大肠杆菌的培养和分离PPT课件.ppt

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1、大肠杆菌的培养和分离,1、微生物,病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物,一、微生物的基础知识,(1)定义,(2)种类,(3)用途,2、菌落,(1)概念 (2)菌落是鉴定菌种的重要依据。,菌落,细菌的菌落特征因种而异,3、培养基,(1)成分,细菌培养:蛋白胨、酵母提取液、氯化钠 霉菌培养:无机物或添加蔗糖的豆芽汁,(2)种类,分离(纯化)细菌、 保存菌种,固体培养基,液体培养基,凝固剂,琼脂,作用,扩大培养细菌,液体培养基:,表面生长,均匀混浊生长,沉淀生长,固体培养基:菌落,菌苔,4、生活环境,霉菌:中性偏酸 细菌:中性偏碱,二、无菌技术,1.无菌操作的目的,防止培养基被其他微生物污染 (及避免

2、操作者被微生物感染),2、无菌技术包括,(1)将实验器具和培养基:高压蒸汽灭菌,(2)接种环(针)、试管口: 灼烧 灭菌,(3)实验操作空间:酒精+紫外线 消毒 (接种室(箱)、超净工作台),(4) 双手: 酒精 消毒,(5) 实验操作应在 酒精灯火焰 旁进行,(6)避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。,(7)棉塞(封口膜):只让空气通过,而空气中的微生物不能通过。,灼烧灭菌,高压蒸汽灭菌锅,()消毒定义: 利用化学或物理方法,杀死大部份致病微生物的过程。,3.消毒与灭菌,(2)灭菌的定义:,以化学剂或物理方法消灭所有微生物,包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒,而达到完全无菌之过程。 灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。,三、分离细菌方法,2、涂布分离法,1、划线分离法 ,1、划线分离法,2、涂布分离法,2、涂布分离法,2、培养:在LB液体培养基上扩大培养,四、大肠杆菌的培养和分离,1、大肠杆菌,(1)特性: 革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,(2)用途: 基因工程技术中被广泛采用的工具,3、分离,倒平板技术,倒平板操作,接种到固体斜面培养基,菌落长成后,置于4冰箱保存。,4、保存菌种,

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