisia volatile substances图A4 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig.A4 Total ion flow superposition graph of three
43、Artemisia volatile substances图A5 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig.A5 Total ion flow superposition graph of three Artemisia volatile substances图A6 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig.A6 Total ion flow superposition graph of three Artemisia volatile substances图A7 三种蒿属植物挥发性物质总离子流叠加图Fig.A7 Total ion flow superposition graph of three Artemisia volatile substances21