奥林巴斯AU2700生化仪器简介及操作.ppt

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1、AU 2700 简要介绍,临床应用组,整机,整机,整机,Reagent Refrigeration Unit 试剂冰箱系统 该单元装有第一、第二试剂两个冰箱。避免试剂变质,每个冰箱温度介于412C之间,即使关机,试剂保持冷藏。 Reagent Dispense Unit 试剂分配单元 该系统由两根第一试剂探针(R12内圈、R11外圈)和两根第二试剂探针(R12内圈、R11外圈)组成。 试剂探针将第一试剂冰箱和第二试剂冰箱内的试剂分配到指定比色杯内。,系统概述,试剂冰箱系统,试剂分配单元,Sample Dispense Unit 样品分配单元 该系统由样品探针和冲洗样品探针的冲洗池构成。 样品探

2、针从样品架上的样品杯内取血清或尿液样本加到指定的比色杯内。 如果安装了ISE部分,样品探针也将样本加到ISE的样品池内。 Cuvette Wheel Unit 比色杯轮盘单元 比色杯轮盘(比色杯底托)上装有330个比色杯,测定时比色杯轮盘持续恒速旋转。,系统,样本分配单元,比色杯轮盘单元,Wash Nozzle Unit 冲洗单元 它提供18根冲洗头。冲洗头吸去完成测试的比色杯内的混合液,冲洗并干燥比色杯。 Mixing Unit 混合单元 混合单元是用搅拌棒混合试剂与血清或尿标本等混合物。 ISE Unit(optional ) ISE单元(选件) 通过混合物经过电极时,测定K、Na、Cl电

3、极和参比电极的电位差。 Syringe Unit 分配器单元 样品分配器分配血清或尿,试剂分配器分配试剂。该部分要求血清、尿和试剂等的分配量非常小,为了保证分配的准确性,使用多个注射器。,系统,冲洗单元,STAT Table Unit 急诊台(STAT)单元 此处有一个使用STAT台做急诊的开始开关和旋转STAT台的开关。STAT总是保持冷藏温度,即使关机也保持冷藏温度。除设置急诊样本外,还可以在STAT台上设置质控样品、标准品和ISE标准品 Tank Unit 桶单元 包括去离子水桶、清洗剂原液桶和清洗液稀释液桶。 根据操作每个桶提供需要的溶液。 如果装有ISE单元(任选),ISE单元包括缓

4、冲液桶、MID液桶和参比液桶桶。 Rack Transfer Unit 架子传送单元 该单元将架子送到吸样的位置。,系统,急诊台单元,Rack Feeder Unit 推进架子单元 该单元用于放置样品架子,它包括传送架子和架子缓冲单元。与分析操作保持一致,放置的每个架子被顺序送到吸样品的位置,取样之后架子被传送到架子接受器的位置。 Photometer Lamp Unit 光源灯 此处装有测定比色杯中混合物吸光度的光源灯。 I/F Cable I/F电缆 这是分析仪和数据处理器之间进行数据传输的通讯线。在数据处理器的背面连接主计算机和外部服务器的连接点。I/F线连接用户要求的每一个外部服务器。

5、,系统,推进架子单元,推进架子单元,Analysis Method 分析方法 仪器可以有三种分析方法 顺序分析法 架子条形码分析法 样品条形码法分析法。,分析方法,Sequential顺序分析法 仪器分析一个样品根据试验申请中提供的该样品的样品号及试验项目进行,按样品顺序号摆放样品。每加一个样品,仪器根据起始条件内设置的起始号开始计数样品。,分析方法,Rack ID架子条形码分析法 在架子条码方式下工作,系统按样品架条码自动计算样品号。根据样品信息分析样品。架子条形码在每个架子的正前方。按下列公式计算样品号。 “(架子条形码编号-1) 10 +杯子位置号” 架子条形码的上限:架子条形码只有99

6、9。 架子可以放在进架侧的任意位置,然而,每个架子上的样品必须对应其相应的编号。例如: 1到10号样品顺序放在1号条形码架子上。 41到50号样品顺序放在5号条形码架子上。 样品号是根据每次进入仪器的架子计算起始号,当测定下一个架子时,将重新根据架子条形码计算样品号。,分析方法,S.ID(barcode)样品条形码分析法 此法是靠条形码读数器识别样品杯上的条形码,所有测试资料根据条形码信息进行分析。样品杯的条形码必须事前准备。此方法允许架子放在进架位置的任何位置,样品可放在架子上的任何位置。,分析方法,Power Supply Unit电源单元 电源线连接每个系统单元电源。 为避免仪器受到外电

7、流干扰,仪器安装了保证安全使用的断路器。 Breaker and Switches 闸和开关 如果主断路器是开着,然后按RESET开关,恢复开着电源的孵育器、试剂冰箱和检测功能电源失败。也可按分电源的Power-on键,启动系统和显示操作屏幕。 在紧急情况下按EM STOP键,主电源立即关闭同时也关闭孵育器、试剂冰箱的供电。 Water Supply/Drain Unit 给水/排水系统单元 该单元用于连接给水口、废液口和冲洗废液口。,系统,Printer 打印机 以报告或列表的格式打印分析结果和各种设置内容。 Monitor Unit 监测单元 该单元包括显示操作屏幕的监测器,用于图像处理屏

8、幕的键盘和鼠标。 Data Processor Unit 数据处理器单元 数据处理单元使用PC机处理资料,PC机装有硬盘储存分析资料等,装有软盘驱动器使用软盘。,系统,键盘,光电校正(Photometer)单元说明 光学系统 光电测定系统 波长范围 340-800nm 13个波长:340、380、410、450、480、520、540、570、600、700、750、800nm 光源 卤素灯 12V/20W 检波器 硅酮光电极管装置 测定吸光度范围 0-2.5 转换10mm光通道,光学系统,分析处理器说明 分析类型 单-终点分析、双-终点分析、速率法、两点法和电极法(ISE) 电极法(ISE任

9、选) 同时可分析试验的个数 最多48项试验/样品 如果连接ISE(任选):最多51项试验/样品速度 分析速度: 1600次试验/每小时 如果连接ISE(任性):最多2134次试验/小时 反应液体量: 120-430ul 反应时间: 最多8分20秒 反应温度: 37C,分析处理,Method (方法学) 共六种 : End,Rate,Fixed;End1,Rate1,Fixed1 。 前三种与后三种的差别为:前三种是以试剂为空白的,后三种是以比色杯为空白的。 Reaction (反应方向) : + , - 。 End 与 Fixed 法不起作用,但是 Rate 法一定要输正确,方法学,END1(

10、终点法1) 这是系统个别试验参数设置试验的一种。 在终点分析法中,它定义用水空白吸光度作为每个光电测定点的参考测定值。水空白吸光度从光电测定中获得。 “END(终点法)”是特殊试验参数的一个试验设置,“END1(终点法1)”是另一种终点分析法。它用试剂空白吸光度作为每个光电测定点的参考测定值。 RATE1(速率法1) 系统个别试验参数设置试验。 在速率分析法中,它定义用水空白吸光度作为每个光电测定点的参考测定值。水空白吸光度从光电测定中获得。 “RATE(速率法)”是特殊试验参数的一个试验设置,“RATE1(速率法1)”是另一种速率分析法。它用试剂空白吸光度作为每个光电测定点的参考测定值。,方

11、法学,FIXED1(两点法1) 系统个别试验参数设置试验。 在两点分析法中,它定义用水空白吸光度作为每个光电测定点的参考测定值。水空白吸光度从光电测定中获得。 “FIXED(两点法)”是特殊试验参数的一个试验设置, “ FIXED1(两点法1)” 是另一种速率分析法。它用试剂空白吸光度作为每个光电测定点的参考测定值。 NO-LAG-TIME(无-延迟-时间) 如果反应过快,不能获得两点或更多点有效数据。如果这样,系统设置它,以便用延迟范围内的数据计算分析结果。 用于速率分析法的一种分析试验。,方法学,测定计算方法 该节解释该系统内可以进行的如下测定计算方法:试剂空白、终点分析法、速率法、两点分

12、析法、和样品空白矫正。,计算方法,试剂空白方法描述如下。 试剂空白(Reagent Blank) 确定测定值(反应OD值 ),试剂空白OD值 (试剂在每个光电测定点的OD值)和去离子水空白(光电测定数值)必须从试剂样品反应测定的OD值中减去。 通过做试剂空白,可以获得所有光电测定点试剂空白的OD值,在下图内显示。 用兰架子做0点判断(试剂空白),分别放3个装有去离子水的样品杯(血清、尿、其它),兰架子第一位(血清)、第十位(尿)、第四位(其它)。系统提供从样品杯中获得的4个数值,根据光电测定点计算试剂空白数据方法(试剂空白OD值)描述下面。 2点(个数值):2个OD值的均值 3点(个数值):2

13、个最接近OD值的均值 4点(个数值):除最大和最小值之外,2个OD值的均值,RB,RB,下面描述试剂第一点(第一点数据)OD值和最后一点(第二点数据)OD值。 First point reagent OD value(first data)(试剂第一点(第一点数据)OD值) 试剂第一点OD值(RB)=第一点测定的OD值-去离子水空白(光电测定值) 如果试剂第一点OD值超出试剂参数内设置的试剂OD值范围,数值将出现“y”“u”。 Last point reagent OD value(last data)(试剂最后一点(第二点数据)OD值) 试剂最后一点OD值(RB)= 最后一点测定的OD值-去

14、离子水空白(光电测定值) 如果试剂最后一点OD超出试剂参数内设置的试剂OD值范围,数值将出现“Y”“U”。,终点法分析(End Point),1-point Assay(1-点分析) 在特定的测定位置处测定反应混合物的OD值是通常说的终点法。 反应混合物OD值= (在特定位置的) OD - (0位置的) 0点 OD,2-point Assay (2-点分析(自身-空白方法) 这种终点法要求判断样品空白,作为空白通道在分配第二试剂前减去OD值,分配第 二试剂后从测定中减去空白通道中的OD值。减去与血清浊度和污染相关的数据,以 便获得高精确度的测定结果。 该法OD值按如下过程得到: K2=R1.V

15、/(R1.VR2.VS.V) K3=(R1.VS.V) /(R1.VR2.VS.V) 反应OD值=(PxK2P0)-(K3PzK2P0) 这个计算结果被定义为反应 OD 价值。,终点法分析(End Point),R1.V:第一试剂分配量 R2.V:第二试剂分配量 P0: 第一点试剂OD值 Pz: 分配第二试剂前的OD值 Px: 分配第二试剂后的OD值,终点法分析(End Point),End Assay(blank channel method)(终点法(空白通道法) 通过用空白通道测定血清浊度或其它干扰成分,然后从测定的OD值中减去确定反应混 合物真实的OD值。尽管使用附加空白通道是必要的,

16、但该方法比2-点分析提供更大的 测定精确度。 反应混合物OD值=有色反应通道的OD值(ODc)血清空白通道OD值(ODB),终点法分析(空白通道法),终点法分析(空白通道法),Rate Assay(速率法分析),Rate Assay(速率法分析) 该法用最小平方法计算测定每两点间吸光度变化(OD) 确定每分钟吸光度的变化率。,Double Rate Assay(双速率法) 该法用最小平方法计算光电测定每两点之间吸光度变化(OD) ,确定每分钟吸光度的变化率。接着,系统根据OD (2)OD (1)公式计算目标底物的OD速率。,Double Rate Assay,Fixed Point Assay

17、(两点法分析),Fixed Point Assay(两点分析) 该法确定反应发生特定位置两点之间OD值的不同。 反应混合物OD=ODBODA,参数设置,参数设置 增加一个新试验,编辑试验名称路径,点击 (A)Test Name 进入编辑试验名称画面,返回,编辑试验名称,点击F4 (Set),选择编号, 点击F5(Edit)编辑名称,退出,选择在线项目路径,返回,点击 (C) Round 进入选择在线项目画面,选择在线项目,点击F4 (Set), 再点击F5(Edit) 选择开展的所有项目,退出,录入参数表路径,返回,点击(I) Specific Test Parameter 进入录入参数表画面

18、,录入参数表,退出,点击F4(Set) 录入参数,end,end1不能设,设置小数点位数,读点设置,Point1 为主测定, Point2 为辅助测定 End 法: a )单试剂:一般均为 0-27 ,特例: ALB 为 04 ; b )双试剂(有样品空白功能): 027 ; 010 。 Rate 法: a )单试剂:延迟时间较短的,一般输 410 。 b) 延迟时间较长的,一般输 2127 。,Fixed 法:固定两个点之间去计算。 a) 单试剂苦味酸法肌酐: 14 ;尿素氮: 38 。 b) 双试剂苦味酸法肌酐: 1114 ;尿素氮: 1217 。 Linearity (线性) : Fst

19、 Lst Rate 法才输入,一般国产试剂 30% ;进口试剂: 15% 。 No-Lag-Time : Rate 法才输入,在读点期内,如果反应太快,超过线性( Linearity 限)仪器会自动用线性比较好的那一段来计算。,Min OD L Max OD H (吸光度限) Rate 法才输入,如果 Rate 法的反应,反应速度太快,出现了底物耗尽的情况,向下的反应会低于 Min OD ,向上的反应会超过 Max OD 。 Reagent OD Limit Fst. L Fst. H Lst. L Lst H 试剂空白 OD 限 : Fst 指的是 0 点, Lst 指的是 27 点。只对

20、Rate 法有用,一般向下的反应,输 0.92.5 ,向上的反应 -2.00.8,定标参数路径,点击(I) Calibration Specific 进入定标参数画面,返回,定标参数,.点击4(Set) 设置,选择项目名称,选择定标方法 :带标准液 :输入因数,标准液在 黄架子上的位置,方法输入 标准液浓度,方法输入因数,退出,设置试剂位路径,点击仪器状态 进入本画面,请点击(0) Reagent Status 进入试剂状态画面,返回,设置试剂位,1.点击F6(Edit) 设置试剂位,2.选择试剂位,3.选择固定试剂位,4.选择试验项目,5.选择试剂瓶大小,退出,试剂的准备与检查,试剂的准备与

21、检查,如果测定的标本特别多,如何给一个项目设定多瓶试剂? 奥林巴斯的生化分析仪最多可以给一个项目设定九瓶试剂:点击 ,先设一瓶试剂,再用光标选定一个空位置,点F6 后,选定项目、瓶子的规格,退出后,最后设定的为第一瓶试剂,以前的为第二瓶试剂,依此类推。,试剂准备,返回,点击仪器状态 进入本画面,请点击(0) Reagent Status 进入试剂状态画面,退出,试剂状态,返回,点击F5 Check Start 进入检查试剂画面,点击F7 Test Display 进入显示试剂量画面,退出,显示试剂量,R1试剂 mL量, 测定人次, 试剂位,R2试剂 mL量, 测定人次, 试剂位,关闭,检查试剂

22、,Reagent check, Reset Only Check Specified position Check Specified position (with ID) Check Changed position (with ID) Check All positions Start Cancel,复位 检查指定项目 用条形码检查指定项目 用条形码检查位置 改变的试剂 检查全部试剂,选择检查 方式,开始检查,退出,定标,返回,点击菜单 (U) User 出现下拉菜单,点击(C ) Calibration 进入定标选项画面,注释: 定标时首先准备好标准液, 在蓝色样品架的1号位放纯水, 在

23、黄色定标架放置相应的标准液 按提示选完项目,点F9 开始测定.,定标选项,RB Only: 只做空白 One Point: 只做一个标准 All: 全做 三者之间用 F6 转换,1.点击F4进入,2.选择定标项目,3.再点击F4 Entry 确认,退出,放置校准样品,1、放置试剂空白 蓝色架子相应位置的加入蒸馏水的试管,校准不同样品的位置 血清第一位 尿液第十位 其他第四位 做定标测定必须同时做空白测定,设置校准品位置,菜单中的cal No的设定值在黄架子的相应位置放该定标液的试管血清cal No1-10号放0001号黄架子,以此类推! 样品架摆放 蓝架子必须放在左侧第一位,黄架子紧跟蓝架子拜

24、访,返回,返回,定标曲线及结果检查,定标曲线路径,点击菜单 (U) User 出现下拉菜单,点击(A ) Calibration Curve 进入定标曲线画面,返回,定标曲线选项,点击要查看的项目 自动打开定标曲线,退出,定标曲线图,返回,CK,1,0.020,200,点击 (F5) Re Cal 可以修正定标曲线,点击 (F6)Factor 查看定标因数,退出,修改od值,OLYMPUS 2700,使用OLYMPUS AU系列生化分析中遇到的问题及解决方案,OLYMPUS 2700,定标失败的常见原因? 试剂空白的正确应用? 怎样避免高浓度标本漏检? 怎样避免交叉污染?,OLYMPUS 27

25、00,定标类型,AB :单标准定标,通过 0 点,OLYMPUS 2700,AA:双标准定标,可不通过 0 点,OLYMPUS 2700,多标准定标分为:2AB7AB,常用公式,1.POLYGONAL,2.Y=AX2+BX+C,3.SPLINE,OLYMPUS 2700,One-point 定标作用,定标失败的常见原因?,1.定标因数超过限制范围.,定标因数查看:,限制范围查看:,定标因数= 标准浓度( CONC ) / 吸光度( OD),OLYMPUS 2700,2.试剂空白超出设定范围.,试剂空白查看:,范围设定查看:,OLYMPUS 2700,3.没有准备预稀释液.,例如:做 I g G

26、需要把标本预稀释10倍,如果没有准备稀释液,或者没有检查稀释液瓶,定标操作都不会成功.,稀释液检查:,OLYMPUS 2700,4。线性度检查没有通过,OLYMPUS 2700,试剂空白的正确应用?,1.监测试剂的质量.,有质量问题的试剂,结果标记为:y.u. Y.U,OLYMPUS 2700,2.提高检测的准确性.,OLYMPUS 2700,3.试剂空白过大,可使结果出现负值,OLYMPUS 2700,为什么有的试验不用试剂空白会更好?,OLYMPUS 2700,数据处理过程,对测定OD值的相关检查,对测定浓度的相关检查,OLYMPUS 2700,怎样避免高浓度标本漏检? (1).输入正确的

27、线性范围, (P) (I) Dynamic Range: L 0 H 1000 测定结果底于线性标记为: G 超过线性标记为:F (2).输入恰当的No-Lag-Time: Yes MIN OD: 0.5 MAX OD: 2.5 正斜率速率法测定时,反应速度过快,结果标记为: D 负斜率速率法测定时,反应速度过快,结果标记为: B 具体判定如下:,OLYMPUS 2700,OLYMPUS 2700,OLYMPUS 2700,NO-LAG-TIME,Min OD,Max OD,a,b,c,YES,YES,NO,NO,0.5,0.3,-2.0,0.5,2.5,2.5,2.5,2.5,100,100,100,100,1000B,150,150,1000B,2000B,2000B,50,-B,不同参数对结果的影响,OLYMPUS 2700,怎样避免交叉污染?,OLYMPUS 2700,解决方法,AU2700 临床常见五种异常反应曲线,冲洗头不完全堵塞造成的异常反应曲线A及处理后的正常曲线B,冲洗头不完全堵塞造成的异常反应曲线A及处理后的正常曲线B,试剂针异常弯曲后造成的异常反应曲线A及修正后曲线B,光源灯异常造成的异常反应曲线A及换灯泡后曲线B,

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