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1、6010紫外/可见分光光度计操作规程之键盘控制器的使用说明键盘控制器的使用说明- P9 O9 J3 J+ - 5 k7 sN6010紫外/可见分光光度计的键盘控制器与主机为分体式结构。它由键盘和显示器两部分组成。键盘控制器与主机由一根专用的电缆线连接。仪器主机的工作状态全部由操作器上的键盘设定，仪器的功能状态方式（菜单）及测量结果均在液晶显示器上显示。要得心应手地使用好本仪器，必须很好地掌握怎样使用好键盘控制器。4 l, i1 |( k0 c, g用户可按自己的工作方便，把键盘控制器放上主机或主机的左、右侧工作台面上操作。! l1 b, . ( & S: 键盘部分：7 - * # N5 q#
2、r此键盘上共有25个键，其中两个键是光源灯控制键，12个键是数字键，4个键是调整显示器上菜单选择“光标”的位移方向键，7个是方式功能键。现分别将各键的功能叙述如下：* O) c4 6 D+ P7 p4 G0 r8 d: wUVVis键: B$ t- T; Y$ G这是灯源开关键，UV为紫外光源氘灯的开关键，Vis为可见光源溴钨灯的开关键，这两个键为逆向开关，即光源灯已开始按此键，光源灯则被关。反之则被开。当仪器通电开启时，随着光源灯的开与关，此时光源反射镜的偏转也相应变化如下：: G! p- h8 Yl ha. 两只光源灯均开着工作时，当波长大于等于341.1nm时，光源反射镜把可见光源射入狭
3、缝供仪器工作。当波长小于341.1nm时，光源反射镜把紫外光源射入狭缝供仪器工作。, T6 G! o+ j3 y! E6 w. j: Ob. 在任何工作波长处，当关掉一只光源灯时，光源反射镜必然将另一只开着的光源灯能量射入狭缝供仪器工作。例：在波长656.1nm处若按动Vis键，则此时溴钨灯被关掉。光源反射镜自动转向氘灯。使紫外光射入狭缝供仪器工作。9 F# M4 |1 1 D4 g$ H: l6 cc. 若某一光源灯已被关掉，当选择或波长扫描进入该此灯工作的波长341.1nm转换处时，该灯将自动点亮供仪器工作。例如需在工作波长点235nm处，较长时间工作，为节约溴钨灯的工作寿命可按动Vis键
4、关掉溴钨灯。当仪器要转到580nm处工作，只要您选择好相应的工作波长，当波长记数一到341.1nm处，溴钨灯就会自动点亮，供仪器在580nm处正常工作。5 Z! F- a. o( / Q0、1、29、。、-键& v: ( N# P/ h 2 p; Y共计12个键，均为数字键区的键。可在仪器的规定范围内，自由选择某一特定的参数，常用的波长值，A或T、E值上、下限定值及浓度参数等。其中-键是数字符号键，是逆向键，即正数时按此键为负数，正数符号“+”作省略处理。* z9 W( 6 # o8 R# & t?、?、?、?键6 h V9 d X4 i: 共计4个键，用来移动光标的上、下、左、右，使仪器操作
5、者能够选择需要的功能菜单项，并输入相应的数值。按动上述某一键，光标跳动一挡（格），即可输入或修正某一数字。: |1 0 u5 / 9 V/ bEnter键! Z X* 7 V. t, 5 u, p K) W; n9 W4 w该键为输入有效键，在你输入数字或选择好某菜单后，只要你认为输入内容准确无误，便可启用该键肯定下来。若你的输入和选择被仪器接受，便立即可进入一个输入过程。# X+ t. u; l, DZ5 + D( oESC键& & h8 tM5 H7 y! I9 T该键为清除键，当你输入的菜单方式和数字错误时，或您目前想改变上述输入时，按动此键即返回到前一级菜单，可重新选择设定。# a.
6、i$ n2 v$ i( B- b8 $ IGoto 键/ M X4 K! Q& i9 ?( E0 R在仪器进行单波长测定时，若您准备变化一个工作波长点，按此键后，即能让您重新设定一个新的工作波长点。3 k/ T( A8 J4 v: ( 5 jAuto Zero键8 U1 Y5 B* E3 C仪器在测定样品过程中，难免会发生能量及电性能的漂移变化，给测定带来误差，此键的作用就是纠正这种偏差。当您在进行波长自动扫描定性或定量测定过程中，可把参比样品置于样品池内，按下此键，使读数自动回到100%且自动调整0%。! S5 w+ ( ! M: ) v+ Uu在扫描测定时，当把参比样品置于样品池内，即能自
7、动建立该段工作波长范围的100%或0.000A（所谓空白）。/ o. E5 F8 + G_/ J4 gStart键2 5 H/ H) ?1 x. R9 K3 z运动键。在完成一个测定过程的参数输入以后，按动此键，仪器就执行所设定的程序。在完成一个测定过程后，若要继续下一个测定过程，只要再按此键，就可以继续测定一次。如完成一个扫描测定样品以后，按下此键，可以再进行下一个样品的测定。 h0 q. M* T1 zStop键/ v* q( * C1 R6 E程序动作停止键。当完成了一种方式的测定以后，想选择另一种菜单方式的测定程序，或想停止正在进行的程序动作。按动此键后，仪器当前的测定程序即刻停止，仪
8、器将等待您选择了新的程序方式后，再继续工作。+ q3 T) s3 B: xz* h3 EPrint键$ 0 R, l. b8 P7 X3 n* i9 b专用打印键。在波长扫描测定结束后，按照打印方式键入此键，将打印相应的扫描测定光谱图或各相应波长的测试数据。在单波长、二波长、三波长、多波长定量测定结束后，该键将使您得到透射比和吸光度、浓度值或对应的曲线图。在测定数据运算处理后还可得到相应的导数光谱图。0 B/ W Y- r. tp& |在进行单波长、多波长和药典计算测量过程中，如需打印，可按Print键及时打印当前测量值，否则，可在测量结束后打印全部测量值。) y# W0 T! p0 N9 r
9、9 e7 E# d1 |7 e3 r显示器部分7 V/ tZ+ EI# - Y本仪器的显示器采用204位的液晶显示屏。; J- |# U! f. a5 Y在操作仪器时，显示屏用英文把有关的功能程序（菜单）项目和相应的工作条件参数设定位，用闪动的光标展现出来，并指示你按序选择、设定、操作键盘，完成对样品的测定。 wq* W q0 y; M+ 5 r显示屏的显示，使您与6010紫外/可见分光光度计在极为方便快捷的人机对话过程中进行，并完成您对各种样品的分析测定。仪器名称：紫外/可见分光光度计系统仪器型号：Lambda 25 生产厂家：perkinElmer使用方法：开机步骤1 开光谱仪电源2 开计
10、算机电源3 在文件管理器中用鼠标指按UV WinLab图标，此时出现UV WinLab的应用窗口，仪器已准备好，可选用适当方法进行分析操作。2 方法：在分析中必须对分光光度计设定一些必要的参数，这些参数的组合就形成一个“方法”。Lambda系列UV WinLab软件预设四类常用方法。1）扫描（SCAN）,用以进行光谱扫描。2）时间驱动（TIME DRIVER）,用以观察一定时间内某种特定波长处纵坐标值的变化，如酶动力学。3）波长编程（WP）用以在多个波长下测定样品在一定时间内的纵坐标值变化，并可以计算这些纵坐标值的差或比值。4）浓度（CONC）用以建立标准曲线并测定浓度。2.1 进入所需方法，
11、在方法窗口中选择所需方法的文件名。2.2 方法的设定 2.2.1 扫描、波长编程及时间驱动 各项方法可根据显示的参数表，逐项按需要选用或填入，并可参考提示。 2.2.2 浓度 浓度方法窗口下方标签较多，说明做浓度测定时需要参数较多。用鼠标指按每一标签，可翻出下页，其上有一些需要测定的参数。必须逐页设定。3 工具条 3.1 SETUP 当所需的各项参数都已在参数中设好后，必须用鼠标指按SETUP，才能将仪器调整到所设状态。 3.2 AUTOZERO 用鼠标指按此键，分光光度计即进行调零（在光谱扫描中则进行基线校正）。 3.3 START 用鼠标指按此键，光度计即开始运行所设定的方法。4 方法运行
12、 4.1 扫描，时间驱动，波长编程 方法选好后，先放入参比溶液，按AUTOZERO键，进行自自动校零或背景校正结束后再放入样品，按START，分光光度计即开始进行，同时屏幕上出现图形窗口，将结果显示出来。 4.2 浓度 4.2.1制订标准曲线 1 方法选好后，确认各项数据正确，特别是REFS页中第一行要选中右上角的“edit mode”。再放入参比溶液，按AUTOZERO键自动校零或背景校正。 2 按setup,待该图标消失后，再按“start”,按提示依次放入标准色列的各管溶液，每次都按提示进行操作。 3 标准色列测定 完毕后，屏幕上出现calibgraphwindow,显示拟合的标准线，并
13、标出各项标准管的位置，屏幕下方还有一条Concentration mode的对话框，可以用来修改拟合的曲线类型（按 change calbration）,或修改标准溶液的任何一管（replace）,或取消某一管（delete）,或增加标准溶液管数（add）。如过已经满意，则按analyse sample键，进入样品测定窗口。 4 标准曲线有关的各项数据，均在calibresultwindow中，可用鼠标将其调出观察。其中包括每个标准溶液的具体数据，标准曲线的回程方程式，相关系数，残差。 4.2.2样品浓度测定 4.2.2.1刚制定好的标准曲线接着进行样品浓度测定时 1 只需在concentra
14、tion mode对话框按analyse sample键，进入样品测定窗口。 2 按设定的样品顺序放入各样品管，每次按提示进行操作。 3 屏幕上出现结果窗口，结果数据将依次显示在样品表中的相应位置。 4.2.2.2利用原有的标准曲线接着进行样品浓度测定时 4.2.2.2.1 调出所测定样品的浓度方法文件，首先调出refs页，将原设edit mode选项取消，改设左上角的using exiting calibration。重新将方法存盘，则今后再调用时即不需再作修改。 4.2.2.2.2 在sample页中按要求重设各种样品名称机样品信息。 4.2.2.2.3 按工具条中setup键，将主机设到
15、该方法所设定的条件。 4.2.2.2.4 将参比溶液放入比色室，按autozero键做背景校零。 4.2.2.2.5 按start键，按设定的样品顺序放入各样品管，每次按提示进行操作。 4.2.2.2.6 屏幕上出现结果窗口，结果数据将依次显示在样品表中相应位置。 5关机 5.1 将方法及数据存盘 5.2 关闭方法窗 5.3 退出UV WinLab 5.4 取出样品及参比溶液 5.5 清洁光谱仪，特别是样品室 5.6 关闭光谱电源 5.7 关闭计算机电源01 紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计的应用 http:/ 要 本文介绍了紫外可见分光光度法的特征、原理及应用，并 列举多项实例说紫
16、外可见分光光度法在各个领域中的应用。 关键词 有机分析 吸收光谱 紫外可见分光光度法 1.概述 人们在实践中早已总结出不同颜色的物质具有不同的物理和化学性质。 根据物质的这些特性可对它进行有效的分析和判别。由于颜色本就惹人注意，根据物质的颜 色深浅程度来对物质的含量进行估计，可追溯到古代及中世纪。1852年，比尔(Beer)参考了 布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章，提出了分光光度的基本定 律，即液层厚度相等时，颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例，从而奠定了分光光度法的理 论基础，这就是著名的比尔朗伯定律。1854年，杜包斯克(Duboscq)和奈
17、斯勒(Nessler)等人 将此理论应用于定量分析化学领域，并且设计了第一台比色计。到1918年，美国国家标准局 制成了第一台紫外可见分光光度计。此后，紫外可见分光光度计经不断改进，又出现自动记 录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器，使光度法的灵敏度和准确度也不断 提高，其应用范围也不断扩大。 紫外可见分光光度法从问世以来，在应用方面有了很大的发展，尤其是在相关学科发展的基 础上，促使分光光度计仪器的不断创新，功能更加齐全，使得光度法的应用更拓宽了范围。 目前，分光光度法已为工农业各个部门和科学研究的各个领域所广泛采用，成为人们从事生 产和科研的有力测试手段。我国在分析化学领域有着
18、坚实的基础，在分光光度分析方法和仪 器的制造方面国际上都已达到一定的水平12 2.原理 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量， 相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其 特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或 测 定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比
19、尔(Lambert-Beer)定律。即物质在一定浓度 的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比，其数学表示式如下： A= 錬c 式中：A吸光度(又称光密度、消光值)， ?摩尔吸光系数(其物理意义为：当吸光物质浓度为1摩尔/升，吸收池厚为1厘米 ，以一定波长原光通过时，所引起的吸光值A)，b吸收介质的厚度(厘米)，c吸光物质的 浓度(摩尔/升)。 物质的颜色和它的电子结构有密切的关系，当辐射(光子)引起电子跃迁使分子(或离子)从基 态上升到激发态时，分子(或离子)就会在可见区或紫外呈现吸光，颜色的发生或变化是和分 子的正常电子结构的变形联系的。当分子中含有一个或更多的生色基因(即具有不饱和键的 原子基
20、团)，辐射就会引起分子中电子能量的改变。常见的生色团有： CO， -N=N-， -N=O，-C N，CS 如果两个生色团之间隔一个碳原子，则形成共轭基团，会使吸收带移向较长的波长处(即红 移)，且吸收带的强度显著增加。当分子中含有助色基团(有未共用电子对的基团)时，也会 产生红移效应。常见的助色基团有：-OH -NH2， -SH， -Cl, -Br, -I 3.特点 分光光度法对于分析人员来说，可以说是最有用的工具之一。几乎每一个分析实验室都离不 开紫外可见分光光度计。分光光度法的主要特点为： (1)应用广泛 由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收，因此均可借此法加以测定。到目前 为
21、止，几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法 。在国际上发表的有关分析的论文总数中，光度法约占28%，我国约占所发表论文总数的33% 。 (2)灵敏度高 由于新的显色剂的大量合成，并在应用研究方面取得了可喜的进展，使得对元素测定的灵敏 度有所推进，特别是有关多元络合物和各种表面活性剂的应用研究，使许多元素的摩尔吸光 系数由原来的几万提高到数十万。 (3)选择性好 目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定，如钴、铀、镍、铜 、银、铁等元素的测定，已有比较满意的方法了。 (4)准确度高 对于一般的分光光度法，其浓度测量的相对误差在13%范围
22、内，如采用示差分光光度法进 行测量，则误差可减少到0.X%。 (5) 适用浓度范围广 可从常量(1%50%)(尤其使用示差法)到痕量(10-810-6%)(经预富集后)。 (6) 分析成本低、操作简便、快速 由于分光光度法具有以上优点，因此目前仍广泛地应用于化工、冶金、地质、医学、食品、 制药等部门及环境监测系统。单在水质分析中的应用就很广，目前能有直接法和间接法测定 的金属和非金属元素就有70多种。 4 应用 4.1 检定物质 根据吸收光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长雖ax和摩尔吸收系数澹 是检定物质的常用物理参数。这在药物分析上就有着很广泛的应用。在国内外的药典中，已 将众多的药
23、物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中，为药物分析提供了很好的 手段。 4.2 与标准物及标准图谱对照 将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收 光谱。若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。如果没有标样，也可以和现成的标 准谱图对照进行比较。 这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。 4.3 比较最大吸收波长吸收系数的一致性 由于紫外吸收光谱只含有23个较宽的吸收带，而紫外光谱主要是分子内的发色团在紫外区 产生的吸收，与分子和其它部分关系不大。具有相同发色团的不同分子结构，在较大分子中 不影响发色团的紫外吸收光谱，不同的分子结构有
24、可能有相同的紫外吸收光谱，但它们的吸 收系数是有差别的。如果分析样品和标准样品的吸收波长相同，吸收系数也相同，则可认为 分析样品与标准样品为同一物质。 例1 己二烯-1，5(CH2=CHCH2CH2=CH2)的最大吸收波长雖ax为178nm(摩尔吸收 系数为26000)，而己烯-1(CH2=CHCH2CH2CH2CH3)的最大吸收波长为雖ax 为177nm(摩尔吸收系数逦11800)。此两个物质有相同的发色团，雖ax值基本相同，但 值不同，二烯的逯当鹊拇蟆馑得饔邢嗤牡舜瞬还查畹姆牛湮詹咏 于单个发色团的值，但逯翟蛩嫦嗤攀康脑黾佣黾印绻屑父龇疟舜斯查 ，则吸收长向红移动。象丁二烯-1，3(CH2
25、=CHCH=CH2)与己二烯-1，5(CH2=CHCH2 CH2CH=CH2)相比，同样有两个双键，但丁二烯-1，3中为共轭体系，它的最大吸收长雖 ax为210nm，而摩尔吸收系数逯翟蛴爰憾-1，5基本一样。 4.4 纯度检验 例2 紫外吸收光谱能测定化合物中含有微量的具有紫外吸收的杂质。如果化合物的紫外可 见光区没正在加载评论.正在加载.分光光度法在药物分析中应用应注意的环节折叠 摘 要 药品检验中应用紫外分光光度法，分析前应注意光度计的校正和检定、容量仪器及分析天平的检定，分析过程中应注意吸收池配对、溶剂是否符合要求、核对供试品吸收峰波长以及吸收池的使用方法、洗涤方法等环节。 关键词 紫外
26、分光光度法；注意事项 紫外分光光度(UV)法是通过被测物质在紫外光区的特定波长或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。紫外光谱是物质在200400 nm的近紫外光区和400800 nm的可见光区的吸收光谱。UV图提供两个重要数据：吸收峰的位置和光吸收强度。由于药物分子中多含有紫外光区的生色基，因此紫外分光光度法广泛应用于药品检验。 使用UV法应注意以下环节： 1 仪器的校正和检定 11 波长 由于温度变化对机械部分的影响，仪器的波长经常会略有变动，因此除应定期对所用的仪器进行全面校正检定外，还应于测定前校正测定波长。 12 吸收度 吸收度的准确度可用重铬酸钾的硫酸溶液检定
27、。 13 狭缝宽度 选择仪器的狭缝宽度，应以减小狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于中国药典UV法测定的大部分品种，可以使用2nm缝宽，但对某些品种如青霉素钾及钠的吸收度检查则需要1nm缝宽或更窄，否则其264nm的吸收度会偏低。 14 天平和玻璃仪器的检定 所用的容量仪器及分析天平应经过检定，如有偏差应加上校正值。 15 吸收池配对 石英吸收池对紫外光亦有吸收，1 em的吸收池在波长220270 nm的范围内，以空气作为100，其透光率往往小于100，同时每个吸收池不可能完全相同，故在每次测定前应做吸收池配对试验。方法是取干燥洁净的吸收池，均装入测定用空白溶剂，以一只吸收池作空白，用测
28、定时所用的波长测定其他吸收池的吸收度，最后选择吸收最小的一只作为配对，测定并记录下其它吸收池的吸收度，供试品液的实际吸收度应是与吸收池(有空白溶剂时)吸收度之差。为减少误差，常用一个配对杯测定若干样品(也减少计算麻烦)，但应注意换液时充分洗涤。 2 对溶剂的要求 由于溶剂与溶质分子间形成氢键、偶极化等的影响，可以使溶质吸收波长发生位移。通常极性溶剂比非极性溶剂的影响大，在选择溶剂时应予以注意。测定供试品前，应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长附近是否有吸收峰，是否影响供试品测定。每次测定时应采用同一厂家、同一批号的试剂配制混合均匀的同一批溶剂。 3 检验 31 溶液配制 称量应按药典规定进
29、行。配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少，转移稀释时所取容积一般应不少于5mL。含量测定供试品应称取2份，如为对照品比较法，对照品也应称取2份。吸收系数检查也应称取供试品2份，平行操作。每份结果对平均值的偏差应在4-0.5以内。作鉴别或检查时可取样品1份。 32 测定 除另有规定外，应在规定的吸收峰波长4-2 nm以内，再测试几个点的吸收度，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确，除另有规定外，吸收峰最大波长应在该品种项下规定的波长4-1nm以内，否则应考虑该试样的真伪、纯度以及仪器波长的准确度。取吸收池时，手指拿毛玻璃面的两侧。样品溶液的量以池体积的45为宜，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用
30、擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无残留溶剂，为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面，可先用蘸有空白溶剂的擦镜纸擦拭，然后再用干擦镜纸拭净。吸收池放人样品室时应注意每次放入的方向相同。使用后用洗涤剂及水冲洗干净，晾干防尘保存。吸收池如污染不易洗净时可用发烟硫酸 硝酸(3：1 )混合液稍加浸泡后，洗净备用。如用铬酸钾清洁液清洗时，吸收池不宜在清洁液中长时间浸泡，否则清洁液中的铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面，并应充分用水冲洗，以防铬酸钾吸附于吸收池表面。 33 读数 一般供试品溶液的吸收度读数，以在0.30.7之间为宜，吸收度在此范围误差较小.置顶删除推送编辑阅读(0)分享(0)评论(0)分类：紫外
31、分光光度计.私人日志发表于21:02正在加载评论.正在加载.S53/54紫外分光光度计使用说明折叠 S53/54紫外分光光度计使用说明1. 开机自检与自校： 本仪器具备计算机自检与波长自校正功能，开机后显示窗两侧 8灯会亮，指示进入自检与自校状态，约5分钟。 2. 预热： 仪器开机自检与自校成功后，应 30分钟预热后才能进行测定工作。如紧急应用时请注意随时调0%T,调100%T。 3. 重调100%基线: 目的是精校 100%基线。调整时机：要对某波段范围作精密波长扫描曲线前；扣除参考样品背景时或示差分析；开机一定时间后；操作程序如下： (1)在样品室通光位上置入参考样品；(2)在起始波长 、
32、 结束波长 、 波长间隔 三标尺下用 或 确定起始波长、 结束波长、波长间隔参数值后，在按 波长参数 键至 当前波长 灯亮。(3)按功能 + 启动基线校正功能，启动后显示窗左侧 当前波长 灯亮。4. 调零： 目的：在定波长定量分析中，校正基本读数标尺两端（配合 100%T调节），进入正确定量测试状态； 调整时机：需在某一波长做定量分析，改变测试波长时或测试一段时间后，以及作搞精度测试前；操作：按“ 0%”键，基能自动调整零位。状态为“-”0%T值则不显示。 5. 调整100%T 目的：在定波长定量分析中，校正基本读数标尺两端（配合调零），进入正确测试状态；调整时机：进入定波长定量测试，更换测试
33、波长或测试一段时间后，以及作高精度测试前。（一般在调零前应加一次 100%T调整以使仪器内部自动增益到位）；操作：将用作背景的空白样品置入样品室光路中，盖下试样盖按下“ 100%T”键即能自动调整100%T（一次有误差时可加按）； 注：调整 100%T时整机自动增益系统重调可能影响0%T，调整后请检查0%T，如有变化可重调0%一次。 6. 设定波长按波长参数 键到当前波长灯亮，按 或 至要求波长，再按 波长参数 键确认，显示窗改变波长至设定值即可。 7. 改变试样槽位置让不同样品进入光路： 仪器标准配置中试样槽架是手动四位置的，用仪器前面的式样槽拉杆来改变，打开样品室盖以便观察样品槽中的样品位
34、置最靠近测试者的为“ 0”位置，依次为“1”、“2”、“3”位置。对应拉杆推向最内为“0”位置，依次向外拉出相应“1”“2”“3”位置，当拉杆到位时有定位感，到位时请前后轻轻推动一下以确保定位正确。 8. 改变标尺 本仪器设有两类各四中标尺： 第一类（光度类）有： 透射比：用于对透明固体或透明液体测量透射特点； 吸光度：用于采用标准曲线法或绝对吸收法定量分析，在动力学测定时亦能利用本系统； 浓度因子：用于在浓度因子法浓度直读时设定浓度因子； 浓度直读：用于标样法浓度直读时，作设定和读出，也用于设定浓度因子后的浓度直读。各标尺之间的转换用 模式 键操作并由其向对应的指示灯指示，开机设定为 透射比
35、 每按一次顺序循环。 第二类（波长类）有： 当前波长：指示当前波长，在设定波长时，可以用 或 设定指示波长。 起始波长：指示作起始波长的设定，可用 或 设定。 结束波长：指示作结束波长的设定，可用 或 设定。 波长间隔：指示波长扫描时数据点一般是1nm，峰谷检测时自动设定为0.1nm。 正在加载评论.正在加载.722型光栅/752型紫外分光光度计使用说明展开正在加载评论.正在加载. uv2100双光束 紫外可见分光光度计使用说明:折叠 uv2100双光束 紫外可见分光光度计使用说明:操作规程启动UV2100紫外可见分光光度计应用程序,软件将自动进入到自检画面.软件启动后,在菜单中点设置仪器,可
36、设置仪器的换灯点,除特殊测量外建议不要更改,使用最佳的换灯波长340nm作为换灯点.如果长期不使用氘灯和钨灯,可以在自检后点击氘灯和钨灯键以关闭两灯电源,延长灯的使用寿命,但在关闭后重新开启,需要再预热一段时间,才能使仪器达到最佳的测量效果.重新选择狭缝,需要重新自检.在菜单中点设置显示范围,可以设置谱图上面横轴和纵轴的范围,使之更适合观察所需的范围内的谱图.在菜单中点设置自动调节,将自动设置最合适的范围,以使所有数据都能合适的显示在图形上.(一)光谱扫描测量方式点击工具栏上的功能光谱项,进入光谱扫描测量后,首先点击参数项,进入参数选择页面,设置好光度范围,取样间隔,能量选择的参数将参比池和样
37、品池都加入参比溶液,盖好样品室盖.按下显示窗Baseline命令按钮,仪器将自动进行基线校正,此项工作只需在第一次测量时进行,只要不改变参比溶液和测量波长范围的情况下,只需校准一次.在样品池中加入样品液,单击测量命令按钮,就可进行测量运行了,当进行样品扫描测量时,显示器上将会动态显示实时图谱,当前拨岔路能够位置及对应的测量数据.在测量中途,若用户想中断实时测量,可单击停止按钮,便可中断测量,测量结束后,一切动态显示将停止.测量完成后,点击工具栏上的标尺,显示一垂直滚动条可观察数据.点击测量图谱右侧的样品数据也可以观察数据.单击保存按钮可储存当前图谱.单击打印按钮,便可通过打印机打印当前的扫描图
38、谱.(二)定波长测量方式单击工具栏光度上菜单栏,进入定波长测量方式.进行测量方式,波长个数,输入波长值和平均次数等参数设置.在测量前,必须进行校准,设置好参数后,在参比池和样品池中加入参比溶液,盖好样品室盖;按下Autozero按钮,仪器自动进行校准,此项工作只需在第一次测量时进行,只要不改变参比溶液和测量波长范围的情况下,只需校准一次;在样品池中加入样品液,单击测量命令按钮,则进行测量操作(三)时间测量方式单击工具栏上时间测量功能.点击菜单中的设置参数,在此选择测量方式,吸光度(ABS),透过率(T%),输入显示光度范围,测量时间,测量波长和取样间隔.在测量前,必须进行校准.设置好参数后,在
39、参比池和样品池中加入参比溶液,盖好样品室盖,按下Autozero按钮,仪器自动进行校准,此项工作只需在第一次测量时运行,只要不改变参比溶液和测量波长的情况下,只需校准一次,在样品池中加入样品液,单击测量命令按钮,则进行测量操作.(四)定量测量单击主菜单下定量菜单栏.定量测量有多种测量方式:单波长标准系数法,双波长等吸收点法,双波长系数倍率法,三波长法.单波长标准系数法进入定量测量方式后,点击参数按钮,进入参数选择对话框.A 浓度法在定量测量参数设置对话框中,输入测量波长值,选择拟合方式,选择是否要将零点作为拟合的有效值,输入标样浓度个数,同时在浓度标样中输入对应的浓度值.设置完毕后,按下确定按
40、钮,进入测量界面.先在参比池和样品池中放入参比液进行校零,按下AutoZero按钮,仪器将自动进行校准.按下Standard按钮,此键将变成Unknown,同时进入浓度标样的测量界面,此时依照参数设置的标样值,在样品池中加入对应的浓度标样,按下测量,出现输入标样号对话框,输入此时浓度标样对应的标样号,确定后仪器开始测量,依次测量完所有的标样后,标准曲线也同时自动生成.用标样建立好曲线后,按下Unknown按钮,此键将变成Standard,同时进入测量界面,在样品池中放入待测样品,按下测量按钮,仪器开始测量.注意:开,关机时,应该遵守开,关机原则.即开机时先开主机电源,等大约十秒钟氘灯点燃后开计
41、算机电源.关机时,先关计算机电源(关机前退出应用程序).不允许使用酒精,乙醚,汽油等有机溶液擦洗仪器.久放置不用时,应定期通电驱潮.正在加载评论.正在加载.分光光度分析-紫外及可见光分光光度法折叠 在分光光度计中，将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时，便可得到与众不同波长相对应的吸收强度。如以波长（）为横坐标，吸收强度（A）为纵坐标，就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法，称为分光光度法，也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法，称为紫外分光光度法；用可见光光源测定有色物质的方法，称为可见光光度法。它们与比色法一样，都以Beer-Lambert定律
42、为基础。 近年来，紫外及可见光分光光度分析已得到广泛的应用，它不仅可以用于物质的鉴定及结构分析，而且还可以用于某些物质含量的测定。 分光光谱技术可用于： 1) 通过测定某种物质吸收或发射光谱来确定该物质的组成。 2)通过测量适当波长的信号强度确定某种单独存在或与其他物质混合存在的一种物质的含量。 3) 通过测量某一种底物消失或产物出现的量同时间的关系，追踪反应过程。 一、紫外及可见光分光光度法 这是一种只在可见光及紫外光光谱应用范围内测量物质吸收辐射线的技术，应用十分广泛。其中分光光度计可用于精确测量特定波长的吸收值，而比色计则是一种较简单的测量仪器，其原理是利用虑光片来测量较宽波段（如可见光
43、中的绿光、红光或蓝光范围）的吸收值。 光吸收法则： 溶液对光的吸收有两个基本法则： 1)透过溶液的光的吸收值同吸收溶质的分子数目（即溶质浓度C）呈指数相关。 2)透过溶液的光的吸收值同透过吸收溶液的路径长度l成指数相关。 这两条法则包括在比尔朗伯关系式中。通常以入射光（Io）和出射光（I）的光密度来表示： Log10(Io/I)=lC 其中对于吸收物质及波长是一个常数，称为吸光系数或吸收系数，C的单位为mol/L或g/L，l的单位为ml。这一公式非常有用，因为大多数分光光度计设计为直接测量log10(Io/I)的值（A）或消光值（E）（旧教材中可能使用以废除的术语：光密度）。对于遵循比尔朗伯关
44、系的物质，A与C呈线性关系。吸收值常用下标表示其波长，如A550表示550nm处的吸收值。透过溶液的光的比例称为透光率（T），可由出射光和入射光的比值求得。 吸收值（A）（absorbance）由公式得出：A= Log10(Io/I) 透光率（T）（transmittance）通常以百分数表示：T=(I/Io)100%. （一）比色计 比色计用于测定颜色明显，并且是溶液主要组分的待测物，如血液中的血红细胞，也可以在待测物之中加入一种试剂，使其形成有色产物（一种生色团），如用茚三酮法测定氨基酸含量。定量分析某种物质要做标准曲线，标准曲线是在测定待测样品的同时测定已知含量的物质来制成的，而不是使用
45、比尔朗伯关系。 光源通常为钨丝灯泡，通过一个凸透镜聚焦后产生一束平行光，平行光穿过装有溶液的玻璃样品或小池，然后透过一个有色滤光片到达光电管检测仪，检测仪产生一个同落在光电管上的光密度成正比的电势，来自于光电管的信号被放大然后传递到电流计或数字读数器。 比色计的使用： 接通电源使仪器稳定，使用前至少要让灯预热5min； 选择一种同底物颜色互补的滤光器；调零（用空白对照调零）；调整灵敏度；分析样品及标准溶液；由于不同比色杯的吸光特性、杯壁厚度不同，因此为了提高精确度，同一试验应用同一比色杯，且在比色槽中摆放的方位相同；每次测样前清洗比色杯；经常重复测定同一溶液检验比色计的可重复性；用标准溶液绘制标准曲线。 由于大多数过滤器过滤出来的光的波带很宽，因而比色计既不能用于确定某种复合物，也无法分辨在混合液中吸收特性非常相近的两种物质。比色计所用光电管的变化系数为0.5%左右，因而不适合要求具有高度精确性的工作。使用这种最简单的仪器，由于仪表上对数测量刻度单位的随意性，即使是把表上的灵敏度/刻度调节到零控点，在一个仪器上获得的值不可