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1、细菌形态观察简单染色法,一、目的要求: 1、显微镜下观察细菌个体的形态。 2、学习环境中微生物的检查方法，并加深对微生物分布广泛性的认识。,二、基本原理: 形态观察主要包括群体的形态和个体的形态观察。 细菌的基本形态主要分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类，近年还发现星状和四方形细菌等。细菌形态受培养时间、培养基成分、浓度、培养温度、培养时间等发生变化。 细菌菌落大多表面光滑湿润，有光泽，一般菌落较小，质地颜色均匀，同培养基结合不紧密。菌落特征与组成菌落的细胞结构、生长状况、排列方式、好气性和运动性直接相关。 细菌个体微小，较透明，必须染色方可呈现。根据细菌个体形态观察的不同要求，可将染色分为3种类型
2、：简单染色、鉴别染色、特殊染色。,简单染色法原理: 简单染色是利用单一染料对细菌进行染色。细菌在中性、碱性或弱酸性溶液环境中通常带负电荷，碱性染料（解离时分子的染色部分带正电荷）如美兰、结晶紫等易与细菌结合使其着色。,操作方法,1、涂片枯草芽孢杆菌 2、干燥：室温自然干燥 3、固定：有菌膜的一面向上，通过火焰23次，细 胞质凝固 4、染色：滴加染液(美蓝或者番红或者结晶 紫）染色时间为两分钟 5、冲洗：水洗至无色（载玻片倾斜，小水流从载玻 片一端自然流下带走染料，直到流下的水 为无色） 6、干燥：自然，吹干，吸干 7、镜检.,酵母菌的形态观察 及死活细胞的鉴定,酵母概述,酵母是单细胞的真核生物
3、。 酵母菌体细胞个大，无运动性。 酵母的繁殖方式分为有性繁殖和无性繁殖两种，以无性繁殖为主。 无性繁殖最普遍的方式是芽殖。,死活细胞鉴定原理,美蓝是一种无毒性的染料。 美蓝有氧化型和还原型两种状态。 氧化型为蓝色，还原型无色。 酵母活细胞由于体内的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由氧化型变为还原型。 酵母死细胞或者代谢作用微弱的细胞，还原能力弱，不能使美蓝由氧化型转变为还原型。,实验步骤,在载玻片中央加一滴0.1美蓝染色液，染色液过多会溢出，过少会在盖玻片下出现大量气泡。 吸取少量酵母菌液，稀释后滴半滴在载玻片的美篮染色液中，混合均匀； 拿镊子取一块盖玻片，先将一侧与菌液接触，缓慢放置盖玻片。 放置3min后镜检，观察酵母细胞的形态和出芽情况，根据细胞颜色区别死活细胞；,